导读:本文包含了卵泡细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:卵泡,细胞,飞蝗,颗粒,激素,刺激素,卵黄。
卵泡细胞论文文献综述
王宁渤[1]（2019）在《保幼激素通过细胞黏连调节卵泡细胞间通道的分子机制》一文中研究指出飞蝗(Locusta migratoria)是重要农业害虫,每头雌蝗可产卵300-400粒,强大的生殖力是蝗灾形成的关键因素之一。昆虫的卵黄发生(vitellogenesis)为发育中的卵母细胞提供充足的卵黄蛋白等营养物质,保障了大量的卵成熟和胚胎发育所需的物质和能量。卵黄发生是卵黄原蛋白(vitellogenin,Vg)在脂肪体中合成,通过血淋巴和卵泡细胞间的通道(patency)运输到卵母细胞,最终被卵母细胞吸收储存的过程。在以飞蝗为代表的许多昆虫中,卵黄发生由咽侧体分泌的保幼激素(juvenile hormone,JH)调控。JH诱导卵泡细胞胞间通道开启以促进Vg顺利运输到卵母细胞是昆虫生殖调控的关键进程之一,然而其中的分子机制还有待阐明。本论文利用免疫荧光、Co-IP、Western blot、RNAi等细胞生物学、分子生物学和遗传学的方法,以飞蝗卵泡细胞黏连结构为切入点,鉴定参与JH调节胞间通道的关键细胞黏连因子及信号转导机制,阐明JH通过调控细胞黏连诱导胞间通道开启的分子机制,为害虫绿色防控提供分子靶标。主要研究结果如下:1.飞蝗卵泡细胞以黏着小带(zonula adherens)两两间相互黏附形成紧密的单细胞层包被卵母细胞。通过免疫荧光观察体内黏着小带核心蛋白β-catenin的亚细胞定位发现,随着胞间通道增大,β-catenin定位逐渐收缩。β-catenin仅定位于细胞间黏连的区域,而胞间通道区域无β-catenin定位。体外JH诱导胞间通道开启,发现β-catenin定位也随着胞间通道的开启而变化,与体内实验结果相似。根据上述结果推测,黏着小带在JH诱导的胞间通道开启过程中发生解聚。2.体内注射dsRNA干扰Par3(partitioning-defective protein3)、调节Par3磷酸化的蛋白Par6、或aPKC(atypical protein kinase C),能够破坏卵泡细胞间的黏连,导致卵泡细胞彼此分离,表型与β-catenin RNAi的表型相似。表明Par3、Par6和aPKC不但维系黏着小带结构,也在JH诱导的胞间通道中发挥作用。Co-IP实验表明,JH诱导条件下,β-catenin和Par3的结合显着减弱,暗示JH促进黏着小带的解聚并诱导胞间通道。磷酸化aPKC在卵泡细胞中仅定位在胞间通道区域,而细胞间黏连的区域检测不到磷酸化aPKC信号,推测aPKC参与了胞间通道的调控过程。在体外条件下利用aPKC特异性抑制剂ACPD处理卵黄发生期的卵泡细胞,能够显着抑制JH诱导的胞间通道。此外,aPKC和Par6上游信号因子Cdc42的特异性抑制剂ML141同样能够抑制JH诱导的胞间通道开启。这些结果说明,Cdc42、aPKC、Par3、Par6参与JH诱导的胞间通道。Western blot显示,JH诱导aPKC和Par3磷酸化,而ACPD和ML141抑制JH诱导的aPKC和Par3磷酸化。综合上述结果,JH可能通过Cdc42、Par6、aPKC通路触发Par3磷酸化,磷酸化的Par3与β-catenin分离,导致黏着小带的解聚和胞间通道开启。3.使用G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)抑制剂suramin、受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine receptor,RTK)抑制剂genistein和Su6668处理卵黄发生期卵泡细胞并进行JH诱导,发现suramin能够显着抑制JH诱导胞间通道,而genistein和Su6668的处理对胞间通道没有明显影响,表明GPCR参与JH调控的胞间通道。综合本论文的研究结果,我们发现β-catenin主导的黏着小带在JH诱导的胞间通道中起重要作用,JH可能通过GPCR、Cdc42、Par6、aPKC信号通路触发Par3磷酸化,磷酸化的Par3与β-catenin分离,导致黏着小带的解聚,从而诱导胞间通道。研究结果对阐明JH调控卵黄发生的分子机制具有重要意义。(本文来源于《河南大学》期刊2019-06-01）
尚甜甜[2]（2018）在《飞蝗卵泡细胞间通道的体外模型构建及关键调控因子鉴定》一文中研究指出飞蝗(Locusta migratoria)是我国重要的农业害虫,强大生殖力是飞蝗暴发成灾的一个重要生物学因素。昆虫卵成熟过程中需要储存大量的卵黄蛋白,为之后的胚胎发育提供营养物质,因此卵黄发生(vitellogenesis)是昆虫生殖发育过程的重要事件。在以飞蝗为代表的昆虫中,卵黄原蛋白(Vitellogenin,Vg)在脂肪体中合成,由血淋巴运输到卵巢,被发育中的卵母细胞吸收。卵母细胞被一层致密排列的卵泡细胞层包裹,Vg首先需要穿过卵泡细胞间的通道(patency)才能到达卵母细胞表面,进而被卵母细胞通过内吞机制吸收。根据已有的报道,保幼激素(juvenile hormone,JH)能够调控胞间通道的开启,但是由于缺乏胞间通道在体内和体外动态变化的观察方法,限制了胞间通道调控机制的研究进展。此外,JH调控胞间通道开启的关键信号因子也有待揭示。飞蝗的卵黄生成和胞间通道开启主要由JH调控,而且其胞间通道开启对JH的响应较为敏感,因此,飞蝗是研究保幼激素调控卵泡细胞间通道分子机制的一个理想模型。本论文利用飞蝗的优势展开叁个方面的研究:一是通过使用合适的染料和方法对卵泡细胞进行染色,建立起一套快速且清晰的观察胞间通道的方法,为胞间通道的深入研究奠定基础,并在此基础上进一步观察不同发育阶段卵泡细胞间通道的形态变化;二是建立JH诱导胞间通道开启的动态观察模型,为研究JH调控胞间通道的分子机制研究体外模式;叁是利用RNAi对G蛋白偶联受体(G-protein coupled receptor,GPCR)的部分家族基因进行功能分析,筛选影响胞间通道开启的关键因子,初步解析JH调控胞间通道开启的膜信号通路。研究结果显示,CellMask Orange Plasma membrane Stain能够在活细胞状态下对卵泡细胞膜染色,且细胞的轮廓清晰,胞间通道的形态能够直观且完整显示。正常发育条件下对各阶段的卵泡细胞观察表明,卵黄发生前期,首个卵母细胞长度不超过1.5 mm时,胞间通道处于关闭状态。进入卵黄发生期,首个卵母细胞长度在1.5-5.5mm之间时,胞间通道逐渐扩大。在卵黄发生末期,首卵长度大于5.5mm时,胞间通道打开到最大状态,并在长度超过6mm后迅速关闭。根据上述结果推测,胞间通道从卵黄发生前期的关闭状态,进入卵黄发生期打开并逐渐增大,到卵黄发生末期短时间内迅速关闭。在整个卵黄发生期,胞间通道打开后不再关闭,直至卵母细胞发育成熟。为了建立JH诱导胞间通道形成的体外模型,我们基于以上实验基础和文献报道,利用JH III及其类似物(methoprene,JHA)在体外对处于卵黄发生中期的卵泡细胞进行诱导,观察胞间通道的变化。结果显示,在10~(-8)M的JH或JHA诱导条件下,胞间通道在1小时内明显增大。体外模型的建立可以为深入研究JH调控胞间通道形成的信号转导机制提供良好的实验材料,有助于推动JH膜信号传递的分子机制研究。前期研究结果表明,可能是介导JH信号并调控胞间通道开启的重要因子。我们利用RNAi对12个GPCR基因进行了干扰,观察其在卵黄发生中的作用。结果表明,其中的5个基因,包括orphan receptor(OrR)、cardioacceleratory peptide receptor(CCAPR)、methuselah-like 2(Mthl2)、parathyroid hormone/parathyroid hormone-related peptide receptor(PTHR)和tyramine receptor 2(TyR2),显着影响卵巢生长和卵母细胞成熟。进一步的Western blot检测显示,OrR和CCAPR干扰后,Vg在脂肪体和血淋巴中的含量增多而在卵巢中减少,表明卵巢生长和卵母细胞成熟受到抑制是因为卵母细胞不能正常吸收Vg导致,这两个基因是否参与胞间通道调控而影响Vg吸收有待于进一步研究。Mthl2、PTHR和TyR2干扰后,Vg在脂肪体中没有变化,而在血淋巴和卵巢中减少;结果说明,Mthl2、PTHR和TyR2干扰后,卵巢生长和卵母细胞成熟受到抑制是由Vg不能正常分泌到血淋巴中引起的。综合上述结果,我们摸索了一套观察胞间通道动态变化的染色方法,建立了JH诱导胞间通道的体外模型。另外,我们筛选了两个GPCR基因即OrR和CCAPR作为调控胞间通道开闭的候选基因。研究结果将为阐明JH调控卵泡细胞间通道的分子机制提供基础和参考。(本文来源于《河南大学》期刊2018-06-01）
吴海珍[3]（2018）在《miR-26a-5p在鸡卵泡细胞中的表达、作用及其调控分析》一文中研究指出动物性成熟是一个复杂的性状,受众多因素的影响,目前有关禽类性成熟性状的分子调控机制尚不十分清楚。鸡的卵巢卵泡在发育成熟过程中受多基因的调控,miRNAs的表达调控是其影响因素之一。miRNAs是一类含有约22个核苷酸的非编码RNA分子,它参与原始卵泡形成、卵泡募集和选择、卵泡闭锁、卵母细胞交流、颗粒细胞功能和黄体化等。本课题组前期以白来航鸡42日龄未开产卵巢和162日龄开产卵巢为材料进行Hiseq高通量测序,发现miR-26a-5p在性成熟前后的卵巢差异表达。并进一步发现,miR-26a-5p通过靶向TNRC6A促进鸡等级卵泡膜细胞的增殖。鸡卵泡发育过程离不开颗粒细胞和膜细胞功能的发挥,因此本研究在前期基础上更进一步分析miR-26a-5p对鸡卵泡细胞功能的影响及其表达特征,主要得到以下结果:(1)前期结果表明miR-26a-5p在各级卵泡中均有表达,我们又进一步研究发现:miR-26a-5p在鸡等级卵泡的颗粒细胞及膜细胞的表达量显着高于等级前卵泡的颗粒细胞及膜细胞(P<0.05)。(2)鸡等级卵泡的颗粒细胞中过表达miR-26a-5p后,实时荧光定量PCR结果显示:BCL-2基因的表达显着上调(P<0.05),Caspase-3基因的表达呈下调趋势(P>0.05)。结合CCK-8结果,表明miR-26a-5p能够促进鸡等级卵泡颗粒细胞的增殖。(3)前期工作中对鸡等级卵泡的膜细胞中过表达miR-26a-5p后进行转录组测序,筛选了差异表达基因:NLK、IGF1、MARK1、GSK3B、SMAD1、SEMA6D、SEMA3A、SEMA3D、KDR、NRP1、plexin-A4、THSB2、TLR2、STAR、MMP11、MMP13、VEGFA、TNRC6A。本研究通过实时荧光定量PCR验证发现:膜细胞中IGF1(P<0.05)、SEMA6D(P<0.05)、SEMA3D(P<0.01)、NRP1(P<0.05)、TLR2(P<0.001)、MMP11(P<0.05)、VEGFA(P<0.01)、TNRC6A(P<0.01)在mRNA水平的表达显着下调;颗粒细胞中NLK(P<0.01)、SEMA3A(P<0.05)、KDR(P<0.01)、VEGFA(P<0.05)基因在mRNA水平的表达显着下调,plexin-A4(P<0.05)则显着上调。(4)利用Targetscan软件预测miR-26a-5p的靶基因,结合转录组差异表达基因验证的结果,选取了NLK基因作为miR-26a-5p的候选靶基因。实时荧光定量PCR结果表明,在不同发育时期白来航鸡卵巢中,miR-26a-5p和NLK基因mRNA的表达呈相反的趋势。双荧光素酶报告基因活性检测结果显示,突变第二个靶点后双荧光素报告基因活性显着升高。这些结果表明,miR-26a-5p靶向结合于NLK基因的3'UTR区并负调控其表达。(5)通过PCR产物测序,获得了10个位于pri-miR-26a-5p的单核苷酸多态性(SNP)位点:rs14130969(C>T)、rs735817649(C>T)、rs314567798(C>T)、rs316124568(T>A)、rs14130971(T>C)、rs14130972(A>G)、rs316365438(C>T)、rs14130973(G>A)、rs13534877(G>C)、rs15056408(G>A)。对这10个SNPs位点构建单倍型发现,TCTACGCACG和TTTATATACA频率显着高于其他单倍型组合,且二者在自由能上不同,并造成二级结构上存在显着差异。并进一步研究发现TCTACGCACG成熟miR-26a-5p的表达量显着高于TTTATATACA(P<0.05),这说明不同单倍型影响成熟miR-26a-5p的表达量。将这10个SNPs位点与隐性白洛克鸡群体产蛋性状的关联分析发现,rs316365438(C>T)与开产日龄和产蛋数性状显着相关,TT基因型个体对应较早的开产日龄和较多的早期产蛋数(32周龄)。(本文来源于《山东农业大学》期刊2018-04-15）
张梦然[4]（2017）在《设计的小鼠可移植卵巢功能正常》一文中研究指出科技日报北京5月17日电 （记者张梦然）英国《自然·通讯》杂志最新发表的一项技术成果称，美国科学家研发出一种3D打印的微孔支架，可以支持小鼠卵泡细胞发育，并可用于恢复手术绝育小鼠的卵巢功能。这是人类首次使用3D打印技术成功设计出一个功能正常的小鼠可移植卵(本文来源于《科技日报》期刊2017-05-18）
张越,芮荣[5]（2016）在《淫羊藿多糖抑制小鼠卵泡细胞凋亡》一文中研究指出目的:卵泡由居于核心的卵母细胞及周围的颗粒细胞和卵泡膜组成,卵泡是卵巢的基本功能单位,兼有内分泌(产生类固醇类激素,如孕酮、雌激素等)和外分泌(产生卵子)功能。淫羊藿多糖(Epimedium Polysaccharides,EPS)是中药淫羊藿的主要活性成分之一,本试验旨在研究淫羊藿多糖对小鼠卵泡细胞凋亡的作用,以期了解淫羊藿多糖影响卵泡发育的机理,为哺乳动物卵泡发育调控与传统中药的开发利用提供实验参考。材料与方法:6周龄健康雌性小鼠随机分为3组,2个试验组每天分别灌服0.1 mL(6和8 mg)EPS,对照组小鼠每天灌服0.1 mL生理盐水,连续灌服7 d,称量各组小鼠体重和相关内脏质量,计算体增重和内脏指数;分离并收集各组小鼠卵巢卵泡细胞,流式细胞仪检测各组卵泡细胞凋亡率,并检测凋亡基因(Bax)和抗凋亡基因(Bcl-2)mRNA表达。结果:(1)淫羊藿多糖各组小鼠灌药后体重和体增重与对照组相比无统计学差异,试验组小鼠的内脏器官指数与对照组相比也无显着差异,表明淫羊藿多糖对小鼠体增重及内脏器官指数无明显影响;(2)与对照组相比,淫羊藿多糖处理组卵泡细胞早期凋亡率均显着下降,8 mg淫羊藿多糖组卵泡细胞晚期凋亡率却显着增高;灌服淫羊藿多糖试验组小鼠卵泡细胞总凋亡率较对照组均有所降低,灌服6 mg淫羊藿多糖组的总凋亡率较对照组有显着下降(P<0.05);(3)RT-PCR检测表明,试验组卵泡细胞凋亡相关基因Bcl-2/Bax比值均较对照组升高,其中6 mg组卵泡细胞Bcl-2/Bax基因相对表达量显着高于对照组(P<0.05)。结论:连续7 d灌服0.1 mL(6 mg)淫羊藿多糖可明显抑制小鼠卵巢卵泡细胞凋亡,这一作用与其对Bcl-2/Bax基因表达的影响有关。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十叁次学术研讨会论文集》期刊2016-10-22）
马宗耀,崔凯,马泽芳,史雪萍[6]（2014）在《间情期银黑狐腔前卵泡卵泡细胞的超微结构》一文中研究指出为了研究间情期银黑狐腔前卵泡卵泡细胞的超微结构,试验通过透射电子显微镜对卵泡细胞进行超微结构观察、拍照,11月份采集的5只2岁健康银黑狐左侧卵巢共5枚,选择腔前卵泡1~5个(共计20个原始卵泡、25个初级卵泡、18个次级卵泡)进行观察研究。结果表明:卵泡细胞在原始卵泡阶段,线粒体、内质网大多较少,未见高尔基体;发育到初级卵泡阶段后,线粒体、内质网数量开始增多,高尔基体罕见,有少量脂滴出现;而在次级卵泡阶段,所含线粒体、内质网数量进一步增多,高尔基体和脂滴数量未见明显变化,微丝成簇分布。线粒体、内质网的变化趋势与其他哺乳动物基本一致,但高尔基体和间隙连接出现时间较晚。说明间情期银黑狐卵泡细胞逐渐具备辅助卵母细胞成熟的典型特征。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2014年09期）
慈光新,贾玉东,米玉玲,张才乔[7]（2010）在《人参皂甙对鸡小黄卵泡细胞增殖的影响》一文中研究指出人参属五加科多年生草本植物,其中含有的人参皂甙因其抗氧化特性而作为保健品,具有调节中枢神经系统、抗疲劳和抗衰老等功效。本实验研究了GS对鸡等级前卵泡发育和小黄卵泡颗粒细胞增殖的影响及其信号转导机制。等级前卵泡在0.5%胎牛血清(FCS)中预培养16 h后换成无血清的培养液,同时用10μg/mL的人参皂甙处理24 h。结果表明:人参皂甙显着刺激SWF、LWF、SYF和LYF的膜层和颗粒层细胞的增殖,提(本文来源于《全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编》期刊2010-07-01）
慈光新[8]（2009）在《抗氧化性生物活性物质对鸡等级前卵泡细胞发育的影响及其机理的研究》一文中研究指出家禽卵巢以其卵泡等级发育的特点而成为研究卵巢生物学和卵泡发育的理想模型,而卵泡颗粒细胞因其独特的结构特点及其在卵泡发育中的重要作用,常被看作卵泡发育的一个重要标志。本实验通过小黄卵泡颗粒细胞以及全卵泡体外培养模型,探讨了家禽生产中部分重要的生殖激素、生长因子及与卵泡发育相关的抗氧化性生物活性物质对卵泡粒细胞生长发育和功能的影响及其作用机理,以期为家禽优势卵泡选择及繁殖性能的提高提供理论依据。1.鸡等级前卵泡细胞的形态学变化-卵泡刺激素和前列腺素对等级前卵泡发育的影响本文首先利用形态学方法研究了鸡等级前卵泡中颗粒细胞和膜细胞在发育过程中形态学的变化。从有规则产蛋周期的叁黄母鸡中取出等级前卵泡,按照其直径分为小白卵泡(SWF,1～3mm)、大白卵泡(LWF,3～5mm)、小黄卵泡(SYF,5～6 mm)和大黄卵泡(LYF,6-9 mm)。各级卵泡用4%多聚甲醛固定24 h,然后包埋并切片,厚度5μm。切片用苏木精-伊红染色或用增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色。等级前卵泡组织学研究结果表明：SWF只有一层颗粒细胞,LWF中出现两层颗粒细胞,而SYF和LYF中则有多层颗粒细胞。数据统计显示,卵泡膜层和颗粒细胞层厚度随着卵泡直径的变化而显着增加。SYF和LYF的膜细胞层的厚度是最大的(P<0.05)。颗粒细胞的密度度随着卵泡直径的变化而显着增加(P<0.05)。与LWF、SYF和LYF相比,SWF的颗粒细胞的面积较小(P<0.05)。PCNA免疫组化染色表明：和LYF相比,PCNA标记指数(PCNA-LI)在SWF、LWF和SYF中较高。因此,在卵泡的发育过程中,膜细胞和颗粒细胞在形态和增殖特性上具有阶段特异性。卵泡体外悬浮培养实验表明,卵泡刺激素(FSH)和前列腺素PGE1刺激SYF和LYF中颗粒细胞的增殖,但对膜细胞无显着促增殖作用。由此推测,FSH和PGE1主要通过刺激颗粒细胞的增殖促使等级前卵泡进入等级发育。2.人参皂甙对鸡等级前卵泡发育和小黄卵泡颗粒细胞增殖的影响及其信号转导机制的研究人参属五加科多年生草本植物,其中含有的人参皂甙(GS)因其抗氧化特性而作为保健品,具有调节中枢神经系统、抗疲劳和抗衰老等功效。本文研究了GS对鸡等级前卵泡发育和小黄卵泡颗粒细胞增殖的影响及其信号转导机制。等级前卵泡在0.5%胎牛血清(FCS)中预培养16h后换成无血清的培养液,其中含10 gg／ml胰岛素,5μg／ml转铁蛋白和3×10-8mol／L亚硒酸钠(ITS培养液),同时单独添加10μg／ml GS处理24 h。结果表明：GS显着刺激SWF、LWF、SYF和LYF的膜层和颗粒层细胞的增殖,提示GS可通过刺激等级前卵泡细胞的增殖而促使其进入等级发育。从SYF中分离的颗粒细胞在含有0.5% FCS的M199培养液中培养,16h后换成无血清培养液并继续进行培养,同时用PKC抑制剂H7、PKC激活剂PMA单独或与GS联合处理24 h。随后进行细胞形态学和GS作用机理的研究。结果显示：当GS浓度在0.1～10μg／ml范围时,颗粒细胞的数量呈显着上升趋势,并呈一定的剂量-效应关系。同时,这一效应可以被H7所抑制,但可被PMA所加强。颗粒细胞的PCNA-LI统计结果显示细胞的增殖活性与颗粒细胞的数目变化呈现类似的变化。Western印迹法表明10μg／ml GS可促进颗粒细胞中PKC从胞质到胞膜的转移,而H7则抑制此效应。同时,GS上调颗粒细胞中细胞周期蛋白D1／周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)和周期蛋白E／CDK2mRNA的表达。然而,用PKC抑制剂H7则减弱了这一刺激效应。由此推测,GS通过上调颗粒细胞中细胞周期蛋白D1/CDK6和E/CDK2的表达来刺激颗粒细胞的增殖,从而促使等级前卵泡进入等级发育。3.大豆黄酮对鸡等级前卵泡发育和小黄卵泡颗粒细胞增殖的影响本实验利用全卵泡培养和颗粒细胞单独培养模型探讨了植物性抗氧化剂大豆黄酮(DAI)对产蛋鸡等级前小黄卵泡及颗粒细胞增殖的影响。等级前卵泡在0.5%FCS中预培养16 h后换成无血清的ITS培养液,同时单独添加10-1000 ng／ml的DAI处理24 h。结果表明：DAI显着刺激SWF、LWF、SYF和LYF的膜层和颗粒层细胞的增殖,提示DAI通过刺激等级前卵泡细胞的增殖而促使其进入等级发育。采用机械法分散产蛋鸡等级前小黄卵泡颗粒细胞。培养液为含0.5%FCS的M199培养液。颗粒细胞预培养16h后,撤去血清,换用ITS培养液。细胞用DAI处理24 h后对其增殖活性进行检测。结果显示：10～1000 ng／ml的DAI处理可显着增加颗粒细胞的数目(P<0.05),这一刺激作用可被雌激素受体阻断剂他莫昔芬所阻断,并呈现出一定的剂量-效应关系。同时,颗粒细胞的BrdU-LI结果显示出细胞的增殖活性与其数目的变化呈现出相似的变化。由此推测,DAI可通过雌激素活性刺激颗粒细胞的增殖而促使等级前卵泡进入等级发育。总之,本实验通过在体的形态学和免疫组化方法研究了产蛋鸡等级前卵泡发育过程中颗粒细胞和膜细胞数量的变化,膜细胞和颗粒细胞在形态和增殖特性上呈现出阶段特异性。颗粒细胞的增殖活性随等级前卵泡的发育而降低。全卵泡体外悬浮培养实验表明,FSH和PGE1主要通过刺激颗粒细胞的增殖而促使等级前卵泡进入等级发育；植物性抗氧化剂GS和DAI可显着刺激SWF、LWF、SYF和LYF中颗粒细胞的增殖,促使等级前卵泡进入等级发育。利用等级前卵泡颗粒细胞单独培养模型证明：GS可上调颗粒细胞中细胞周期蛋白D1/CDK6和E/CDK2 mRNA的表达来促进其增殖,PKC信号途径可能参与GS对颗粒细胞增殖的调控；DAI可通过雌激素样作用显着促进颗粒细胞的增殖。这些结果在理论上有助于阐明家禽等级前卵泡发育和优势卵泡选择的调控机理,在生产实际上也可为植物来源的抗氧化性生物活性物质的开发应用及家禽繁殖性能的提高提供了理论基础。(本文来源于《浙江大学》期刊2009-07-09）
慈光新,葛楚天,金艳梅,张才乔[9]（2009）在《促卵泡素对鸡等级前卵泡细胞发育的影响》一文中研究指出实验研究了鸡等级前卵泡颗粒细胞和膜细胞的发育及促卵泡素(FSH)对其增殖的调控作用。形态学观察显示小白卵泡只有1层颗粒细胞,大白卵泡出现2层颗粒细胞,而小黄卵泡和大黄卵泡中则有多层颗粒细胞。结果表明:卵泡颗粒细胞和膜细胞的密度和细胞层厚度随着卵泡发育的等级而增加。卵泡体外悬浮培养表明,FSH显着刺激小黄卵泡和大黄卵泡中颗粒细胞的增殖,但对膜细胞无显着促增殖作用。由此推测,FSH通过刺激颗粒细胞的增殖促使等级前卵泡进入等级发育。(本文来源于《中国畜牧杂志》期刊2009年09期）
杨景晁,田长永,张林媛,唐超,李迎梅[10]（2009）在《东北梅花鹿卵泡发育过程中卵泡细胞超微结构的观察》一文中研究指出为了进一步弄清东北梅花鹿卵泡细胞超微结构的变化规律,本研究用透射电镜、目镜测微尺和显微照相技术对各期卵泡中卵泡细胞的超微结构进行了观察,并按卵泡大小、颗粒细胞层数、透明带状况及卵泡腔是否出现,把卵泡分成4个阶段。结果表明:原始卵泡-卵泡细胞与卵母细胞已开始建立结构上的联系,卵泡细胞的形态变化也是适应卵泡发育的需要;初级卵泡-细胞器数量增加,结构变得清晰,卵泡细胞中出现厚壁小泡,可能是一种早期的脂滴;次级卵泡-卵泡突起穿过透明带,并出现有营养作用的脂滴和支持作用的微丝;叁级卵泡-高尔基复合体发达,多与粗面内质网相贴,核糖体丰富,成簇分布,接近排卵的卵泡中卵泡细胞发生扩展等一系列结构上的变化将利于受精。(本文来源于《特产研究》期刊2009年01期）
卵泡细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
飞蝗(Locusta migratoria)是我国重要的农业害虫,强大生殖力是飞蝗暴发成灾的一个重要生物学因素。昆虫卵成熟过程中需要储存大量的卵黄蛋白,为之后的胚胎发育提供营养物质,因此卵黄发生(vitellogenesis)是昆虫生殖发育过程的重要事件。在以飞蝗为代表的昆虫中,卵黄原蛋白(Vitellogenin,Vg)在脂肪体中合成,由血淋巴运输到卵巢,被发育中的卵母细胞吸收。卵母细胞被一层致密排列的卵泡细胞层包裹,Vg首先需要穿过卵泡细胞间的通道(patency)才能到达卵母细胞表面,进而被卵母细胞通过内吞机制吸收。根据已有的报道,保幼激素(juvenile hormone,JH)能够调控胞间通道的开启,但是由于缺乏胞间通道在体内和体外动态变化的观察方法,限制了胞间通道调控机制的研究进展。此外,JH调控胞间通道开启的关键信号因子也有待揭示。飞蝗的卵黄生成和胞间通道开启主要由JH调控,而且其胞间通道开启对JH的响应较为敏感,因此,飞蝗是研究保幼激素调控卵泡细胞间通道分子机制的一个理想模型。本论文利用飞蝗的优势展开叁个方面的研究:一是通过使用合适的染料和方法对卵泡细胞进行染色,建立起一套快速且清晰的观察胞间通道的方法,为胞间通道的深入研究奠定基础,并在此基础上进一步观察不同发育阶段卵泡细胞间通道的形态变化;二是建立JH诱导胞间通道开启的动态观察模型,为研究JH调控胞间通道的分子机制研究体外模式;叁是利用RNAi对G蛋白偶联受体(G-protein coupled receptor,GPCR)的部分家族基因进行功能分析,筛选影响胞间通道开启的关键因子,初步解析JH调控胞间通道开启的膜信号通路。研究结果显示,CellMask Orange Plasma membrane Stain能够在活细胞状态下对卵泡细胞膜染色,且细胞的轮廓清晰,胞间通道的形态能够直观且完整显示。正常发育条件下对各阶段的卵泡细胞观察表明,卵黄发生前期,首个卵母细胞长度不超过1.5 mm时,胞间通道处于关闭状态。进入卵黄发生期,首个卵母细胞长度在1.5-5.5mm之间时,胞间通道逐渐扩大。在卵黄发生末期,首卵长度大于5.5mm时,胞间通道打开到最大状态,并在长度超过6mm后迅速关闭。根据上述结果推测,胞间通道从卵黄发生前期的关闭状态,进入卵黄发生期打开并逐渐增大,到卵黄发生末期短时间内迅速关闭。在整个卵黄发生期,胞间通道打开后不再关闭,直至卵母细胞发育成熟。为了建立JH诱导胞间通道形成的体外模型,我们基于以上实验基础和文献报道,利用JH III及其类似物(methoprene,JHA)在体外对处于卵黄发生中期的卵泡细胞进行诱导,观察胞间通道的变化。结果显示,在10~(-8)M的JH或JHA诱导条件下,胞间通道在1小时内明显增大。体外模型的建立可以为深入研究JH调控胞间通道形成的信号转导机制提供良好的实验材料,有助于推动JH膜信号传递的分子机制研究。前期研究结果表明,可能是介导JH信号并调控胞间通道开启的重要因子。我们利用RNAi对12个GPCR基因进行了干扰,观察其在卵黄发生中的作用。结果表明,其中的5个基因,包括orphan receptor(OrR)、cardioacceleratory peptide receptor(CCAPR)、methuselah-like 2(Mthl2)、parathyroid hormone/parathyroid hormone-related peptide receptor(PTHR)和tyramine receptor 2(TyR2),显着影响卵巢生长和卵母细胞成熟。进一步的Western blot检测显示,OrR和CCAPR干扰后,Vg在脂肪体和血淋巴中的含量增多而在卵巢中减少,表明卵巢生长和卵母细胞成熟受到抑制是因为卵母细胞不能正常吸收Vg导致,这两个基因是否参与胞间通道调控而影响Vg吸收有待于进一步研究。Mthl2、PTHR和TyR2干扰后,Vg在脂肪体中没有变化,而在血淋巴和卵巢中减少;结果说明,Mthl2、PTHR和TyR2干扰后,卵巢生长和卵母细胞成熟受到抑制是由Vg不能正常分泌到血淋巴中引起的。综合上述结果,我们摸索了一套观察胞间通道动态变化的染色方法,建立了JH诱导胞间通道的体外模型。另外,我们筛选了两个GPCR基因即OrR和CCAPR作为调控胞间通道开闭的候选基因。研究结果将为阐明JH调控卵泡细胞间通道的分子机制提供基础和参考。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
卵泡细胞论文参考文献
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