兔源肺炎克雷伯氏菌重组酶聚合酶扩增检测方法的建立

论文摘要

为建立一种检测兔源肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)重组酶聚合酶扩增方法(recombinase polymerase amplification,RPA),根据肺炎克雷伯氏菌的phoE基因保守序列设计引物,扩增片段大小为277 bp,并对反应条件进一步优化,最终建立了适宜于快速准确检测兔源肺炎克雷伯氏菌的重组酶聚合酶等温扩增方法。该方法可特异性检测出兔源肺炎克雷伯氏菌,最低检出细菌量为8.3×10~1 CFU/mL,灵敏度比传统PCR高100倍。本研究建立的肺炎克雷伯氏菌RPA检测方法特异性强、操作简单,从而为生产中的兔源肺炎克雷伯氏菌现场快速检测提供了一种新方法。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验菌株
•   1.2 试剂
•   1.3 引物设计
•   1.4 细菌培养
•   1.5 RPA检测体系优化
•   1.6 特异性和灵敏度检验
•   1.7 临床样本检测
• 2 结果
•   2.1 反应时间优化
•   2.2 特异性检验
•   2.3 灵敏性检验
•   2.4 临床样本检测
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵巧雅,马秀丽,刘存霞,史玉颖,胡峰,王贵升,兰邹然,黄兵

关键词: 肺炎克雷伯氏菌,重组酶聚合酶扩增,快速检测

来源: 中国动物检疫 2019年07期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 山东省农业科学院家禽研究所,山东省动物疫病预防与控制中心

基金: 山东省现代农业产业技术体系项目(SDAIT-21-06),山东省农业科学院农业科技创新工程(CXGC2016B14),2019年山东省农业重大应用技术创新项目

分类号: S852.61

页码: 82-85

总页数: 4

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