慢病毒载体介导CC趋化因子受体7基因过表达可促进大鼠骨髓间充质干细胞归巢

论文摘要

背景:研究发现,骨髓间充质干细胞特异性地表达CC趋化因子受体7（CC chemokine receptor,CCR7）,与其配体次级淋巴组织趋化因子（secondary lymphoid-tissue chemokine,SLC）相互作用,有助于骨髓间充质干细胞归巢到损伤部位。目的:探讨CCR7基因过表达对大鼠骨髓间充质干细胞体内外归巢特性的影响。方法:利用慢病毒载体介导大鼠骨髓间充质干细胞过表达CCR7基因,建立过表达CCR7的骨髓间充质干细胞。通过Transwell实验体外检测趋化因子SLC对过表达CCR7的骨髓间充质干细胞体外定向迁移的影响。将SD大鼠分为4组,每组动物10只:①对照组:未接受全身照射大鼠作为对照组;②照射组:大鼠接受全身照射（60Co单次全身照射,总剂量为7.5 Gy,照射量率为0.75 Gy/min）,输注生理盐水1 mL;③BMSCs-GFP组:大鼠经全身照射后,输注GFP标记的骨髓间充质干细胞悬液1 mL （含细胞5×105个）;④CCR7-BMSCs-GFP组:大鼠经全身照射后,输注携带GFP和CCR7基因的骨髓间充质干细胞1 mL （含细胞5×105个）。移植24 h后取大鼠脾脏做冰冻切片,荧光显微镜下观察骨髓间充质干细胞归巢情况,流式细胞技术检测骨髓间充质干细胞在脾脏的归巢率。ELISA方法检测照射后大鼠外周血中SLC水平。结果与结论:①Transwell实验结果表明,过表达CCR7可促进骨髓间充质干细胞向趋化因子SLC迁移募集;②冰冻切片结果显示,过表达CCR7可明显提高骨髓间充质干细胞归巢至损伤脾脏的效率;③流式细胞术测定过表达CCR7的骨髓间充质干细胞归巢至脾脏数量明显高于BMSCs-GFP组（P <0.05）;④ELISA结果显示,照射24 h后大鼠外周血中SLC水平明显升高;⑤结果表明,CCR7及其配体SLC对骨髓间充质干细胞的归巢有促进作用。

论文目录

• 文章快速阅读:
• 文题释义:
• 0引言Introduction
• 1 材料和方法Materials and methods
•   1.1 设计
•   1.2 时间及地点
•   1.3 材料
•     1.3.1 实验动物
•     1.3.2 实验试剂和仪器
•   1.4 实验方法
•     1.4.1 BMSCs的培养、鉴定
•     1.4.2 重组慢病毒载体构建及过表达CCR7-BMSCs的制备
•     1.4.3 Transwell体外趋化实验
•     1.4.4 动物体内实验分组
•     1.4.5 BMSCs的归巢效果
•     1.4.6 ELISA检测外周血中SLC水平
•   1.5 主要观察指标
•   1.6 统计学分析
• 2 结果Results
•   2.1 BMSCs的形态特征、鉴定结果
•   2.2 体外Transwell实验观察CCR7对BMSCs的迁移作用
•   2.3 CCR7促进BMSCs在脾脏归巢募集
•   2.4 全身照射损伤增加外周血中SLC水平
• 3 讨论Discussion

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王志红,陈为民,林芸,尚晋,魏天南

关键词: 骨髓,间充质干细胞,过表达基因,干细胞移植,细胞归巢,脾脏

来源: 中国组织工程研究 2019年25期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 福建省立医院血液科福建医科大学省立临床医学院

基金: 福建省卫生计生中青年骨干人才培养项目(2016-ZQN-4),项目负责人:王志红,福建省科技创新联合基金项目(2017Y9068),项目负责人:王志红~~

分类号: R329.2

页码: 3973-3977

总页数: 5

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