CBL蛋白表达对H9N2亚型禽流感病毒细胞中复制及感染细胞凋亡的影响

论文摘要

CBL蛋白是一种E3泛素连接酶,在免疫调控、信号传导调节和对多种刺激的反应中起重要作用。本研究的主要目的是探讨真核表达的CBL蛋白对H9N2禽流感病毒增殖及感染细胞的凋亡情况的影响。荧光显微镜下观察真核表达重组载体EGFP-CBL在MDCK细胞内正常表达,qPCR结果证实禽流感病毒H9N2亚型感染的转染EGFP-CBL重组载体的MDCK细胞内病毒滴度明显少;Western blot结果证实禽流感病毒H9N2亚型感染的转染EGFP-CBL重组载体的MDCK细胞36 h,其凋亡蛋白Bcl-2/Bax比值较大;流式分析结果显示转染EGFP-CBL重组载体的MDCK的早期凋亡细胞的比例少,暗示CBL蛋白能够一定程度上抑制MDCK细胞的凋亡。该结果表明CBL蛋白能在一定程度上抑制H9N2禽流感病毒在MDCK细胞的扩增,并且抑制细胞的凋亡,为深入研究CBL蛋白抗病毒细胞机制提供了重要的试验依据。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验材料
•   1.2 荧光定量PCR设计合成
•   1.3 细胞培养和细胞转染
•   1.4 RNA的提取及反转录
•   1.5 荧光定量PCR反应体系和程序
•   1.6 Western blot检测
•   1.7 细胞流式检测
•   1.8 间接免疫荧光激光共聚焦检测
•   1.9 数据处理
• 2 结果
•   2.1 重组蛋白抑制AIV在MDCK细胞中增殖
•   2.2 荧光定量PCR检测CBL蛋白对H9N2病毒在MDCK细胞中增殖的影响
•   2.3 EGFP-CBL重组蛋白对细胞凋亡相关蛋白表达的影响
•   2.4 EGFP-CBL重组蛋白对H9N2病毒感染的MDCK细胞早期凋亡的抑制作用
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 郑阳,郝珊珊,张则,蔡佳希,宗嫚嫚,余远楠,田晓宁,冯秀丽

关键词: 真核表达,亚型病毒,细胞凋亡

来源: 畜牧与兽医 2019年05期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 南京农业大学动物医学院/农业部动物细菌学重点实验室/教育部"动物健康与食品安全"国际合作联合实验室

基金: 国家重点研发项目(2017YFD0500706),国家自然科学基金(31872458)

分类号: S852.65

页码: 108-113

总页数: 6

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