导读:本文包含了纹状体提取液论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:纹状体,中脑,干细胞,神经元,神经,提取液,多巴胺。
纹状体提取液论文文献综述
王新宇,张华伟,李新钢,鲍修风,辛华[1]（2008）在《人胚胎纹状体组织提取液对人胚胎神经干细胞分化方向的影响》一文中研究指出目的对人胚胎神经干细胞(NSCs)进行分离、培养,研究纹状体组织提取液对神经干细胞分化方向的影响。方法从临床因故引产的人胚胎(胎龄8~16周)海马组织中分离、培养人胚胎神经干细胞,将其分离纯化并进行抗Nestin染色鉴定后分为两组进行诱导分化实验。A组:以基础培养基作为对照组;B组:基础培养基+人胚胎纹状体组织提取液(50ml/L)。分化的第7d取出细胞爬片,分别进行抗神经特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞化学染色,抗5-羟色氨(TH)免疫荧光化学染色和RT-PCR方法检测TH-mRNA的表达。结果培养的海马细胞经抗Nestin染色后呈Nestin阳性,证明为神经干细胞。诱导分化后对照组与实验组的NSE阳性细胞率分别为(21.89±2.17)%和(23.50±1.60)%,两组比较结果无统计学差异(P>0.05)。TH阳性细胞率分别为(0.53±0.17)%和(7.38±0.84)%,两组比较有统计学差异(P<0.05)。RT-PCR检测结果表明,TH-mRNA在对照组中无明显表达,纹状体组织提取液组神经干细胞分化后,TH-mRNA表达明显,两组比较有统计学差异(P<0.05)。结论在体外培养中,人胚胎纹状体组织提取液对神经干细胞向神经元分化无明显促进作用,但能促进人胚胎神经干细胞向多巴胺能神经元分化。(本文来源于《解剖学报》期刊2008年02期）
王新宇,李新钢,周璐,鲍修风,辛华[2]（2007）在《纹状体组织提取液诱导人胚胎神经干细胞向多巴胺能神经元分化的实验研究》一文中研究指出目的体外培养人胚胎神经干细胞并诱导其向多巴胺能神经元分化。方法从临床引产的人胚胎(胎龄8~16周)海马组织中分离、培养人胚胎神经干细胞,对其进行诱导分化。诱导剂采用来源于20周胎龄胚胎的纹状体的组织提取液。实验分为2组:对照组无诱导剂,培养基为撤除生长因子的基础培养基;实验组培养基中加入纹状体组织提取液50μL/mL;于诱导分化的第7天终止诱导分化,采用标记TH的免疫荧光染色方法检测TH阳性细胞量,用RT-PCR方法检测TH-mRNA的表达情况。结果抗TH的免疫荧光染色结果为:对照组与实验组的TH阳性细胞率分别为(0.53±0.17)%和(7.38±0.84)%,两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示:对照组TH-mRNA表达不明显,实验组明显表达TH-mRNA,实验组与对照组的TH-mRNA表达差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论纹状体组织提取液具有促进人胚胎神经干细胞向多巴胺能神经元分化的作用。(本文来源于《山东大学学报(医学版)》期刊2007年11期）
秦晓凌[3]（2007）在《帕金森大鼠纹状体提取液对骨髓基质细胞诱导作用的实验研究》一文中研究指出帕金森病(Parkinson’s Disease, PD)的主要病理改变是中脑黑质致密部多巴胺能神经元进行性减少,引起黑质纹状体系统多巴胺水平降低。服用左旋多巴制剂的多巴胺替代治疗至今仍是最为有效的治疗方法,但其远期疗效欠佳,症状波动,异动症以及精神症状长期困扰着患者和医疗人员。细胞移植是目前帕金森病治疗的新方法之一,如何在体外获得足量的多巴胺能神经元一直是神经科学界面临的一个难题。胎脑移植有比较好的效果,但是由于伦理束缚和来源限制,不能够得到广泛应用。骨髓基质细胞(Bone Marrow Stromal Cells,BMSCs)是骨髓内的一种多潜能干细胞,在一定条件下,可分化为神经细胞。它可以直接从个体骨髓中获得,来源充足,取材方便,创伤小,且避免了移植技术难以逾越的移植排斥问题和伦理学的束缚,因此BMSCs定向诱导分化成为神经元甚至是多巴胺能神经元成为帕金森病研究领域的热点。骨髓基质细胞向神经样细胞分化的机制还不确定。研究者认为内在基因机制和种系限制以及细胞的命运是可塑的,环境可以引起细胞多潜能作用的发挥。神经组织或细胞微环境可以增强BMSCs向神经细胞方向分化的能力。纹状体是黑质多巴胺能神经元主要投射部位,是黑质多巴胺能神经元发挥生理作用的关键环节。动物实验已证实将BMSCs移植到纹状体,能够改善帕金森病大鼠或小鼠的行为。其可能作用机制是:BMSCs具有分泌神经营养因子的功能;BMSCs注入纹状体后,在局部微环境的作用下分化为神经细胞,如胶质细胞、多巴胺能神经元等。又有体外实验表明纹状体提取液对多巴胺能神经元有促进存活的作用,对细胞的分化有促进作用,还可以促进细胞突触生成。在进化的过程中,哺乳动物继承了多方面的机制以保护自己应对外来侵犯。帕金森病患者脑内DA能神经元70-80%丢失仍能保持正常运动,提示着一种自我保护机制。我们设想,帕金森大鼠纹状体提取液可以促进BMSCs向神经细胞方向分化,甚至分化为多巴胺能神经元。我们进一步设想正常纹状体(正常侧)提取液和PD纹状体(损伤侧)提取液两者间具有诱导作用上的差异。因此,我们进行了帕金森大鼠纹状体提取液诱导BMSCs的尝试,以期利用纹状体的生理作用以及纹状体提取液对细胞的促分化作用和对多巴胺能神经元的保护作用,诱导BMSCs分化成为神经细胞甚至是多巴胺能神经元。同时比较正常纹状体提取液与PD纹状体提取液作用上的可能差异性。本实验研究的目的:利用细胞培养技术,为BMSCs纹状体移植治疗帕金森病的机制提供直接依据。具体实验步骤:1,幼年大鼠骨髓基质细胞体外培养扩增与生物性状观察;2,帕金森大鼠纹状体提取液对骨髓基质细胞的诱导作用。第一部分幼年大鼠骨髓基质细胞体外培养与观察目的:体外分离培养大鼠骨髓基质细胞,通过超微结构观察和免疫组织化学检测探讨细胞生物学特性。方法:收集幼年大鼠骨髓细胞,利用贴壁培养法纯化扩增。培养细胞至第叁代,相差显微镜及HE染色,扫描电镜和透射电镜观察细胞生长状态和细胞形态;免疫细胞化学染色检测细胞表面神经标记物巢蛋白(Nestin),神经特异性烯醇化酶(neuron special enolase,NSE),胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)。结果:电镜下细胞表面见大量微绒毛结构,一些细胞有单个或多个突起样结构。多数细胞膜完整,胞浆内存在丰富的细胞器;胞核大而明显,染色质分布正常;细胞间连接较少,可见缝隙连接。免疫细胞化学检测胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)阳性细胞15.05±3.92%。结论:贴壁培养法是体外培养大鼠BMSCs的稳定可靠的方法体系。第叁代大鼠BMSCs具有生长旺盛,增值能力强,分化程度低的特点;部分细胞可表达GFAP。第二部分帕金森大鼠纹状体提取液对骨髓基质细胞的诱导作用目的:探讨帕金森大鼠纹状体提取液在体外诱导骨髓基质细胞分化为神经细胞的可能。方法:建立单侧(右侧)帕金森病大鼠模型,取出双侧纹状体分别制成正常纹状体(正常侧)提取液与PD纹状体(损伤侧)提取液,制成不同浓度含纹状体液的无血清培养基(诱导液)。收集幼年大鼠骨髓细胞,利用贴壁培养法纯化扩增获取叁代细胞进行实验。MTT法分别检测不同浓度纹状体诱导液对BMSCs生长状态的影响。取10%,60%,90%诱导液(共六组)培养BMSC,相差显微镜下观察细胞生长状态和细胞形态变化。于48小时后收集诱导后的细胞,免疫细胞化学染色检测细胞表面神经标记物巢蛋白(Nestin),神经特异性烯醇化酶(neuron special enolase,NSE),胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP),酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH),计数阳性率。结果:相差显微镜下,部分细胞脱落,不再贴壁生长,悬浮于培养液中。仍然贴壁的细胞失去原有圆形或梭形外观,为不规则的多边形或长棒状。有的细胞团簇样存在,向四周伸出辐射状或长或短的较粗的刺状突起,还有的细胞单个存在,胞体不规则,向周围伸出单个或多个细长的突起样结构。免疫细胞化学染色显示,诱导后正常纹状体诱导液10%浓度组NSE阳性率为3.25±2.37%,GFAP阳性率为48.44±29.47%;60%浓度组NSE阳性率为20±8.62%,GFAP阳性率为54.60±33.14%;两组间无统计学差异。PD纹状体诱导液10%浓度组Nestin阳性率为12.23±5.57%,GFAP阳性率为55.56±30.23%;60%浓度组Nestin阳性率为11.92±4.01%,GFAP阳性率为55.56±30.23%;两组间亦没有统计学差异。各诱导组TH表达均为阴性。结论:帕金森大鼠纹状体提取液可以引起BMSCs形态学改变。与第叁代BMSCs相比,诱导后GFAP阳性细胞显着增多,同时出现NSE,Nestin阳性细胞。总论1.贴壁培养法是体外培养大鼠BMSCs的稳定可靠的方法体系。第叁代幼年大鼠BMSCs具有生长旺盛,增值能力强,分化程度低的特点;部分细胞表达GFAP。2.帕金森大鼠纹状体提取液可以引起第叁代BMSCs发生形态学改变,部分细胞具有长短不一的突起样结构。与第叁代BMSCs相比,诱导后GFAP阳性细胞显着增多,同时出现NSE,Nestin阳性细胞,但是没有TH阳性细胞。(本文来源于《苏州大学》期刊2007-04-01）
沈春升,田美玲,秦建兵,谭雪锋,朱蕙霞[4]（2005）在《去多巴胺神经纹状体提取液诱导人NSCs向多巴胺能神经元的定向分化及NSCs移植治疗PD的实验研究》一文中研究指出目的:探讨去多巴胺能神经纹状体提取液诱导入NSCs向多巴胺能神经元的定向分化作用并观察人、鼠NSCs移植入PD大鼠损毁侧纹状体后存活、迁移和分化情况。方法:体外用胎牛血清(对照)、损毁侧纹状体提取液、未损毁侧纹状体提取液、IL-1α、联合因子(IL-1α+IL-11+LIF+GDNF) 及损毁侧纹状体提取液+联合因子诱导NSCs向多巴胺能神经元分化,用TH检测分化为多巴胺能神经元的情况。并将皮质、中脑来源的人或鼠胚NSCs先用Hoechst或BrdU标记,在加细胞因子(IL-1α+IL-11+LIF+GDNF)和不加细胞因子的情况下,移植至PD鼠损毁侧纹状体,进行MAP-2、GFAP和TH免疫荧光检测。结果:体外培养皮质各组TH阳性神经元数由多至少依次为:损毁侧纹状体提取液+联合因子组、联合因子组、损毁侧纹状体提取液组、IL-1α组、未损毁侧纹状体提取液组和对照组;中脑各组由多至少依次为:损毁侧纹状体提取液+联合因子组、损毁侧纹状体提取液组、联合因子组、IL-1α组、未损毁侧纹状体提取液组和对照组。皮质各组TH阳性神经元胞体面积由大至小依次为:损毁侧纹状体提取液+联合因子组、联合因子组、损毁侧纹状体提取液组、IL-1α组、未损毁侧纹状体提取液组和对照组;中脑各组由大至小依次为:损毁侧纹状体提取液+ 联合因子组、联合因子组、损毁侧纹状体提取液组、IL-1α组、未损毁侧纹状体提取液组和对照组。(本文来源于《中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编》期刊2005-10-01）
余小强,阮怀珍,蔡文琴,范晓棠,姚忠祥[5]（2004）在《PD大鼠纹状体提取液诱导中脑神经干细胞分化为多巴胺能神经元的研究》一文中研究指出目的 研究PD大鼠纹状体提取液诱对中脑神经干细胞的诱导分化作用。方法 ①体外分离、培养大鼠胚胎的中脑神经干细胞 ,并诱导其分化 ,巢素 (Nestin)、神经丝 2 0 0 (NF 2 0 0 )、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化染色鉴定。②加入纹状体提取液后 ,分化细胞用抗酪氨酸羟化酶 (TH)免疫组化鉴定 ,并用流式细胞技术检测分化比例。结果 ①从大鼠胚胎的腹侧中脑部位分离获得了大量未分化、呈巢状悬浮生长的细胞团 ,且能分化为神经元和神经胶质细胞。②经纹状体提取液诱导后 ,能够分化出多巴胺能神经元 ,分化比例达 2 0 %左右。结论 纹状体提取液能诱导中脑神经干细胞向多巴胺能神经元的分化(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2004年01期）
余小强[6]（2003）在《纹状体提取液诱导大鼠中脑神经干细胞分化为DA神经元及移植治疗PD的实验研究》一文中研究指出帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种常见的中枢神经系统变性性疾病，其主要的病理变化为中脑黑质多巴胺能神经元选择性的变性死亡。移植胚胎中脑腹侧多巴胺能神经元在帕金森病人和帕金森病动物模型上都能够存活并很好地改善其运动障碍。尽管移植治疗有确切疗效，但是由于伦理和来源的限制，不能够得到足够多的人类胚胎中脑细胞，因此，其应用范围极为局限。为了克服这个问题，必须要找到更好的其它来源的细胞用作移植治疗之用。神经干细胞(neural stem cells, NSCs)体外研究的进步为人们提供了新的选择，利用NSCs分化为多巴胺能神经元是一个很有前途的方向。NSCs的主要特征为：未分化、缺乏分化标记、能自我更新并具有多种分化潜能。它能够在体外分离培养存活很长的时间并自我增生，在某些诱导因子的作用下，它能分化为神经元，星形胶质细胞和少突胶质细胞。然而不同于从CNS的其它地方，如大脑的室下区分离得到的NSCs，从多巴胺能神经元发育的部位－中脑曲分离的NSCs由于本身含有中脑源性的转录因子，能够迅速分化为多巴胺能神经元从而对区域信号作出反应，显然更有利于诱导分化的成功。由于这些特点，它们更适合于在体外诱导分化为多巴胺能神经元。许多研究表明，多巴胺耗竭的纹状体即黑质毁损侧的纹状体提取液对体外培养的多巴胺能神经元的存活及其突轴的生长有很好的浓度依赖性的营养作用。但是没有证据表明，它能否诱导中脑NSCs分化为多巴胺能神经元。为此，我们在体外从胚胎大鼠的中脑曲分离培养中脑NSCs，并用纹状体提取液对其进行诱导分化，得到了多巴胺能神经元并在PD大鼠模型上进行了移植研究，结果如下：1. 我们成功在体外分离、培养并鉴定了Wistar大鼠中脑NSCs。2. 我们分离得到的中脑NSCs在体外可以分化为神经元，星形胶质细胞和少突胶质细胞，说明它有多向分化潜能。3. 纹状体提取液能在体外诱导中脑NSCs分化出多巴胺能神经元，其分化比例可以达到20%左右。4. 将中脑NSCs及诱导分化后的细胞移植入PD大鼠毁损侧纹状体内，术后在不同的时相点检测PD大鼠旋转行为的变化。与对照组相比，诱导分化后的多巴胺能神<WP=7>经元移植能够明显改善PD大鼠的旋转行为。总之，本实验成功地进行了中脑NSCs的分离，鉴定和培养，利用纹状体提取液对其进行诱导分化能够得到多巴胺能神经元，经诱导分化后的细胞移植入PD大鼠的纹状体可以显着改善PD大鼠的旋转行为。结果表明，纹状体提取液能诱导中脑NSCs向多巴胺能神经元分化，在治疗帕金森病中可能有着广阔的应用前景,但对其诱导分化机制以及如何提高多巴胺能神经元的分化比例等方面还需要进行更深入的研究。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2003-05-01）
俞生,庆宏[7]（1997）在《新生大鼠纹状体提取液最适洗脱速度的探讨》一文中研究指出用HPLC层析分离新生大鼠纹状体提取液，分别用不同的洗脱速度来分析每个样品洗脱峰，以寻找一个有效的洗脱速度，方便收集和分析。实验结果提出：当洗脱速度为0．20ml／min时，分离的效果和收集样品的纯度为最佳。(本文来源于《皖南医学院学报》期刊1997年02期）
庆宏,郭晓华[8]（1994）在《纹状体提取液增强体外培养的中脑黑质神经元的发育》一文中研究指出制备新生２ｄ龄大鼠纹状体提取液及其不同分子量的组分，用快速自动比色微量分析法检测它们对体外培养的１４ｄ龄大鼠胚胎中脑黑质神经元的影响。结果表明，纹状体提取液有支持中脑黑质神经元生存及增强其活性的作用，而且具有剂量依赖关系，其最适浓度为１．２５μｇ／ｍｌ。纹状体提取液还能促进中脑黑质神经元对２Ｈ－ＤＡ和３Ｈ－ＧＡＢＡ的摄取，同对照组相比，有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。通过检测纹状体提取液小于１０ｋＤ、１０～３０ｋＤ和大于３０ｋＤ３种不同分子量组分对中脑黑质神经元的作用，证明有活性的部分是分子量为１０～３０ｋＤ的组分。(本文来源于《解剖学报》期刊1994年03期）
庆宏,郭畹华[9]（1994）在《38 纹状体提取液增强体外培养的中脑黑质神经元的发育》一文中研究指出神经元的靶组织能释放可溶性化学因子(靶源性神经营养因子)增强神经元的存活和发育.纹状体是中脑黑质神经元主要的靶组织.我们制备新生2天龄SD大鼠纹状体提取液及其不同分子量的组分,用快速自动比色微量分析法检测它们对体外培养的14天龄SD大鼠胚胎中脑黑质神经元的影响.结果表明,纹状体提(本文来源于《广东解剖学通报》期刊1994年01期）
纹状体提取液论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的体外培养人胚胎神经干细胞并诱导其向多巴胺能神经元分化。方法从临床引产的人胚胎(胎龄8~16周)海马组织中分离、培养人胚胎神经干细胞,对其进行诱导分化。诱导剂采用来源于20周胎龄胚胎的纹状体的组织提取液。实验分为2组:对照组无诱导剂,培养基为撤除生长因子的基础培养基;实验组培养基中加入纹状体组织提取液50μL/mL;于诱导分化的第7天终止诱导分化,采用标记TH的免疫荧光染色方法检测TH阳性细胞量,用RT-PCR方法检测TH-mRNA的表达情况。结果抗TH的免疫荧光染色结果为:对照组与实验组的TH阳性细胞率分别为(0.53±0.17)%和(7.38±0.84)%,两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示:对照组TH-mRNA表达不明显,实验组明显表达TH-mRNA,实验组与对照组的TH-mRNA表达差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论纹状体组织提取液具有促进人胚胎神经干细胞向多巴胺能神经元分化的作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
纹状体提取液论文参考文献
[1].王新宇,张华伟,李新钢,鲍修风,辛华.人胚胎纹状体组织提取液对人胚胎神经干细胞分化方向的影响[J].解剖学报.2008
[2].王新宇,李新钢,周璐,鲍修风,辛华.纹状体组织提取液诱导人胚胎神经干细胞向多巴胺能神经元分化的实验研究[J].山东大学学报(医学版).2007
[3].秦晓凌.帕金森大鼠纹状体提取液对骨髓基质细胞诱导作用的实验研究[D].苏州大学.2007
[4].沈春升,田美玲,秦建兵,谭雪锋,朱蕙霞.去多巴胺神经纹状体提取液诱导人NSCs向多巴胺能神经元的定向分化及NSCs移植治疗PD的实验研究[C].中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编.2005
[5].余小强,阮怀珍,蔡文琴,范晓棠,姚忠祥.PD大鼠纹状体提取液诱导中脑神经干细胞分化为多巴胺能神经元的研究[J].第叁军医大学学报.2004
[6].余小强.纹状体提取液诱导大鼠中脑神经干细胞分化为DA神经元及移植治疗PD的实验研究[D].第叁军医大学.2003
[7].俞生,庆宏.新生大鼠纹状体提取液最适洗脱速度的探讨[J].皖南医学院学报.1997
[8].庆宏,郭晓华.纹状体提取液增强体外培养的中脑黑质神经元的发育[J].解剖学报.1994
[9].庆宏,郭畹华.38纹状体提取液增强体外培养的中脑黑质神经元的发育[J].广东解剖学通报.1994
论文知识图
