拟南芥AtNHX5基因启动子的克隆和组织定位分析

论文摘要

为了探明拟南芥内膜反向转运体 AtNHX5基因启动子（proNHX5）功能及基因的组织表达模式,从基因组中克隆 AtNHX5基因开放阅读框（ORF）上游侧翼调控区1 807 bp序列,发现该启动子具有典型启动子一般特征,不仅具有TATA-box、CAAT-box等核心元件,还含有与光响应、激素响应、逆境诱导响应和分生组织表达调控元件。构建 AtNHX5基因启动子与GUS的融合表达载体,通过农杆菌花序浸染法转化野生型拟南芥获得转基因植株。利用组织染色法鉴定转基因拟南芥的GUS表达模式,发现在子叶、下胚轴和花中有显著的GUS酶活性,成熟叶片和根中只有局部检测到GUS表达,在未成熟果荚中只有在果荚顶端和基部存在GUS酶活性,说明 AtNHX5基因启动子与GUS的融合表达载体成功构建且正常启动GUS基因表达,同时也表明, AtNHX5基因主要在这些部位表达,且表达具有时空特异性。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 植物材料及生长条件
•   1.2 菌株、载体
•   1.3 引 物
•   1.4 DNA提取及 AtNHX5基因启动子克隆
•   1.5 AtNHX5基因启动子序列分析
•   1.6 载体构建及植株转化、筛选
•   1.7 GUS染色分析
• 2 结果与分析
•   2.1 拟南芥 AtNHX5基因启动子的克隆及顺式作用元件分析
•   2.2 pCAMBIA1391-proNHX5-GUS启动子表达载体的构建及鉴定
•   2.3 拟南芥转基因植株的获得
•   2.4 AtNHX5启动子在拟南芥中的表达分析
• 3 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李静雯,厚毅清,陈军,朱天地

关键词: 基因,启动子,克隆,表达分析

来源: 西北农业学报 2019年12期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 甘肃省农业科学院生物技术研究所

基金: 国家自然科学基金(31660391,31460350),甘肃省农业科学院农业科技自主创新专项现代生物育种项目(2019GAAS08),甘肃省农业科学院中青年基金(2017GAAS92)~~

分类号: Q943.2

页码: 2035-2042

总页数: 8

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