A型口蹄疫病毒多肽抗原表位的原核表达及多克隆抗体的制备

论文摘要

为构建A型口蹄疫病毒多肽抗原表位的原核表达载体,并制备多克隆抗体,利用基因合成技术将不同株的A型口蹄疫病毒抗原表位A-A10-61-VP1（第141～160位氨基酸）、A-A10-61-VP1（第200～212位氨基酸）、A22Iraq-VP1（第136～164位氨基酸）串联,在其间引入合适的linker序列,重组得到pET-28a（+）质粒中,转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,诱导表达重组蛋白,免疫新西兰兔制备多克隆抗体。成功构建了A型口蹄疫病毒抗原表位原核表达载体,获得高纯度重组蛋白和含A型口蹄疫病毒抗体的兔抗血清,为A型口蹄疫病毒诊断试剂盒的研发和A型口蹄疫病毒表位多肽疫苗的研究奠定基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 菌株与试剂
•   1.2 A型FMDV多肽抗原表位原核表达载体的构建
•   1.3 串联抗原表位的诱导表达
•   1.4 表达蛋白的纯化
•   1.5 表达蛋白的western-blot分析
•   1.6 间接ELISA方法的建立
•   1.7 多克隆抗体的制备及鉴定
• 2 结果与分析
•   2.1 原核表达载体的双酶切及测序鉴定
•   2.2 蛋白的纯化
•   2.3 Western-Blot分析
•   2.4 间接ELISA方法的建立
•   2.5 多克隆抗体抗体水平的检测
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 程凯慧,沈付娆,邹积振,苗自利,解晓莉,张亮,杨宏军,何洪彬

关键词: 型口蹄疫病毒,抗原表位,重组蛋白,多肽疫苗

来源: 江苏农业科学 2019年08期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 山东省农业科学院奶牛研究中心,山东省威海市文登区宋村畜牧兽医工作站

基金: “十三五”国家重点研发计划(编号:2016YFD0500904,2017YFD0500904),现代农业(奶牛)产业技术体系科学家岗位(编号:CARS-36),山东省自然科学基金(编号:ZR2016CP09),山东省农业科学院农业科技创新工程(编号:CXGC2016B14,CXGC2016A10)

分类号: S852.4

DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.08.042

页码: 184-187

总页数: 4

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