氟硼二吡咯类共轭聚合物均相检测miRNA研究

论文摘要

基于水溶性氟硼二吡咯类共轭聚合物PBF可与长波长区（> 600 nm）荧光染料产生荧光共振能量转移（FRET）,结合引物延伸反应,发展了一种均相检测miRNA的新方法.方法首先通过引物延伸反应在目标miRNA分子上引入荧光染料Cy5,形成miRNA-Cy5.然后,PBF与miRNA-Cy5/DNA杂合体通过静电力结合并发生从PBF到Cy5的有效FRET,实现了基于阳离子共轭聚合物（CCP）的长波长区miRNA的均相检测,方法灵敏度高、特异性好,测定miR-221的线性为15～6 000 pmol/L,检出限（3σ）为8.4 pmol/L.方法拓展了CCP的应用,为基于CCP的生物传感和生化分析提供了新的均相检测平台.

论文目录

• 1 实验部分
•   1.1 试剂与仪器
•   1.2 实验步骤
•     1.2.1 引物延伸反应
•     1.2.2 荧光检测
•     1.2.3 实际样品分析
• 2 结果与讨论
•   2.1 实验原理
•   2.2 反应条件的优化
•     2.2.1 探针浓度的优化
•     2.2.2 Klenow聚合酶的优化
•     2.2.3 反应温度的优化
•     2.2.4 反应时间的优化
•   2.3 特异性实验
•   2.4 方法的线性及灵敏度
•   2.5 实际样品的测定
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张江艳,赵丽坤,李亚茹,张璇歌,成永强

关键词: 共轭聚合物,氟硼二吡咯,均相

来源: 河北大学学报(自然科学版) 2019年03期

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学,化学

单位: 河北大学化学与环境科学学院河北省分析科学技术重点实验室药物化学与分子诊断教育部重点实验室

基金: 国家自然科学基金资助项目(21475031),河北省自然科学基金资助项目(B2018201049,B2017201184)

分类号: O657.3;Q503

页码: 247-253

总页数: 7

文件大小: 1557K

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