导读:本文包含了核酸酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:核酸,核糖核酸,李斯特,基因,脱氧核糖核酸,分子,靶向。
核酸酶论文文献综述
闫庆龙,冉铁成,孔华庭,张继超,张瑜[1]（2019）在《TagS750-Cas9核酸酶的制备及体内代谢分布研究》一文中研究指出Cas9核酸酶在CRISPR/Cas9系统中执行切割靶标脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,DNA)的重要功能,研究其在体内的代谢行为对活体水平的基因编辑具有重要的指导意义。本工作采用N-羟基琥珀酰亚胺酯键将近红外荧光染料Vivo TagS750与Cas9蛋白偶联,制备了标记率高达99%的TagS750-Cas9融合蛋白。采用荧光强度监测以及琼脂糖凝胶电泳的方法对Cas9蛋白在常见生理缓冲溶液中的稳定性及切割活性进行了鉴定,并将其尾静脉注射到BALB/c小鼠体内,通过监测TagS750-Cas9蛋白荧光强度的变化对其在体内的代谢和分布进行了研究。结果表明:TagS750-Cas9蛋白的体外稳定性良好,表面标记的TagS750并不影响Cas9蛋白的切割活性。TagS750-Cas9蛋白进入体内后,平均血浆消除半衰期(t1/2β)为55 h;主要分布于肝、肾、肺、脾脏中,心脏的分布较少;72 h可被机体完全代谢清除。研究结果为CRISPR/Cas9系统中Cas9核酸酶的体内应用奠定了基础。(本文来源于《核技术》期刊2019年11期）
李轲,李站胜,韩双艳[2]（2019）在《分子伴侣共表达对核糖核酸酶R可溶性表达的影响》一文中研究指出核糖核酸外切酶R(RNase R)可降解几乎所有的线性RNA分子和Y结构RNA,但不易降解环形RNA(circ RNA)、套索结构(lariatRNA)和3’突出末端少于7个核苷酸的双链RNA分子,因此可以构建内含子c DNA文库用于可变剪切研究。本研究构建了含rnr基因的重组表达质粒pET-22b(+)-rnr,并将其表达产物纯化后通过SDS-PAGE分析和酶活性评价,确认rnr基因在大肠杆菌中已实现表达。之后构建4种分子伴侣共表达系统(pGro7、pKJE7、pTf16和pG-Tf2)。4种分子伴侣质粒分别与重组表达质粒pET-22b(+)-rnr共表达,筛选最适分子伴侣质粒,并优化共表达条件,提高目的蛋白可溶性表达。实验表明,分子伴侣质粒pGro7使蛋白表达量提高了43.80%,效果最为显着;20℃诱导时目的蛋白的可溶性表达最高;当L-阿拉伯糖浓度为0.50 mg/mL时,分子伴侣质粒pGro7使蛋白表达量提高了54.50%。通过使用分子伴侣共表达系统及优化表达条件提高了RNase R的可溶性表达,为该酶进一步研究奠定了基础。(本文来源于《现代食品科技》期刊2019年11期）
周志斌,杜玉霞,蔡茂胜,曾奕明[3]（2019）在《脱氧核糖核酸酶和阿替普酶对人胚肺成纤维细胞生长的影响》一文中研究指出目的观察脱氧核糖核酸酶(DNase)、阿替普酶(rt-PA)和联合酶(DNase+rt-PA)对人胚肺成纤维细胞(HFL-1)生长的影响。方法将HFL-1细胞分为4组:空白组、DNase组、rt-PA组和联合酶组。除空白组外,其余3组加入极低、低、中、高4个剂量的相应酶:DNase(2,5,10,20 U)、rt-PA(4,10,20,40μg)和联合酶(2 U+4μg,5 U+10μg,10 U+20μg,20 U+40μg)。用四甲基偶氮唑蓝法测得的光密度(OD)值代表酶作用24,48,72,96 h后的细胞增殖水平。结果细胞培养96 h后,空白组和中、高2个剂量DNase组的细胞增殖水平(OD值)分别为1.02±0.30, 0.52±0.12和0.34±0.05,中、高2个剂量DNase组与空白组比较差异均有统计学意义(均P<0.01);低、中2个剂量联合酶组OD值分别为0.51±0.01,0.27±0.01,联合酶与DNase单酶的低、中2个剂量(0.75±0.04,0.52±0.12)相比,对细胞的抑制作用更强,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 DNase、rt-PA对HFL-1细胞的生长具有抑制作用,在一定剂量范围内,rt-PA能增强DNase的抑制作用。(本文来源于《中国临床药理学杂志》期刊2019年16期）
康家雄,朱江,李爱秀,靳玉瑞[4]（2019）在《化学合成类HIV整合酶和核糖核酸酶H双靶点抑制剂的研究进展》一文中研究指出尽管已有31种上市的单靶点抗HIV药物和高效抗逆转录病毒疗法用于AIDS的临床治疗,但寻找安全高效的新型抗HIV药物仍是全世界面临的一项严峻挑战。单组分多靶点药物具有降低耐药的可能性、简化给药剂量及提高患者服药顺从性等优点,现已成为抗HIV药物研发领域的热点。HIV整合酶(IN)和核糖核酸酶H (RNase H)均为病毒复制过程中的关键酶,是药物开发的重要靶标。近年来,通过合理药物设计和筛选途径,发现了多种结构类型的HIV IN和RNase H (IN/RNase H)双靶点抑制剂。本文主要对化学合成类HIV IN/RNase H双靶点抑制剂的研究进展进行介绍,以望对多靶点抗HIV药物的研发有所启示。(本文来源于《药学学报》期刊2019年08期）
吴虹,彭宁,张永军[5]（2019）在《一个核糖核酸酶T2家族蛋白RNase Trv与球孢白僵菌生长发育及侵染致病的关系》一文中研究指出核糖核酸酶(RNase)普遍存在于微生物、植物及动物中,参与DNA复制、转录、RNA的剪切及循环利用等多种生物学过程。RNase通过2',3'环核苷酸水解RNA为3'单核苷酸,被分为叁个家族,RNase A、RNase T1和RNase T2。RNase A和RNase T1属于碱性RNase,最适pH在7-8之间,分别特异性水解嘧啶核苷酸和鸟苷酸,而RNase T2为酸性RNase,最适pH在4-5之间,无碱基特异性。RNase T2家族具有广泛的生物学作用,包括清除核酸,降解自身RNA,调节氧化胁迫应激反应,干扰宿主免疫反应等。本研究以昆虫病原真菌球孢白僵菌细胞表面分离的一个T2家族蛋白RNase Trv (BbTrv)为研究对象,探究了其对菌株生长发育及侵染致病的关系。BbTrv由257个氨基酸组成,N端存在典型的信号肽序列和CAS保守结构域。表达特性分析显示,BbTrv表达受营养饥饿和昆虫血细胞诱导。通过融合GFP研究发现,BbTrv不仅分布于细胞表面,也可分泌到胞外。体外表达检测发现,BbTrv具有RNA降解活性。破坏BbTrv不影响菌株生长和分生孢子产生,而过表达基因则明显提高了菌株生长及氧化胁迫的耐受性,但降低了菌株产孢量。利用体壁接种进行生物测定,发现破坏BbTrv对菌株毒力无明显影响,而过表达菌株穿透昆虫体壁能力削弱。但将孢子注射到昆虫体内,过表达菌株致死昆虫速度加快,推测分泌过量的BbTrv与干扰宿主的免疫反应(如降解活性氧、破坏免疫细胞核酸等)相关。研究结果为揭示T2家族蛋白RNase Trv参与病原真菌与宿主互作的机制提供了重要线索。(本文来源于《多彩菌物 美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会论文摘要》期刊2019-08-03）
黄幸,严爱芬,邓廷贤,欧阳宏佳,刘连[6]（2019）在《锌指核酸酶介导的陆川猪Fat1基因打靶载体构建及体外转基因研究》一文中研究指出秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans) Fat1基因翻译产物是ω-3多不饱和脂肪酸脱氢酶,哺乳动物因为缺少这个基因,不能将ω-6多不饱和脂肪酸转化为ω-3多不饱和脂肪酸,因此只能通过饮食获得ω-3多不饱和脂肪酸,以保证ω-6/ω-3的平衡,满足机体的健康所需。为获得整合了Fat1基因且能稳定表达的转基因猪(Sus scrofa),本实验采用锌指核酸酶(zinc finger nuclease, ZFN)介导的多位点打靶技术从细胞水平上开展了转基因技术的研究。首先构建了陆川猪Fat1基因打靶载体pCAGGS-DS2-eGFP-Fat1-DS1,并设计和构建了两个靶向陆川猪r DNA基因中内转录间隔区1 (internal transcribed spacer-1, ITS-1)序列的锌指核酸酶真核表达载体pcDNA3.1-NLS-ZFN-R和pcDNA3.1-NLS-ZFN-L。然后从猪的肾脏中成功分离出原代成纤维细胞(primary kidney fibroblast, PKF),通过脂质体共转染将Fat1基因打靶载体和锌指核酸酶载体导入细胞,转染细胞7 d后,提取细胞基因组DNA,PCR检测外源基因整合情况,结果表明Fat1基因成功整合到陆川猪PKF细胞基因组中,本研究为进一步获得转基因猪提供了一定的理论依据。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年08期）
毛福超,张梦珂,廖成水,贾艳艳,王晓利[7]（2019）在《重组单增李斯特菌TatD-like DNase蛋白的核酸酶活性分析》一文中研究指出为研究单增李斯特菌TatD-like DNase蛋白的序列结构与表达纯化后蛋白的酶学特性。本研究应用PCR扩增得到单增李斯特菌10403s株的Tat D-like DNase基因,利用生物信息学系统性预测分析其序列结构特征。然后将目的基因亚克隆至原核表达载体p ET32a构建重组表达质粒(p ET32a-Tat D-like DNase),转入大肠杆菌Rosetta中经IPTG诱导表达、亲和层析法纯化后采用SDS-PAGE和Western blot进行分析,将纯化的蛋白透析后进行酶学特性分析。单增李斯特菌10403s株Tat D-like DNase蛋白由265个氨基酸组成,理论蛋白分子量为30.16 k D,其氨基酸序列与其它34种微生物的Tat D-like DNase及其类似物的同源性较低。Tat D-like DNase为亲水性蛋白,含有5个优势B细胞抗抗原表位。二级结构分析,Tat D-like DNase蛋白主要由29.81%的无规则卷曲、49.43%的α-螺旋、16.6%的β-折迭和4.15%的β-转角构成。SDS-PAGE和Western blot结果显示Tat D-like DNase重组蛋白约55 k D,主要以包涵体形式表达。Tat D-like DNase蛋白具有核酸酶活性,并且酶学活性的发挥具有一定的蛋白浓度依赖性,受到温度和PH的影响。本实验对单增李斯特菌Tat D-like DNase蛋白进行了序列分析,同时得到了纯化后的重组原核表达蛋白,并检测了该蛋白的功能特性。为进一步研究Tat D-like DNase在单增李斯特菌感染中的作用奠定基础。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27）
范双莉[8]（2019）在《人工核酸酶介导的基因靶向修饰技术》一文中研究指出基因组靶向修饰技术是基因组改造和基因研究的重要手段,而人工核酸酶介导的基因修饰技术很大程度上提高了基因组靶向修饰的有效性、高效性和特异性,其主要工作原理是造成特异性的DNA双链断裂(DSB)诱导细胞内DNA修复,从而造成自发突变或引入人为变化,完成基因的敲入或者敲除.人工核酸酶基因修饰技术,包括了锌指核酸酶(ZFN)技术、类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)技术以及CRISPR-Cas系统,它们的分子作用机制、系统构建以及效用有一定的不同.对3种基因修饰技术的原理、研究进展和应用进行系统的阐述.通过利用人工基因修饰技术,能够精确、高效地对特定的基因实现编辑和修饰,以期在基因工程领域得到广泛的应用.(本文来源于《河北师范大学学报(自然科学版)》期刊2019年04期）
孙德森,钱钰玲,许正平[9]（2019）在《核糖核酸酶5在宿主防御中的作用及机制》一文中研究指出抗菌肽是机体天然免疫的重要组成部分。核糖核酸酶5 (ribonuclease5,RNASE5;又名angiogenin)属于核糖核酸酶A超家族,是一个分泌型小分子蛋白质,广泛分布于机体需要抵御外界病原微生物的组织中。RNASE5对病毒、细菌以及真菌都存在抑制效应,具有广谱抗菌特点,但其表达和活性受到宿主生理状态和外界环境多层次的调控。RNASE5存在多样的抗微生物作用机制,其带正电荷的理化特性破坏微生物细胞壁,而其核糖核酸酶活性则是杀伤真菌所必须的。除了直接作用于微生物外,RNASE5还可作为重要因子调节宿主免疫功能,参与多种病理过程。本文综述了RANSE5的结构、生物活性与功能、作用特点与机制,并讨论了在其研究中存在的问题,以期为今后的研究提供新思路和新方向。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2019年06期）
耿雪冉,张巧毅,常明昌,徐丽婧,程艳芬[10]（2019）在《叁色雷蘑核糖核酸酶的分离纯化和理化性质》一文中研究指出依次采用离子交换层析(DEAE-Cellulose、CM-Cellulose和SP-Sepharose)和凝胶过滤层析(Superdex75 HR10/300 GL)从叁色雷蘑(Leucopaxillus tricolor)子实体中分离纯化得到一种核糖核酸酶(Ribonuclease,RNase)。该酶比活为1406 U/mg,纯化倍数为154,通过HPLC-LTQ-Orbitrap测序得到4条肽段序列,分别为DMAVSYLSR、IGLSSIPR、ILGRFVVDTYK和SGKANAATPK。该核糖核酸酶的相对分子质量为15000,最适反应pH为9.0,最适反应温度为40℃,热稳定性高,80℃孵育1 h后能保持90%以上的活性:Cu~(2+)、Ca~(2+)、Mn~(2+)、Cd~(2+)和Al~(3+)在1.25～10 mmol/L浓度下对该酶活性具有抑制作用,且抑制作用随着金属离子浓度的升高而变强;Fe~(2+)在1.25～5 mmol/L的浓度下,Pb~(2+)、Zn~(2+)、Mg~(2+)、Hg~(2+)、Fe~(3+)在1.25～2.5 mmol/L的浓度下对该酶的活性有促进作用。(本文来源于《食用菌学报》期刊2019年02期）
核酸酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
核糖核酸外切酶R(RNase R)可降解几乎所有的线性RNA分子和Y结构RNA,但不易降解环形RNA(circ RNA)、套索结构(lariatRNA)和3’突出末端少于7个核苷酸的双链RNA分子,因此可以构建内含子c DNA文库用于可变剪切研究。本研究构建了含rnr基因的重组表达质粒pET-22b(+)-rnr,并将其表达产物纯化后通过SDS-PAGE分析和酶活性评价,确认rnr基因在大肠杆菌中已实现表达。之后构建4种分子伴侣共表达系统(pGro7、pKJE7、pTf16和pG-Tf2)。4种分子伴侣质粒分别与重组表达质粒pET-22b(+)-rnr共表达,筛选最适分子伴侣质粒,并优化共表达条件,提高目的蛋白可溶性表达。实验表明,分子伴侣质粒pGro7使蛋白表达量提高了43.80%,效果最为显着;20℃诱导时目的蛋白的可溶性表达最高;当L-阿拉伯糖浓度为0.50 mg/mL时,分子伴侣质粒pGro7使蛋白表达量提高了54.50%。通过使用分子伴侣共表达系统及优化表达条件提高了RNase R的可溶性表达,为该酶进一步研究奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
核酸酶论文参考文献
[1].闫庆龙,冉铁成,孔华庭,张继超,张瑜.TagS750-Cas9核酸酶的制备及体内代谢分布研究[J].核技术.2019
[2].李轲,李站胜,韩双艳.分子伴侣共表达对核糖核酸酶R可溶性表达的影响[J].现代食品科技.2019
[3].周志斌,杜玉霞,蔡茂胜,曾奕明.脱氧核糖核酸酶和阿替普酶对人胚肺成纤维细胞生长的影响[J].中国临床药理学杂志.2019
[4].康家雄,朱江,李爱秀,靳玉瑞.化学合成类HIV整合酶和核糖核酸酶H双靶点抑制剂的研究进展[J].药学学报.2019
[5].吴虹,彭宁,张永军.一个核糖核酸酶T2家族蛋白RNaseTrv与球孢白僵菌生长发育及侵染致病的关系[C].多彩菌物美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会论文摘要.2019
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[8].范双莉.人工核酸酶介导的基因靶向修饰技术[J].河北师范大学学报(自然科学版).2019
[9].孙德森,钱钰玲,许正平.核糖核酸酶5在宿主防御中的作用及机制[J].中国生物化学与分子生物学报.2019
[10].耿雪冉,张巧毅,常明昌,徐丽婧,程艳芬.叁色雷蘑核糖核酸酶的分离纯化和理化性质[J].食用菌学报.2019
论文知识图
