导读:本文包含了重组人白血病抑制因子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:白血病,因子,抑制,凋亡,细胞,复性,细胞株。
重组人白血病抑制因子论文文献综述
曹顺,杨玉露,徐光华,陈思佳,王天云[1]（2019）在《重组人白血病抑制因子的原核表达及优化》一文中研究指出目的在大肠杆菌中表达重组人白血病抑制因子(HLIF)蛋白,并探索其高效表达的条件。方法将HLIF重组质粒转化至大肠杆菌BL21,分别给予不同诱导时间(4、8、12、16、20、24 h)、不同浓度大肠杆菌(吸光度值分别为0. 5、0. 6、0. 8、1. 0)、不同诱导温度(20、25、30、37、42℃)、不同浓度诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)(0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5 mmol·L-1)、不同浓度乙酸(0. 0、0. 1、0. 2、0. 3、0. 4 mmol·L-1)进行培养,蛋白电泳考马斯亮蓝染色后,采用Image J软件分析HLIF蛋白的相对表达量,观察不同干预条件对HLIF表达的影响。结果不同诱导时间下HLIF蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(F=22. 088,P <0. 05),诱导16 h时的HLIF蛋白相对表达量显着高于诱导4、8、12、20、24 h(P <0. 05)。不同浓度(以吸光度值表示)大肠杆菌诱导时HLIF蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(F=17. 153,P <0. 05);吸光度值为0. 8时HLIF蛋白相对表达量显着高于吸光度值为0. 5、0. 6时(P <0. 05),吸光度值为1. 0时与吸光度值为0. 8时HLIF蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。不同温度诱导时HLIF蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(F=18. 053,P <0. 05),25℃时HLIF蛋白相对表达量显着高于20、30、37、42℃时(P <0. 05)。不同浓度诱导剂诱导时HLIF蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(F=1. 181,P> 0. 05)。不同浓度乙酸诱导时HLIF蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(F=27. 181,P <0. 05),乙酸浓度为0. 00 mmol·L-1时HLIF蛋白相对表达量显着高于乙酸浓度为0. 1、0. 2、0. 3、0. 4 mmol·L-1时(P <0. 05)。结论成功在大肠杆菌表达了HLIF,并探索出了适合最佳表达的诱导时间、大肠杆菌浓度、诱导温度、诱导剂浓度、乙酸浓度等条件。(本文来源于《新乡医学院学报》期刊2019年03期）
张鹤铭,焦雪苗,甘龙站,田杰伟,田永强[2]（2018）在《重组人白血病抑制因子的表达、包涵体复性、纯化及其活性》一文中研究指出白血病抑制因子(LIF)是一种在生物体内具有独特活性和重要调节作用因而广泛应用的多功能细胞因子.利用基因工程技术表达重组人白血病抑制因子(Recombinant human leukemia inhibitory factor,rhLIF)并进行包涵体的复性及纯化,将rhLIF基因克隆到原核表达载体pET32a中,成功构建重组hLIF基因工程菌,并研究该菌株发酵条件和纯化工艺.先将种子液进行发酵培养,诱导表达,收集诱导后的细胞;对细胞破碎,收集包涵体沉淀,洗涤包涵体;用6 mol/L盐酸胍变性重溶包涵体,镍离子亲和层析柱上直接复性及纯化,并用阴离子交换进一步纯化,复性率为75%,纯度达97%.结果显示基因序列与理论序列一致,SDS-PAGE分析结果表明其表达的外源蛋白质分子量与预期的目的蛋白质相对分子量大小相一致,均为35×10~3;Western blotting、MTT活性检测结果表明,此重组hLIF融合蛋白具有良好的抗原性和免疫原性.本研究成功建立了rhLIF原核表达、复性和纯化体系,可为进一步研究LIF生物学活性及产品开发提供试验基础.(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2018年01期）
王晓雯,郗雪艳,李小璐,关欣,郭阳[3]（2017）在《重组人白血病抑制因子在大肠杆菌中的表达及纯化》一文中研究指出目的:利用大肠杆菌表达并制备重组人源白血病抑制因子(Leukemia inhibitory factor,LIF)。方法:构建p ET-30a-rh LIF表达载体并转入大肠杆菌菌株BL21(DE3)之中,IPTG诱导使无标签的目的蛋白呈可溶性表达,继而利用叁步柱层析纯化目的蛋白。最后对所获目的蛋白活性进行测定,并对其N端和C端的完整性分别应用Edman测序法以及质谱法进行鉴定。结果:通过叁步柱层析以及中间的内毒素去除步骤可使无标签rh LIF获得纯化,检测结果提示所获目的蛋白内毒素水平<1 EU/μg,其活性同市售商品化LIF产品一致,Edman测序结果提示少部分目的蛋白N端存在甲硫氨酸修饰,质谱检测结果表明所获目的蛋白C端完整性较好。结论:建立了一种新的重组人源白血病抑制因子表达和纯化的方法,本方法不需利用标签蛋白,并可有效降低所获蛋白中内毒素水平,所获rh LIF蛋白可用于干细胞培养以及相关生物学研究。(本文来源于《湖北医药学院学报》期刊2017年03期）
毛彦娜,徐学聚,白松婷,王飞,卢洁[4]（2007）在《重组人白血病抑制因子体外诱导人巨核细胞白血病DAMI细胞株凋亡与P73蛋白表达》一文中研究指出目的探讨重组人白血病抑制因子(rh-LIF)诱导人巨核细胞白血病DAMI细胞株凋亡和P73蛋白表达,探讨其作用机制。方法应用锥虫蓝拒染法、CCK-8法观察不同质量浓度(1～40μg/L)rh-LIF作用6、12、24、48h后对DAMI细胞株增殖及活力影响,用流式细胞仪测定早期凋亡指标Annexin V,免疫组织化学法检测用药前后P73蛋白表达变化。结果低质量浓度(1、2μg/L)rh-LIF对DAMI细胞增殖无明显抑制,诱导凋亡作用不明显,P73蛋白阳性表达低(P>0.05);当质量浓度>5μg/L时其作用随培养时间延长及药物质量浓度增加而增强(P<0.05)。结论低水平rh-LIF对DAMI细胞增殖无明显抑制,高水平rh-LIF抑制DAMI细胞增殖并诱导其凋亡,用药后P73蛋白阳性表达有明显增高。(本文来源于《实用儿科临床杂志》期刊2007年15期）
毛彦娜[5]（2007）在《重组人白血病抑制因子、柔红霉素对DAMI细胞株的作用研究》一文中研究指出白血病(Leukemia)是人体造血组织的恶性疾病，也是儿童期发病率最高的一种恶性肿瘤疾病，是五岁以下儿童死亡的主要原因之一，白血病的发生、发展与细胞凋亡(Cell apoptosis)异常有密切关系，凋亡是一种基因(Gene)指导下的细胞主动自我消亡过程，它是正常胚胎发生过程和成人组织器官发育中细胞清除的正常途径，当凋亡通路受到抑制或阻断就可以使细胞永生化而恶变。凋亡涉及到一系列的基因调控(Gene regulation)，促进凋亡的基因有Bax、p53家族等。凋亡理论的提出不仅为白血病病因和发病机制开辟了新的领域，而且为白血病的治疗提供了新的思路。现知许多治疗白血病的传统化疗药物如柔红霉素(Daunorubicin)、甲氨蝶呤(Methotrexate)等都能够通过诱导白血病细胞发生凋亡而起到治疗白血病的作用，化疗几乎是治疗白血病的唯一选择。以儿童急性淋巴细胞白血病为例，二十世纪40年代后期主要局限于寻找有效的单一化疗药物，缓解和生存率很低，二十世纪50年代及60年代初发展了联合化疗和维持治疗。五年无病生存率达10％～20％，此后由于治疗白血病新药的问世，五年无病生存率已经达到50％～80％，近年许多细胞因子的出现为白血病的治疗提供了新的策略。为探索某些细胞因子和化疗药物对白血病细胞生长的影响，本研究以急性髓细胞白血病细胞(acute myeloid leukemia，AML)株DAMI细胞为靶细胞通过CCK-8法、流式细胞仪及免疫组化法对细胞增殖、早期凋亡指标、细胞周期及P73基因的表达进行检测，探讨单独或联合应用重组人白血病抑制因子(recombinant human leukemia inhibitory，rh-LIF)和柔红霉素对DAMI细胞的增殖与凋亡的影响，阐明有关机制，为白血病的临床治疗提供理论和实验依据。方法：将DAMI细胞置于含体积分数为10％小牛血清的RPMI1640培养基中，37℃，5％CO_2培养箱中悬浮培养，每2～3天传代一次，取对数生长期细胞进行实验。应用细胞增殖实验观察不同浓度的rh-LIF，DNR及两者联合应用对DAMI细胞作用6h、12h、24h、48h后细胞株增殖及活力的变化，用流式细胞仪测早期凋亡指标Annexin V，免疫组化法检测用药前后P73蛋白的表达变化、通过细胞周期测定来分析细胞发生凋亡的周期。全部数据用SPSS13.0统计软件进行处理，结果用均数±标准差((?)±s)表示。方差齐时用两组间的均数比较用t检验，方差不齐时两组间的均数比较用秩和检验，检验水准a=0.05。结果：1不同浓度的rh-LIF(1，5，10，20，40 ng/ml)对DAMI细胞株作用于6h、12h、24h、48h后，观察细胞株的增殖变化，当rh-LIF浓度较低时(1ng/ml)对细胞的增殖抑制作用不明显(P>0.05)，而当rh-LIF浓度增高(≥5ng/ml)时，对细胞的增殖抑制作用增强，差异有显着性意义(P<0.05)，流式细胞仪测定早期凋亡指标发现浓度为1 ng/ml时凋亡不明显(P>0.05)，≥5 ng/ml时凋亡率增高(P<0.05)，随着rh-LIF浓度的逐渐增高p73蛋白的阳性表达率也明显增高，差异有显着性意义(P<0.05)，p73蛋白的阳性表达率与药物浓度和作用时间呈一定的相关。细胞周期分析显示多数细胞被阻滞于G_0/G_1期。2不同浓度的DNR(0.5，1，2，4，8μmol/L)，对DAMI细胞株作用于6h、12h、24h、48h后观察细胞株的增殖变化，浓度0.5μmol/L时抑制作用不明显(P>0.05)，1，2，4，8μmol/L时，随着浓度加大、时间的延长抑制作用越越明显，差异有显着性意义(P<0.05)。0.5μmol/L时细胞开始发生凋亡，在0.5，1，2μmol/L时细胞随着作用时间的延长凋亡率显着增高(P<0.05)，4，8μmol/L时凋亡率则有下降趋势。0.5，1，2μmol/L时免疫组化显示p73蛋白的阳性表达率增高。4，8μmol/L时p73蛋白的阳性表达率降低。细胞周期分析显示DNR作用于DAMI细胞后被阻滞于G_0/G_1期。3 rh-LIF与DNR联合作用于DAMI细胞株对细胞增殖的抑制、细胞凋亡率的变化所示比单用rh-LIF的作用强(P<0.05)，与单用DNR相比无明显差别、p73蛋白阳性表达率与单用rh-LIF或DNR相比阳性表达率低(P<0.05)，细胞周期分析显示rh-LIF与DNR联合作用于DAMI细胞后被阻滞于G_0/G_1期。结论：1．rh-LIF和柔红霉素可抑制DAMI细胞株的生长，呈浓度、时间依赖性；p73蛋白的高表达可能是诱导DAMI细胞株凋亡的机制之一。2．细胞因子rh-LIF联合化疗药物无明显协同诱导DAMI细胞凋亡的作用。(本文来源于《郑州大学》期刊2007-05-01）
杜冰,唐恩洁[6]（2004）在《小剂量阿糖胞苷与重组人白血病抑制因子联合诱导HL-60细胞凋亡的作用》一文中研究指出白血病抑制因子 (leukemiainhibitoryfactor,LIF)是一类具有广泛生物学活性的细胞因子 ,对胚胎发育、神经细胞再生、关节软骨代谢、肿瘤细胞增殖等方面均有影响[1-3 ] 。阿糖胞苷 (Cytosinearabinoside ,Ar(本文来源于《川北医学院学报》期刊2004年03期）
杜冰,朱道银,唐恩洁[7]（2004）在《重组人白血病抑制因子体外诱导HL-60细胞凋亡与bc-l2及p53表达的关系》一文中研究指出目的 :探讨重组人白血病抑制因子 (rh LIF)诱导HL 6 0细胞凋亡的作用及其可能机制。方法 :不同剂量 (10～ 4 0 0 0U·ml-1)的rh LIF作用HL 6 0细胞 3d后 ,用流式细胞仪观察分析细胞周期变化并检测细胞凋亡率 ,用TUNEL法检测原位细胞凋亡情况 ;分别用免疫组化法和原位杂交法检测rh LIF作用 2、4、6d后P5 3蛋白及p5 3mRNA、bcl 2mRNA表达水平的改变。结果 :rh LIF (10～ 4 0 0 0U·ml-1)作用d 3,细胞凋亡率较对照组显着增加 ,其中以10 0 0U·ml-1组的作用最强 ;rh LIF (80 0U·ml-1)作用 2～ 6d ,P5 3蛋白和p5 3mRNA表达也同步增高 ,而bcl 2mRNA表达显着降低 (P <0 .0 1)。结论 :rh LIF能诱导HL 6 0细胞凋亡 ,该作用与P5 3蛋白表达增加和bcl 2表达降低有关(本文来源于《中国临床药理学与治疗学》期刊2004年06期）
杜冰,朱道银,唐恩洁[8]（2003）在《重组人白血病抑制因子对HL-60细胞的作用及机制研究》一文中研究指出目的 :观察rh -LIF对HL - 6 0细胞生长与分化的影响及其可能的作用机制。方法 :不同剂量的rh -LIF作用HL -6 0细胞 3- 6天 ,观察细胞生长 ,流式细胞术分析细胞周期 ,用免疫组化法检测P5 3,P2 1蛋白表达的变化 ,原位杂交法检测P5 3mRNA表达水平的改变。结果 :rh -LIF可诱导HL - 6 0细胞向单核 /巨噬细胞分化 ,抑制HL - 6 0细胞的增殖 ,使细胞停滞于G1期 :P5 3,P2 1蛋白和P5 3mRNA表达明显增强。结论 :rh -LIF对HL - 6 0细胞具增殖抑制和诱导分化作用 ,其作用机制可能与G1期阻滞及P5 3,P2 1表达增高有关。(本文来源于《重庆医科大学学报》期刊2003年03期）
杜冰[9]（2002）在《重组人白血病抑制因子、阿糖胞苷对HL-60细胞的作用研究》一文中研究指出白血病是严重危害人类健康的恶性血液性疾病，常规放疗、化疗的最大问题是其在杀灭肿瘤细胞的同时，亦可杀伤正常组织细胞，尤其是造血组织细胞，而致造血功能和免疫功能抑制，因此诱导分化治疗将成为肿瘤治疗的新途径。为探索某些细胞因子和化疗剂对白血病细胞生长与分化的影响，本研究以人急性髓系白血病细胞系HL-60细胞为靶细胞，采用细胞增殖试验、细胞周期分析技术、原位杂交技术、免疫组化技术和NBT还原试验等方法，观察单独或联合应用重组人白血病抑制因子（rh-LIF）和阿糖胞苷（Ara-c）对HL-60细胞生长与分化的影响及其作用机制，为白血病的临床治疗提供理论与实验依据 。初步研究结果得出以下结论：1． rh -LIF单独可诱导HL-60细胞向单核细胞系、巨噬细胞系分化，小剂量Ara-c单独能诱导HL-60细胞向单核细胞系分化；两者联用，Ara-c可干扰LIF对HL-60细胞的诱导分化作用。2． rh-LIF对HL-60细胞增殖的抑制作用呈现剂量依赖性，当其浓度为1u-1000u/ml时呈现抑制作用，浓度增至10000u/ml时，抑制作用亦显着增强（p＜0.05）。3.细胞周期分析结果表明：rh-LIF、小剂量Ara-c可致50%左右HL-60细胞停滞于G0/G1期。<WP=5>4．rh-LIF、小剂量Ara-c可诱导HL-60细胞表达P53 mRNA、P53蛋白和P21蛋白（p＜0.05），前者诱导作用较后者强。rh-LIF诱导P53表达呈时间依赖性。5．rh-LIF、小剂量Ara-c可抑制HL-60细胞表达bcl-2癌基因（p＜0.05），抑制作用呈时间依赖性 。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2002-05-01）
王国云,邓晓惠,张慧琴,于红玲,江森[10]（2002）在《重组人白血病抑制因子对体外移植前鼠胚发育的影响》一文中研究指出目的 观察重组人白血病抑制因子 (rhLIF)对体外移植前鼠胚发育的影响。方法 将36只小鼠随机分成 3组 ,每组 12只。组Ⅰ (体内对照 )小鼠注射人绒毛膜促性腺激素 (hCG) 116～ 12 0h后处死 ,组Ⅱ及组Ⅲ (体外对照 )小鼠注射hCG 44～ 48h后处死 ,收集组Ⅱ及组Ⅲ的 2细胞期鼠胚 ,组Ⅱ的鼠胚用人输卵管液 (HTF) +10 %人血清培养 ,组Ⅲ的鼠胚用HTF +10 %人血清 +rhLIF (10 0 0U/ml)培养 ,观察并记录各细胞期鼠胚发育的数目。结果 (1)组Ⅱ和组Ⅲ发育到 4细胞期、8细胞期、桑椹胚阶段的鼠胚百分率 (分别为 93 4%、87 7%、75 0 %和 94 5 %、91 2 %、85 4% )相似 ,差异无显着性(P >0 0 5 )。 (2 )组Ⅱ发育到囊胚期、扩张囊胚期和孵出期的鼠胚百分率低于组Ⅲ (分别为 48 1%、32 1%、18 4%和 82 3%、5 9 7% 36 3% ) ,差异有显着性 (P <0 0 5 )。 (3)组Ⅰ和组Ⅲ发育到囊胚期的鼠胚百分率 (分别为 86 0 %和 82 3% )相比 ,差异无显着性 (P >0 0 5 )。结论 rhLIF对鼠胚的早期发育没有显着影响 ,但能促进移植前晚期鼠胚的生长、分化和孵出。(本文来源于《中华妇产科杂志》期刊2002年02期）
重组人白血病抑制因子论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
白血病抑制因子(LIF)是一种在生物体内具有独特活性和重要调节作用因而广泛应用的多功能细胞因子.利用基因工程技术表达重组人白血病抑制因子(Recombinant human leukemia inhibitory factor,rhLIF)并进行包涵体的复性及纯化,将rhLIF基因克隆到原核表达载体pET32a中,成功构建重组hLIF基因工程菌,并研究该菌株发酵条件和纯化工艺.先将种子液进行发酵培养,诱导表达,收集诱导后的细胞;对细胞破碎,收集包涵体沉淀,洗涤包涵体;用6 mol/L盐酸胍变性重溶包涵体,镍离子亲和层析柱上直接复性及纯化,并用阴离子交换进一步纯化,复性率为75%,纯度达97%.结果显示基因序列与理论序列一致,SDS-PAGE分析结果表明其表达的外源蛋白质分子量与预期的目的蛋白质相对分子量大小相一致,均为35×10~3;Western blotting、MTT活性检测结果表明,此重组hLIF融合蛋白具有良好的抗原性和免疫原性.本研究成功建立了rhLIF原核表达、复性和纯化体系,可为进一步研究LIF生物学活性及产品开发提供试验基础.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
重组人白血病抑制因子论文参考文献
[1].曹顺,杨玉露,徐光华,陈思佳,王天云.重组人白血病抑制因子的原核表达及优化[J].新乡医学院学报.2019
[2].张鹤铭,焦雪苗,甘龙站,田杰伟,田永强.重组人白血病抑制因子的表达、包涵体复性、纯化及其活性[J].应用与环境生物学报.2018
[3].王晓雯,郗雪艳,李小璐,关欣,郭阳.重组人白血病抑制因子在大肠杆菌中的表达及纯化[J].湖北医药学院学报.2017
[4].毛彦娜,徐学聚,白松婷,王飞,卢洁.重组人白血病抑制因子体外诱导人巨核细胞白血病DAMI细胞株凋亡与P73蛋白表达[J].实用儿科临床杂志.2007
[5].毛彦娜.重组人白血病抑制因子、柔红霉素对DAMI细胞株的作用研究[D].郑州大学.2007
[6].杜冰,唐恩洁.小剂量阿糖胞苷与重组人白血病抑制因子联合诱导HL-60细胞凋亡的作用[J].川北医学院学报.2004
[7].杜冰,朱道银,唐恩洁.重组人白血病抑制因子体外诱导HL-60细胞凋亡与bc-l2及p53表达的关系[J].中国临床药理学与治疗学.2004
[8].杜冰,朱道银,唐恩洁.重组人白血病抑制因子对HL-60细胞的作用及机制研究[J].重庆医科大学学报.2003
[9].杜冰.重组人白血病抑制因子、阿糖胞苷对HL-60细胞的作用研究[D].重庆医科大学.2002
[10].王国云,邓晓惠,张慧琴,于红玲,江森.重组人白血病抑制因子对体外移植前鼠胚发育的影响[J].中华妇产科杂志.2002
论文知识图
