CFTR对前脂肪细胞增殖和分化的影响

论文摘要

【目的】探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子（CFTR）对内脏脂肪组织前脂肪细胞增殖和分化的调控作用。【方法】分别采用CFTR基因敲除小鼠（CFTR KO）4、8周龄及同周龄野生型对照鼠,分离内脏脂肪组织前脂肪细胞,采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术检测增殖分化转录因子表达变化。采用地塞米松-异丁基甲基黄嘌呤-胰岛素（DMI）诱导3T3-L1细胞建立前脂肪细胞分化模型,采用免疫印迹（Western blot）技术检测CFTR及分化因子蛋白表达变化;并进一步转染CFTR沉默及过表达病毒,采用免疫印迹,实时荧光定量PCR技术,MTT检测和油红O染色,观察基因干预CFTR后对DMI诱导3T3-L1细胞增殖及分化的影响。采用高脂饮食肥胖小鼠模型,荧光定量PCR技术检测内脏前脂肪细胞增殖分化转录因子和CFTR基因水平表达。【结果】CFTR基因敲除鼠内脏前脂肪细胞指标Pref-1,增殖因子CyclinD1,分化转录因子PPARγ,C/EBPα表达明显降低（P<0.05）。DMI诱导3T3-L1细胞分化早期,CFTR的表达增加（P<0.05）;转染CFTR沉默病毒后,抑制DMI诱导的3T3-L1细胞增殖（C/EBPβ,C/EBPδ,CREB,KLF4）及末端分化指标（SREBP-1,PPARγ,C/EBPα）表达,而转染CFTR过表达病毒后,促进DMI诱导的3T3-L1细胞增殖及末端分化。高脂饮食喂养小鼠2,4周,高脂饮食组内脏前脂肪细胞增殖分化转录因子（PPARγ,C/EBPα,C/EBPβ,C/EBPδ,SREBP-1,FABP4）表达升高,CFTR基因表达升高（P<0.05）。【结论】CFTR可能通过调控前脂肪细胞增殖及分化影响脂肪组织功能。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 动物实验和分组
•   1.2 主要材料
•   1.3 实验方法
•     1.3.1 前脂肪细胞的分离
•     1.3.2 3T3-L1细胞培养及诱导分化
•     1.3.3 免疫印迹法
•     1.3.4 实时荧光定量PCR （RT-qPCR）
•     1.3.5 CFTR沉默和过表达病毒转染
•     1.3.6 MTT检测细胞增殖
•     1.3.7 油红O染色检测脂滴形成
•   1.4 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 CFTR基因敲除鼠内脏前脂肪细胞增殖和分化指标下降
•   2.2 3T3-L1细胞早期分化中CFTR的表达变化
•   2.3 CFTR对3T3-L1细胞早期增殖型分化的影响
•   2.4 CFTR对3T3-L1细胞分化末期的影响
•   2.5高脂饮食肥胖小鼠模型早期前脂肪细胞CFTR基因表达增强
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 晋晨晨,杜洁仪,黄雪莲,王冠蕾

关键词: 前脂肪细胞,增殖,分化

来源: 中山大学学报(医学版) 2019年02期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 中山大学中山医学院药理学教研室//心脑血管研究中心,中山大学孙逸仙纪念医院麻醉科

基金: 国家自然科学基金(81773722),广东省科技计划项目(2016A050502023)

分类号: R329.2

DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2019.0024

页码: 161-171

总页数: 11

文件大小: 3798K

下载量: 160