腺苷A2AR拮抗剂对中枢炎症性小胶质细胞形态和功能的影响

论文摘要

目的:探讨腺苷A2A受体拮抗剂对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）的治疗作用及其对中枢炎症性小胶质细胞形态和功能的影响。方法:MOG35-55免疫诱导建立EAE模型,EAE小鼠出现神经功能缺损症状后开始腹腔注射腺苷A2AR拮抗剂至发病后第10天。ELISA法检测中枢神经系统内IFN-γ、IL-17、TGF-β、IL-10的表达情况,免疫荧光双重染色法检测小胶质细胞内M1型细胞标志物诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和M2型细胞标志物精氨酸酶I（ArgI）的合成情况。离体培养BV-2小胶质细胞,LPS诱导的小胶质细胞炎症反应,并予A2AR拮抗剂干预,Real-time PCR和ELISA法检测M1型和M2型细胞相关的细胞因子RNA表达水平和分泌水平。Western Blot法检测各组小胶质细胞内M1型和M2型细胞标志物的表达量。结果:腺苷A2AR拮抗剂能有效缓解发病后EAE小鼠的神经功能缺损症状,降低IFN-γ的分泌水平,使M1型细胞相关的iNOS合成减少,M2型细胞相关的ArgI合成增多。腺苷A2AR拮抗剂能减少LPS刺激后BV-2小胶质细胞M1型细胞相关的细胞因子IL-1β的mRNA表达量和分泌量,对M2型细胞相关的细胞因子及蛋白无显著影响。结论:腺苷A2AR拮抗剂对发病后的EAE小鼠有肯定的治疗作用,其机制可能与改变中枢炎症过程中小胶质细胞的表型（M1/M2转换）改变（形态和功能）有关。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验动物
•   1.2 主要试剂
•   1.3 实验仪器
•   1.4 实验细胞
•   1.5 动物造模、分组及行为学评分
•   1.6 免疫荧光双重染色法检测EAE小鼠脊髓内小胶质细胞/巨噬细胞M1型和M2细胞标志物的合成
•   1.7 BV-2小胶质细胞的培养
•   1.8 BV-2小胶质细胞活化模型的建立
•   1.9 实时荧光定量法（real-time PCR）检测指标
•   1.10 ELISA法检测指标
•   1.11 Western Blot法检测iNOS和ArgⅠ蛋白的表达水平
•   1.12 统计学处理
• 2 结果
•   2.1 EAE小鼠行为学功能变化
•   2.2 EAE小鼠脊髓内细胞因子的表达
•   2.3 EAE小鼠iNOS、ArgⅠ的表达
•   2.4 BV-2小胶质细胞IL-1β、TNF-α 、TGF-β、IL-10 mRNA的表达
•   2.5 A2AR拮抗剂对M1型细胞相关的细胞因子的分泌影响
•   2.6 A2AR拮抗离体BV-2小胶质细胞M1型细胞标志物的影响
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 陈瑜,殷为勇,陈艳艳,朱振国,郑荣远,郑浏璞

关键词: 腺苷受体,实验性自身免疫性脑脊髓炎,小胶质细胞,受体拮抗剂

来源: 中国临床药理学与治疗学 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 神经病学

单位: 温州医科大学附属第一医院康复科,温州医科大学附属第一医院神经内科,温州医科大学附属第一医院麻醉科

基金: 温州市科技局项目(Y20180740),国家自然科学基金项目(81371321)

分类号: R742.9

页码: 1376-1384

总页数: 9

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