甘薯薯瘟病菌特异性PCR快速检测方法

论文摘要

针对目前甘薯薯瘟病鉴定耗时长,且缺乏特异性标记的问题,首先根据薯瘟病菌Ralstonia solanacearum特异性基因orf428设计了一对特异性分子检测引物,对13株薯瘟病菌、3株甘薯其他病原细菌和12株其他7种寄主青枯菌进行PCR检测,结果显示,只有薯瘟病菌能特异扩增1 641 bp的目标序列,且对菌体DNA最低检出率达到1 pg/μL.其次,通过水煮法快速提取DNA,简化了DNA提取方法;在PCR体系中加入体积分数为1%的二甲基亚砜(DMSO)后,扩增条带更为明亮,优化了PCR检测体系.此技术易于操作、灵敏度高、特异性强,可用于对病残体、发病植株和种苗中的薯瘟病菌检测,以对甘薯薯瘟病进行预测、监测及防治具有重要意义.

论文目录

• 0 引言
• 1 试验材料与方法
•   1.1 试验材料
•   1.2 引物设计
•   1.3 DNA提取
•     1.3.1 纯培养菌液DNA提取
•     1.3.2 水煮法快速提取甘薯组织中细菌DNA
•     1.3.3 冻融法快速提取甘薯组织中细菌DNA
•   1.4 PCR扩增体系及条件
•   1.5 PCR扩增灵敏度检测
• 2 结果与分析
•   2.1 薯瘟病菌特异性引物设计
•   2.2 引物特异性检测
•   2.3 PCR扩增灵敏度检测
•   2.4 甘薯植株中的薯瘟病菌分子检测
• 3 结论与讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张鸿,刘中华,林志坚,许泳清,李华伟,王嘉滢,林赵淼,李国良,邱永祥,纪荣昌,罗文彬,汤浩,邱思鑫

关键词: 甘薯薯瘟病,青枯菌,检测

来源: 江苏师范大学学报(自然科学版) 2019年04期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 植物保护

单位: 福建省农业科学院作物研究所/农业部南方薯类科学观测实验站/福建省特色旱作物品种选育工程技术研究中心,福建农林大学金山学院

基金: 省属公益类科研院所基本科研专项(2017R1026-4),现代农业产业技术体系细菌病防控项目(CARS-10-B14),福建省农业科学院创新团队项目(STIT2017-2-3),福建省农业科学院自由探索科技创新项目(ZYTS2019007)

分类号: S435.31

页码: 37-41

总页数: 5

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