导读:本文包含了血管纹论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:血管,细胞,氧化酶,听力,相关性,葡萄糖,屏障。
血管纹论文文献综述
刘斌,李吉平,刘君[1]（2019）在《叁磷酸腺苷在新生大鼠耳蜗血管纹缘细胞中的释放机制》一文中研究指出目的探究新生大鼠耳蜗血管纹缘细胞中ATP释放的机制。方法原代培养新生SD大鼠血管纹缘细胞,利用钙离子荧光探针、生物发光法测定ATP浓度和β-氨基己糖苷酶释放率测定法来研究ATP和GPN与P2YR-PLC-IP3通路诱导的内质网钙库反应之间的关系,以及内质网钙库与细胞外ATP浓度和β-氨基己糖苷酶释放率的关系。结果 ATP和GPN可通过P2YR-PLC-IP3通路诱发内质网钙库释放,可被P2YR-PLC-IP3通路拮抗剂抑制。缘细胞外ATP浓度和β-氨基己糖苷酶释放率与细胞内钙离子浓度呈正相关。结论缘细胞外ATP作用于P2Y嘌呤能信号系统触发内质网钙库释放,胞内钙离子诱导溶酶体胞吐作用释放ATP至胞外,从而发挥其生物学作用。(本文来源于《中华耳科学杂志》期刊2019年03期）
周颖[2]（2019）在《GPER通过cAMP/PKA途径调节衰老血管纹周细胞上BK_(Ca)通道的研究》一文中研究指出目的:以豚鼠耳蜗血管纹PCs为研究对象,探讨雌激素受体GPER对耳蜗PCs上BK_(Ca)的表达和功能的调节及其与年龄相关性听力损伤的关系。方法:动物实验:选取8周龄健康豚鼠随机分为Control组、D-半乳糖衰老模型组(D-galactose,D-gal)和D-gal+G1组。采用Morris水迷宫检测各组豚鼠行为的变化;用紫外分光光度法检测各组豚鼠不同组织中SOD活性和MDA含量;用听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)检测不同组豚鼠听力的变化;用免疫荧光技术检测血管纹PCs上BK_(Ca)和EPER表达的改变;用膜片钳技术检测GPER对PCs上BK_(Ca)电流的影响。细胞实验:在无菌条件下提取豚鼠血管纹周细胞进行培养,实验分为Control、D-gal、D-gal+G1、D-gal+G1+SQ22586和D-gal+G1+H89组。采用免疫荧光技术和Western技术检测GPER激动剂G-1对PCs上BK_(Ca)和cAMP/PKA表达的改变;用膜片钳技术检测GPER对PCs上BK_(Ca)电流的影响。结果:动物实验:(1)Morris水迷宫行为测试显示D-gal组豚鼠的空间学习能力和记忆有损伤;SOD活性和MDA含量检测结果显示D-gal组存在氧化应激损伤;(2)与Control组相比,D-gal组ABR阈值升高且Ⅰ波振幅明显降低(P<0.01),D-gal+G1组较D-gal组相比,ABR阈值减低且Ⅰ波振幅升高(P<0.01);(3)与Control组相比,D-gal组血管纹PCs上GPER表达明显减少(P<0.01),D-gal+G1组较D-gal组相比没有差异;(4)与Control组相比,D-gal组血管纹PCs上BK_(Ca)表达明显减少(P<0.01),G1干预后,血管纹PCs上BKCa表达升高;(5)与Control组相比,D-gal组血管纹PCs的电流密度和BK_(Ca)净电流均明显减小(P<0.01),G1干预后,血管纹PCs的电流密度和BK_(Ca)净电流均增大(P<0.01);细胞实验:(6)与Control组相比,D-gal组PCs上BK_(Ca)表达明显减少(P<0.01),G1干预后,PCs上BK_(Ca)表达明显升高,但给予cAMP阻断剂(SQ22586)和PKA阻断剂(H89)后可以部分抑制G-1对PCs上BK_(Ca)表达的上调;(7)与Control组相比,D-gal组PCs的电流密度和BK_(Ca)净电流均明显减小(P<0.01),D-gal+G1组较D-gal组相比,PCs的电流密度和BK_(Ca)净电流均增大(P<0.01),但给予cAMP阻断剂(SQ22586)和PKA阻断剂(H89)后可以部分抑制了G-1对PCs上BK_(Ca)电流密度的上调。结论:GPER可能激活cAMP/PKA信号传导途径上调血管纹周细胞上BK_(Ca)表达和功能,从而发挥对年龄相关性听力损伤的保护作用。(本文来源于《石河子大学》期刊2019-05-01）
李轶,刘会占,何志洲[3]（2019）在《顺铂对耳蜗血管纹毒性作用的研究》一文中研究指出目的探讨顺铂对内耳血管纹的毒性机制。方法使用在体小鼠模型,用记录内淋巴电位的方法,研究使用顺铂是否可以迅速影响内淋巴电位的幅度。用离体培养的小鼠的血管纹中间细胞,记录中间细胞的膜电位,观察顺铂是否能够影响中间细胞胞膜上离子泵的转运能力和离子通道的通透性。结果在实验动物中注射顺铂后并不能改变其内淋巴电位的幅度。在培养的中间细胞上观察到,灌流顺铂对细胞静息膜电位没有影响。结论使用顺铂一个疗程后出现的内淋巴电位降低,并不是通过对血管纹上离子通道或离子泵的影响引起的,顺铂对血管纹的功能不能造成急性损伤。(本文来源于《中华耳科学杂志》期刊2019年01期）
陈林军,邱士伟,龙熙,陈磊,唐朝颖[4]（2018）在《Mitf-M基因突变对猪耳蜗血管纹发育的影响》一文中研究指出目的研究Mitf-M基因突变是否会引起血管纹毛细血管、边缘细胞的变化,从而进一步了解Mitf-M基因突变引起Waardenburg综合征的病变机制。方法取出生后7d、10d、30d、40d的野生型和Mitf-M突变型猪共24头,分离解剖耳蜗外侧壁,运用免疫组织化学技术染色,观察野生型和Mitf-M突变型猪耳蜗血管纹毛细血管、边缘细胞在出生后不同时期的免疫荧光的差异。结果 Mitf-M突变型猪与野生型猪在出生后7d、10d及30d,血管纹毛细血管之间没有明显差异,而在40d,Mitf-M突变型猪相对野生型猪的血管纹毛细血管出现明显的减少,并有统计学意义。在7d、40d,Mitf-M突变型猪耳蜗血管纹边缘细胞的细胞骨架均无明显破坏,边缘细胞数量之间没有明显差异。结论 Mitf-M基因突变不引起血管纹边缘细胞骨架的破坏及边缘细胞数量的减少,且Mitf-M突变型猪在出生后早期30d内血管纹毛细血管没有明显变化,在40d后Mitf-M突变型猪较野生型猪的耳蜗血管纹毛细血管出现明显的减少。(本文来源于《中华耳科学杂志》期刊2018年04期）
胡泠影,张园园,曾峰,华清泉[5]（2018）在《葡萄糖氧化酶诱导大鼠血管纹边缘细胞氧化应激模型的建立与评估》一文中研究指出目的采用葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GO)作用于体外培养的血管纹边缘细胞(marginal strial cells,MC)建立大鼠MC的氧化应激模型,评价该模型的可靠性。方法提取幼年大鼠耳蜗MC,原代培养并鉴定后通过CCK8法检测GO对MC损伤的半抑制浓度(half maximal inhibilory concentration,IC50);然后用IC50浓度的GO处理MC作为实验组,不加GO处理的MC作为对照组,各处理24小时后,比较各组结果。流式细胞术和免疫荧光检测两组细胞中活性氧(ROS)的含量,WST试剂盒检测两组超氧化物歧化酶(SOD)的活性,Westernblot检测两组细胞聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1(PARP1)和凋亡蛋白cleaved-caspase-3的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率,用荧光试剂盒Hoechst/PI法观测凋亡细胞的形态学改变,比较两组结果。结果 GO对MC损伤的IC50为32.9mU/ml;与对照组相比较,实验组MC内ROS含量升高、SOD活降低,cleaved-caspase-3和PARP1表达升高,MC凋亡率增多,细胞核发生皱缩、碎裂。结论 GO作用于体外培养的大鼠MC可成功制作稳定可靠的氧化应激损伤模型,促使MC发生凋亡。(本文来源于《听力学及言语疾病杂志》期刊2018年03期）
姜洪艳[6]（2018）在《PARP-1在大鼠耳蜗血管纹边缘细胞氧化应激损伤中的作用及机制研究》一文中研究指出第一部分大鼠耳蜗血管纹边缘细胞的原代培养及葡萄糖氧化酶诱导的氧化应激模型的建立目的:大鼠耳蜗血管纹边缘细胞(marginal cells,MCs)的原代培养及葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GO)诱导的MCs氧化应激模型的建立。方法:取SD大鼠乳鼠(3日龄),麻醉断头后,在解剖显微镜下分离去除两侧的颞骨,可见透明的骨性耳蜗,并分离出耳蜗侧壁的血管纹组织。经酶消化后加入血清浓度为2%的动物上皮细胞培养基中,接种于细胞培养板并置于37℃,5%CO_2的培养箱中培养。经选择性消化和差速贴壁方法纯化MCs后,用倒置显微镜每日观察MCs形态并采用免疫荧光的方法鉴定MCs。将MCs置于新鲜动物上皮细胞培养基中并加入5 mM葡萄糖(glucose,G),分别用不同浓度的GO处理,用CCK-8试剂盒筛选出最适宜的作用浓度。再分别用相同浓度的GO处理MCs不同的时间,用CCK-8试剂盒筛选出最适宜的作用时间。为进一步验证氧化应激模型的建立,通过流式细胞仪检测相同浓度的GO不同时间点下MCs内的ROS水平。结果:倒置显微镜下观察到MCs贴壁生长,多角形外观,排列紧密,界限清晰,呈现单层“铺路石样”外观。免疫荧光方法检测MCs内角蛋白18(CK-18)阳性。CCK-8检测结果显示GO浓度大于20 U/L时能够引起MCs活性下降,GO浓度处于20-50 U/L之间时虽然能够导致MCs活性下降,但没有统计学意义,GO浓度为60 U/L时显着降低MCs活性(P﹤0.01),因此选用60 U/L GO处理MCs。用60 U/L的GO分别干预MCs 0 h、2 h、4 h、6 h及8 h,MCs活性逐渐降低,但2 h组较对照组相比无统计学意义,4 h组较对照组相比有统计学意义(P﹤0.01),6 h组和8 h组虽然也具有统计学意义,但MCs活性较低,状态较差。因此后续实验选用60 U/L的GO干预MCs 4h。用60 U/L GO处理MCs,流式细胞仪检测结果显示MCs内ROS水平呈时间依赖性升高。结论:成功的培养出大鼠耳蜗血管纹MCs,得到较高纯度的MCs。用60 U/L GO作用于MCs 4 h后建立了体外MCs氧化应激模型。第二部分葡萄糖氧化酶诱导边缘细胞Parthanatos目的:研究PARP-1在葡萄糖氧化酶(GO)诱导的耳蜗血管纹边缘细胞(MCs)氧化应激损伤中的作用及其可能的分子机制。方法:将MCs置于新鲜动物上皮细胞培养基中并加入5 m M葡萄糖(G),用60 U/L GO处理纯化后的MCs,通过Western blot和免疫荧光的方法检测MCs内PAR蛋白水平和表达分布情况、线粒体凋亡诱导因子AIF胞内表达变化以及PARP-1的表达变化。通过JC-1染色检测线粒体膜电位(MMP)的变化情况。通过PARP-1 si RNA转染下调PARP-1的表达来明确PARP-1在葡萄糖氧化酶诱导的边缘细胞Parthanatos中的作用,转染MCs(MOI=30)后将分为以下四组:对照组、GO、GO+Ad-Con、GO+Ad-PARP-1-RNAi。通过Annexin V/PI双染检测MCs的死亡情况。结果:Western blot结果显示,随着GO处理时间的延长,MCs内PAR蛋白水平依次增加,免疫荧光结果显示GO处理组的MCs内PAR表达水平增加,且主要表达于细胞质。与对照组相比,GO处理组的MCs内AIF线粒体蛋白水平降低(P﹤0.05),细胞浆和细胞核内AIF蛋白水平升高(P﹤0.01,P﹤0.05);PARP-1在线粒体、细胞浆和细胞核内蛋白水平升高(P﹤0.01,P﹤0.05,P﹤0.05);免疫荧光结果显示GO处理组的MCs核内AIF水平升高,发生了细胞核转位;JC-1染色结果显示GO处理组的MCs内MMP随着GO处理时间的增加不断下降,导致了线粒体去极化;流式细胞仪结果显示PARP-1 si RNA转染MCs后,与GO+Ad-Con组相比,GO+Ad-PARP-1-RNAi组的PI阳性率降低(P﹤0.05);MMP升高(P﹤0.01);PAR蛋白表达水平降低(P﹤0.05);AIF在线粒体内的蛋白表达水平升高(P﹤0.05),在细胞浆和细胞核内蛋白表达水平降低(P﹤0.05,P﹤0.05);PARP-1在线粒体、细胞浆和细胞核内蛋白表达水平降低(P﹤0.01,P﹤0.05,P﹤0.05);与GO+Ad-Con组相比,免疫荧光结果显示GO+Ad-PARP-1-RNAi组AIF没有出现明显的细胞核转位现象。结论:在GO诱导的耳蜗血管纹MCs氧化应激损伤过程中PARP-1明显激活,PAR积聚,AIF由线粒体向细胞核的转位,MMP明显下降,诱导了MCs Parthanatos;PARP-1 si RNA转染可抑制MCs Parthanatos,明确了PARP-1在GO诱导的MCs Parthanatos中的重要作用。第叁部分探讨PARP-1对葡萄糖氧化酶诱导的自噬的调节以及自噬对边缘细胞Parthanatos的影响目的:探讨葡萄糖氧化酶(GO)是否能够诱导自噬的表达,PARP-1是否参与自噬的调节以及自噬对GO诱导的MCs Parthanatos的影响。方法:将MCs置于新鲜动物上皮细胞培养基中并加入5 m M葡萄糖(G),用60 U/L GO处理纯化后的MCs,在不同的时间点通过Western blot检测自噬标志性蛋白LC3和P62表达水平的变化;用60 U/L GO处理纯化后的MCs之前,给予自噬抑制剂3-MA 10m M,通过Western blot和免疫荧光的方法检测自噬流的变化,给予自噬抑制剂3-MA后将分为以下四组:对照组、3-MA组、GO组、GO+3-MA组;通过PARP-1 si RNA转染下调PARP-1的表达明确PARP-1是否参与自噬的调控,通过Western blot检测自噬标志性蛋白LC3和P62表达水平的变化,转染MCs后将分为以下四组:对照组、GO组、GO+Ad-Con、GO+Ad-PARP-1-RNAi;通过Annexin V/PI双染检测MCs死亡情况;通过JC-1染色检测线粒体膜电位(MMP)的变化情况;通过Western blot检测PAR蛋白表达变化;通过Western blot检测AIF和PARP-1分别在线粒体、细胞浆和细胞核内蛋白表达变化。结果:Western blot结果显示,随着GO处理时间的延长,LC3-Ⅱ的表达水平逐渐增加,P62的表达水平逐渐降低;Western blot结果显示,与GO组相比,GO+3-MA组的LC3-Ⅱ的蛋白表达水平降低(P﹤0.05),P62的蛋白表达升高(P﹤0.05),免疫荧光检测结果显示,与GO组相比,GO+3-MA组的LC3斑点状荧光明显减少;Western blot结果显示,与GO+Ad-Con组相比,GO+Ad-PARP-1-RNAi组的LC3-Ⅱ的表达水平降低(P﹤0.05),P62的表达水平增加(P﹤0.05);与GO组相比,流式细胞仪结果显示,GO+3-MA组的PI阳性率升高(P﹤0.05),MMP降低(P﹤0.01);PAR蛋白表达水平升高(P﹤0.05);AIF在线粒体内的蛋白表达水平降低(P﹤0.05),在细胞浆和细胞核内蛋白表达水平升高(P﹤0.05,P﹤0.05);PARP-1在线粒体、细胞浆和细胞核内蛋白表达水平升高(P﹤0.05,P﹤0.05,P﹤0.05)。结论:GO处理MCs能够诱导自噬增加;PARP-1 si RNA转染下调PARP-1的表达能够抑制自噬表达;抑制自噬可促进MCs Parthanatos,说明自噬在在GO诱导的耳蜗血管纹MCs氧化应激损伤过程中起着保护性作用。(本文来源于《华中科技大学》期刊2018-05-01）
塞娜,张桐,吴军,韩维举[7]（2018）在《小鼠耳蜗血管纹血-迷路屏障免疫组织化学研究》一文中研究指出目的利用免疫组织化学、免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜技术研究小鼠血管纹组织形态、血-迷路屏障的组成,为耳蜗血管纹血-迷路屏障病理生理学研究提供基础。方法快速分离出完整的小鼠血管纹组织,应用免疫组织化学、免疫荧光染色等方法对血管纹上各层组织、细胞进行标记,利用激光共聚焦显微镜详细观察其形态结构特点,观察血-迷路屏障的组成及形态特点。结果完整解剖出小鼠的血管纹组织呈自然弯曲状态,颜色为半透明淡红色,免疫荧光染色观察叁层细胞,边缘细胞呈近圆形的多边形,致密排列,其紧密连接蛋白呈线性分布;基底细胞呈扁长形连成一片;毛细血管网夹于边缘细胞与基底细胞之间贯穿血管纹全程,周细胞伴行血管并包裹毛细血管;中间细胞的血管周巨噬细胞呈树枝样,其足突伸出与微血管壁紧密接触。结论边缘细胞、中间细胞、基底细胞及毛细血管网构成耳蜗血管纹的基本结构,毛细血管内皮细胞、基底膜、周细胞、血管周巨噬细胞通过细胞间的紧密连接共同组成血-迷路屏障。(本文来源于《中华耳科学杂志》期刊2018年02期）
宋佳,王洋,刘艳辉,马克涛,李丽[8]（2017）在《豚鼠耳蜗血管纹TMEM16A随鼠增龄的表达变化》一文中研究指出目的探讨跨膜蛋白16A(transmembrane protein 16A,TMEM16A)在不同鼠龄豚鼠耳蜗血管纹上的表达及其与年龄相关性听力下降之间的关系。方法将健康豚鼠按照年龄分为:2周组、3月组、1年组、D-半乳糖(D-galactose,D-gal)衰老模型组;听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)检测不同鼠龄豚鼠的听力变化;免疫荧光技术和免疫印迹实验(Western blot)检测TMEM16A在不同鼠龄豚鼠耳蜗血管纹中的分布和表达改变。结果 ABR反应阈值随鼠龄增长呈逐渐增高趋势,D-gal组与其他3组之间的差异具有统计学意义(P<0.01)。TMEM16A在不同鼠龄豚鼠耳蜗血管纹中均有表达,且表达量从2周组到1年组随鼠龄的增加呈上升趋势(P均<0.05);D-gal组表达量减少,与3月组和1年组均有统计学意义(P<0.05)。结论 TMEM16A在豚鼠耳蜗血管纹表达的变化可能与年龄相关性听力下降相关。(本文来源于《西安交通大学学报(医学版)》期刊2017年06期）
宋佳[9]（2017）在《钙激活氯通道在不同鼠龄豚鼠耳蜗血管纹的表达变化》一文中研究指出目的:研究2周(2 weeks,2 w)、3月(3 months,3 m)、1年(1 year,1 y)和D-半乳糖(D-galactose,D-gal)衰老模型组豚鼠耳蜗血管纹中,钙激活氯通道(gcalcium-activated chloride channels,CaCCs)的组成蛋白-跨膜蛋白A(transmem-brane protein 16A,TMEM16A)和跨膜蛋白B(transmem-brane protein 16B,TMEM16B)的表达,以及其表达量与年龄性听力改变的相互关系,探讨这两种通道蛋白在老年性耳聋发生发展中可能发挥的作用。方法:D-gal颈背部皮下注射制备衰老模型,并利用Morris水迷宫及SOD活性、MDA含量检测来验证衰老模型。然后通过听性脑干反应(ABR)检测不同年龄组别豚鼠的听力水平变化;利用免疫荧光技术标记豚鼠耳蜗血管纹上的TMEM16A和TMEM16B,研究不同年龄组豚鼠TMEM16A及TMEM16B在血管纹的时空表达;通过QRT-PCR以及Westen blot技术检测血管纹TMEM16A及TMEM16B在蛋白和mRNA水平的表达变化;分析它们与年龄相关性听力损失之间可能存在的关系。结果:(1)衰老模型制备完成后发现,D-gal组豚鼠进食及自主活动均减少,毛色枯槁无光泽,掉毛严重;Morris水迷宫行为测试发现实验组豚鼠较年轻豚鼠逃避潜伏期延长,而穿越平台次数少(P<0.01,n=10);生化指标检测发现实验组豚鼠SOD活性升高,MDA含量降低(P<0.01,n=10);ABR阈值实验组明显高于年轻豚鼠(P<0.01,n=10)。(2)ABR检测结果显示,其阈值虽呈年龄相关性升高,但只有D-gal和3 m组之间具有统计学差异(P<0.01,n=10)。(3)免疫荧光结果显示不同年龄组别的豚鼠耳蜗血管纹均有TMEM16A及TMEM16B表达,且其荧光强度随年龄增长逐渐增强,但D-gal组强度减弱。(4)QRT-PCR结果显示各年龄组别豚鼠耳蜗血管纹中TMEM16A及TMEM16B mRNA的表达水平随年龄而改变。其表达水平随鼠龄增加呈递增趋势,但D-gal组明显降低。D-gal组与其他各组(除2 w外)之间比较均有统计学意义(P<0.05,n=6)。(5)Westen blot技术发现TMEM16A及TMEM16B在各年龄组别豚鼠耳蜗血管纹蛋白水平表达量有差异。出生后其表达水平随鼠龄增加而上调,但D-gal组时明显下降。D-gal组与其他各组(除2 w外)之间比较均有统计学意义(P<0.05,n=6)。结论:豚鼠耳蜗血管纹TMEM16A和TMEM16B的表达量随豚鼠的衰老明显下降,可能与年龄相关性听力减退有一定的相关性。(本文来源于《石河子大学》期刊2017-06-01）
张桐[10]（2017）在《噪声引起耳蜗血管纹损伤及其调控机制研究》一文中研究指出噪声作为环境污染的一部分,对人们精神、心理及脏器系统带来不同程度的危害。最严重的是对听觉系统不可逆的损害。研究血管纹损伤分子机制为噪声性聋(NIHL)提供更有效的防治办法。耳蜗外侧壁包括有血管纹(SV)和螺旋韧带(SL),其中血管纹处的血-迷路屏障(BLB)对维持耳蜗内电位(EP)、调控内耳离子和体液平衡等具有重要作用。噪声引起的耳蜗血管纹血-迷路屏障(BLB)损伤是噪声性聋的重要影响因素之一。既往研究发现,血-迷路屏障除包含有微血管内皮细胞(ECs)和基膜(BM)外,还有周细胞(PCs)和血管周围巨噬细胞样黑色素细胞(PVM/Ms)的存在。PVM/Ms分泌色素上皮衍生因子(PEDF),具有抗血管新生、抗氧化、保护血管通透性的作用。血管内皮生长因子A (VEGFA)具有促进血管新生、增加血管通透性的作用。PEDF、VEGFA可通过调节细胞间连接蛋白的表达,调控BLB通透性。ZO-1、VE-Cadherin和Occludin是血管纹BLB中的连接蛋白,在维持BLB稳定性方面具有重要的作用。本实验在成功构建噪声性聋听阈永久性阈移动物模型的基础上,利用免疫荧光染色、耳蜗冰冻切片、血管纹铺片和激光共聚焦纤维成像扫描技术,对噪声暴露前后不同时间点耳蜗血管纹处PVM/Ms分布变化进行分析比较。观察到PVM/Ms荧光染色分布于耳蜗外侧壁、基底膜和螺旋缘,发现噪声暴露后急性期耳蜗PVM/Ms荧光染色分布减少。噪声暴露1天后PVM/Ms荧光染色分布率增加,5天达到峰值,14天恢复至噪声前水平。PVM/Ms可能通过分泌PEDF促进血管纹组织修复、拮抗血管内皮生长因子A (VEGFA)、抑制血-迷路屏障(BLB)通透性增加。为研究噪声引起的PEDF、VEGFA变化及PEDF、VEGFA对连接蛋白的影响作用,利用免疫印迹试验(Western blot)和实时荧光定量PCR (qPCR)技术对噪声暴露前后耳蜗外侧壁连接蛋白、色素上皮衍生因子(PEDF)、血管内皮生长因子A (VEGFA)及其受体VEGFR1、VEGFR2进行蛋白水平和mRNA水平的测试比较。发现噪声暴露后急性期 PEDF、VEGFA、VEGFR1、VEGFR2、VE-Cadherin 和 ZO-1 表达下调,Occludin 表达上调。PEDF、ZO-1、VE-Cadherin噪声损伤急性期(NE)至噪声后7天(NE7d)表达上调达峰值,至第14天(NE14d)表达下调。VEGFA、VEGFR1、VEGFR2噪声后急性期(NE)至噪声后第2天(NE2d)表达上调达峰值,至第14天(NE14d)表达下调。Occludin噪声急性期(NE)至噪声后第2天(NE2d)下调并达最低值,随后表达上调。通过研究可得出结论,噪声急性损伤刺激PVM/Ms胞体缩小、足突回缩,PEDF与连接蛋白表达量降低,增加血管纹BLB的通透性。噪声损伤中期为修复噪声引起的血管纹损伤,PVM/Ms激活、增多;PEDF表达增加促进ZO-1、VE-Cadherin表达,促进血管纹BLB的修复。噪声损伤中期VEGFA表达量增加,修复受损的微血管内皮细胞,后期由于PEDF的桔抗作用,VEGFA表达量降低。VEGFA对ZO-1、VE-Cadher i n、Occlud i n具有抑制作用,在噪声损伤后期Occ l ud i n表达量增加进一步修复血管纹BLB。PEDF、VEGFA与连接蛋白间具有相互交叉的作用,根据我们的结果我们推断PEDF对ZO-1的抑制作用较VEGFA的促进作用明显,VEGFA对Occludin具有明显的抑制作用。研究噪声引起的PEDF、VEGFA、连接蛋白表达变化,为发现其分子调控机制提供了新的思路,为我们进一步研究噪声引起的血管纹损伤机制提供了方向。(本文来源于《中国人民解放军医学院》期刊2017-05-09）
血管纹论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:以豚鼠耳蜗血管纹PCs为研究对象,探讨雌激素受体GPER对耳蜗PCs上BK_(Ca)的表达和功能的调节及其与年龄相关性听力损伤的关系。方法:动物实验:选取8周龄健康豚鼠随机分为Control组、D-半乳糖衰老模型组(D-galactose,D-gal)和D-gal+G1组。采用Morris水迷宫检测各组豚鼠行为的变化;用紫外分光光度法检测各组豚鼠不同组织中SOD活性和MDA含量;用听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)检测不同组豚鼠听力的变化;用免疫荧光技术检测血管纹PCs上BK_(Ca)和EPER表达的改变;用膜片钳技术检测GPER对PCs上BK_(Ca)电流的影响。细胞实验:在无菌条件下提取豚鼠血管纹周细胞进行培养,实验分为Control、D-gal、D-gal+G1、D-gal+G1+SQ22586和D-gal+G1+H89组。采用免疫荧光技术和Western技术检测GPER激动剂G-1对PCs上BK_(Ca)和cAMP/PKA表达的改变;用膜片钳技术检测GPER对PCs上BK_(Ca)电流的影响。结果:动物实验:(1)Morris水迷宫行为测试显示D-gal组豚鼠的空间学习能力和记忆有损伤;SOD活性和MDA含量检测结果显示D-gal组存在氧化应激损伤;(2)与Control组相比,D-gal组ABR阈值升高且Ⅰ波振幅明显降低(P<0.01),D-gal+G1组较D-gal组相比,ABR阈值减低且Ⅰ波振幅升高(P<0.01);(3)与Control组相比,D-gal组血管纹PCs上GPER表达明显减少(P<0.01),D-gal+G1组较D-gal组相比没有差异;(4)与Control组相比,D-gal组血管纹PCs上BK_(Ca)表达明显减少(P<0.01),G1干预后,血管纹PCs上BKCa表达升高;(5)与Control组相比,D-gal组血管纹PCs的电流密度和BK_(Ca)净电流均明显减小(P<0.01),G1干预后,血管纹PCs的电流密度和BK_(Ca)净电流均增大(P<0.01);细胞实验:(6)与Control组相比,D-gal组PCs上BK_(Ca)表达明显减少(P<0.01),G1干预后,PCs上BK_(Ca)表达明显升高,但给予cAMP阻断剂(SQ22586)和PKA阻断剂(H89)后可以部分抑制G-1对PCs上BK_(Ca)表达的上调;(7)与Control组相比,D-gal组PCs的电流密度和BK_(Ca)净电流均明显减小(P<0.01),D-gal+G1组较D-gal组相比,PCs的电流密度和BK_(Ca)净电流均增大(P<0.01),但给予cAMP阻断剂(SQ22586)和PKA阻断剂(H89)后可以部分抑制了G-1对PCs上BK_(Ca)电流密度的上调。结论:GPER可能激活cAMP/PKA信号传导途径上调血管纹周细胞上BK_(Ca)表达和功能,从而发挥对年龄相关性听力损伤的保护作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
血管纹论文参考文献
[1].刘斌,李吉平,刘君.叁磷酸腺苷在新生大鼠耳蜗血管纹缘细胞中的释放机制[J].中华耳科学杂志.2019
[2].周颖.GPER通过cAMP/PKA途径调节衰老血管纹周细胞上BK_(Ca)通道的研究[D].石河子大学.2019
[3].李轶,刘会占,何志洲.顺铂对耳蜗血管纹毒性作用的研究[J].中华耳科学杂志.2019
[4].陈林军,邱士伟,龙熙,陈磊,唐朝颖.Mitf-M基因突变对猪耳蜗血管纹发育的影响[J].中华耳科学杂志.2018
[5].胡泠影,张园园,曾峰,华清泉.葡萄糖氧化酶诱导大鼠血管纹边缘细胞氧化应激模型的建立与评估[J].听力学及言语疾病杂志.2018
[6].姜洪艳.PARP-1在大鼠耳蜗血管纹边缘细胞氧化应激损伤中的作用及机制研究[D].华中科技大学.2018
[7].塞娜,张桐,吴军,韩维举.小鼠耳蜗血管纹血-迷路屏障免疫组织化学研究[J].中华耳科学杂志.2018
[8].宋佳,王洋,刘艳辉,马克涛,李丽.豚鼠耳蜗血管纹TMEM16A随鼠增龄的表达变化[J].西安交通大学学报(医学版).2017
[9].宋佳.钙激活氯通道在不同鼠龄豚鼠耳蜗血管纹的表达变化[D].石河子大学.2017
[10].张桐.噪声引起耳蜗血管纹损伤及其调控机制研究[D].中国人民解放军医学院.2017
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