导读:本文包含了介导转化论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:杆菌,细胞,甘蓝,蛋白,转基因,山慈菇,肿瘤。
介导转化论文文献综述
李雪莲,李智,黄芊,李瑞晓[1]（2019）在《山慈菇介导VEGF-A血管生成抑制乳腺癌细胞上皮-间质转化的实验研究》一文中研究指出目的探讨山慈菇在乳腺癌细胞内介导血管内皮生长因子A(VEGF-A)相关血管生成抑制乳腺癌上皮-间质转化(EMT)。方法首先通过噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度山慈菇(0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1. 0 g/ml)对乳腺癌细胞MDA-MB-231和4T1增殖活力的影响;然后选取特定浓度山慈菇,通过Transwell试验检测其对乳腺癌细胞转移及侵袭能力的影响,测定人脐静脉上皮细胞(HUVEC)毛细管壁形成以检测山慈菇对细胞血管生成的影响;最后Western blot法检测山慈菇对EMT相关蛋白及血管生成相关分子的表达,进行统计学分析。结果 MTT结果显示,山慈菇在MDA-MB-231和4T1细胞中剂量依赖性抑制细胞增殖,0. 8 g/ml和1. 0 g/ml山慈菇对细胞增殖影响与对照组比较差异有统计学意义(P <0. 05); Transwell检测提示山慈菇可抑制乳腺癌细胞的侵袭,抑制HUVECs细胞血管壁的形成(P <0. 05)。Western blot法证实山慈菇处理乳腺癌细胞后,增加EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平(P <0. 05),并降低N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和锌指转录因子(Snail)的表达水平(P <0. 05);山慈菇处理后血管生成相关分子缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、VEGF-A和血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)的水平显着降低(P <0. 05)。结论山慈菇通过影响VEGF-A相关血管生成从而抑制乳腺癌上皮-间质转化,抑制乳腺癌的侵袭转移。(本文来源于《中国医师杂志》期刊2019年11期）
黄颜众,郭娜,轩慧冬,邢邯[2]（2019）在《农杆菌介导的基因转化及在生产中的作用》一文中研究指出转基因技术的突破打开了分子生物学的大门,为人类破译生物界遗传信息和定向改造生物提供了可能。转基因技术是利用自然界中现实存在的农杆菌侵染植物的现象,加以改造从而演化出来可以被科研实际应用的技术。自转基因技术可以在植物中实际应用以来,转基因植物在农业生产中产生了巨大的效益,降低了农药的施用量,降低了人力成本,改善了作物本身营养物质不均衡的缺点,为人类带来了巨大的效益。其实转基因技术并不可怕,可怕的是人们不能用理性的视角来看待转基因问题。(本文来源于《大豆科技》期刊2019年05期）
曾繁丽,王浩,汪健,汪承刚,陈国户[3]（2019）在《利用农杆菌介导花药遗传转化方法获得乌塌菜转基因植株》一文中研究指出乌塌菜(Brassica campestris L. ssp. chinensis var. rosularis),俗名乌菜、黄心乌、乌青菜等,是白菜亚种的1个变种,主要在江淮流域秋冬季节种植。目前乌塌菜育种仍以常规育种技术为主,基因工程等生物技术育种技术的应用尚未见报道。农杆菌介导的花序浸染法,具有高通量、无需组织培养等优点,已成功应用于多种芸薹属蔬菜中。因此,建立乌塌菜花药遗传转化方法,对其进行遗传改良及功能基因研究具有重要意义。以‘黄心乌’乌塌菜为试材,对影响农杆菌介导花药遗传转化的因素进行优化,包括共培养基中BAP、Acetosyringone和Silwet浓度及pH值、花蕾大小(<2 mm、2～3 mm、3～5 mm、开放的花)与处理方式(未处理、花蕾剥开小口、剥除萼片与花瓣)、侵染方式(涂抹、滴液、浸染),以及共培养天数(0～4 d)等。经过优化后,取3～5 mm未开放的花蕾,完全剥除萼片与花瓣,使其露出花药;农杆菌经共培养基(MS+2.0 mg·L-1 6-BA+40 mg·L-1 As+0.03%Silwet+0.5 g·L-1MES+5%蔗糖,pH 5.8)悬浮后,采用滴液方式进行侵染;侵染后的花蕾经2 d黑暗共培养后,花药GUS瞬时表达率可达到91.59%。取共培养后花蕾开放的花粉,采用人工授粉方式,授于花的柱头上;正常培养获得转基因植株种子。经抗性筛选和分子鉴定,植株转化效率可达到0.59%～1.56%,远高于其它芸薹属蔬菜采用花序浸染法的遗传转化效率。在遗传转化过程中,利用GUS组织化学染色方法和显微镜观察农杆菌侵染花药情况,结果表明,在侵染的花蕾中,GUS基因可在雄蕊的绝大部分花粉粒中表达,但在雌蕊中未发现有表达。利用细胞质雄性不育系(CMS)与其可育系植株进行遗传杂交分析,结果表明,该农杆菌介导花药遗传转化系统中,雄性花药为农杆菌侵染的主要靶标。此外,PCR及Southern杂交分析表明,外源GUS基因已整合至乌塌菜基因组中。利用PCR和GUS组织化学染色对T2代转基因株系的分离比进行统计分析,3个T2代株系的分离比为3︰1,符合孟德尔单显性基因遗传特征。(本文来源于《中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会论文摘要集》期刊2019-10-21）
王欢,付小蕾,毛洪玉,祝朋芳[4]（2019）在《根癌农杆菌介导观赏羽衣甘蓝遗传转化体系优化》一文中研究指出为建立稳定的羽衣甘蓝遗传转化体系,以羽衣甘蓝自交系'Mark 10','W02-7'和'Curly 6'为试材,通过单因子试验,比较羽衣甘蓝子叶、子叶柄、子叶片、下胚轴4种外植体的再生能力,筛选培养基中的适宜激素浓度,优化了羽衣甘蓝不同外植体的再生体系。将播种后6d的子叶于最适再生培养基上进行黑暗预培养,以根瘤农杆菌为介导侵染子叶后,于黑暗条件下进行农杆菌与植物材料的共培养。随后转入含有头孢霉素的抑菌培养基中进行抑菌培养,再将子叶移入含有卡那霉素浓度的筛选培养基中进行抗性芽选择,并提取植物基因组DNA进行目的基因的PCR验证,从而建立高效的羽衣甘蓝遗传转化体系。结果表明:最佳的外植体是羽衣甘蓝的子叶,在培养基MS+6-BA 1.0mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1上,不定芽分化率可达100%;子叶经2～3d预培养,将OD600值为0.3～0.5的携带DFR基因表达载体的农杆菌菌液离心,以50mL MS重悬液重悬,侵染外植体5min,共培养2d;采用头孢霉素300mg·L-1,抑菌培养3d后,采用10mg·L-1卡那霉素进行抗性芽选择。在播种后30～40d共获得了24个抗性芽,以抗性芽的基因组DNA为模板进行PCR扩增,9株呈DFR阳性,显示外源基因已经成功整合到羽衣甘蓝基因组中,平均转化率为37.5%。本研究结果可以为羽衣甘蓝重要性状基因的遗传转化提供依据。(本文来源于《沈阳农业大学学报》期刊2019年05期）
王宁宁,王伟杰,王玉康,曹维,李明[5]（2019）在《农杆菌介导的浸花法转化甘蓝型油菜过程中柱头顶端开裂时期的确定》一文中研究指出农杆菌介导的浸花法(floral-dip)是一种简便、快速、高效、重复性好、稳定性高的非组织培养的遗传转化法,在拟南芥中已得到了广泛的应用,但由于诸多因素的影响,其在油菜中的转化效率受到了很大的制约。以甘蓝型油菜为研究对象,通过对雌蕊柱头开裂时间的研究,发现即将开放的10～15个花苞的柱头是裂开的,此时最有利于农杆菌进入子房室完成转化。对这部分花蕾进行浸花法转化,得到的T_1代种子发芽后通过除草剂筛选获得抗性转基因植株,进一步对这些植株进行PCR验证,其阳性率高达72.7%。该研究能进一步提高农杆菌转化效率,实现甘蓝型油菜更有效的遗传转化。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年18期）
范少鹏,李晓辉,时彩霞,范春霞,叶发刚[6]（2019）在《慢病毒介导BMP-2过表达质粒转染骨髓间充质干细胞联合丝素蛋白支架向成骨细胞转化的实验研究》一文中研究指出目的:探究慢病毒介导BMP-2过表达质粒转染骨髓间充质干细胞联合丝素蛋白支架向成骨细胞转化的作用效果。方法:构建慢病毒BMP-2过表达载体,培养骨髓间充质干细胞,构建细胞核支架的联合培养体系,体外实验利用茜素红染色和碱性磷酸酶染色检测骨髓间充质干细胞的成骨转化。选择10只新西兰大白兔,体重3.2～4.5 kg,平均3.9 kg;年龄(2.89±0.45)岁;使用口腔钻在兔子胫骨钻孔(长度5 mm、宽度2 mm、深度3 mm的锥形胫骨缺损)构建兔子胫骨骨缺损模型,HE染色观察动物模型内骨缺损的修复。实验组造模后植入丝素蛋白支架+转染BMP-2过表达载体骨髓间充质干细胞复合物,阴性对照组造模后植入丝素蛋白支架+未转染骨髓间充质干细胞复合物。结果:实验组(丝素蛋白支架+转染BMP-2过表达载体骨髓间充质干细胞复合物)中支架表面黏附的细胞与对照组(丝素蛋白支架+未转染骨髓间充质干细胞)相比,细胞数明显增多。实验组细胞外基质分泌与对照组相比,支架间细胞外基质含量明显增多。对照组支架表面元素EDX分析显示钙离子含量为0.22%,实验组支架表面元素EDX分析显示钙离子含量为0.86%,可见实验组诱导钙离子形成的能力要比对照组强。钙结节茜素红染色结果显示,对照组肉眼观无明显变化,镜下观察可见少量钙结节点。实验组肉眼观可见明显红色区域染色,镜下观察可见大量钙结节点。碱性磷酸酶染色结果显示,对照组肉眼观无明显变化,镜下观察未见明显变化。实验组肉眼观可见紫色区域染色,镜下观察可见ALP染色呈强阳性。丝素蛋白支架与骨髓间充质干细胞联合培养体系可以对软骨缺损有较好的修复作用,转染BMP-2骨髓间充质干细胞后修复作用明显优于未转染组。HE染色结果显示,对照组炎性细胞减少,支架略有消失。实验组炎性细胞明显减少,支架消失,血管生成。结论:慢病毒介导BMP-2过表达质粒可以促进BMSC向骨细胞的分化作用,并且分泌更多的含Ca2+成分的细胞外基质,从而发挥其促进骨缺损修复的作用。(本文来源于《中国骨伤》期刊2019年09期）
任晓虎,陈志鸿,刘威,罗暖媛,常群群[7]（2019）在《Cr（Ⅵ）诱导16HBE细胞恶性转化中SET介导组蛋白修饰调控53BP1的研究》一文中研究指出目的建立六价铬Cr(Ⅵ)诱导16HBE细胞恶性转化后蛋白质差异表达谱与组蛋白修饰谱,进一步分析关键差异蛋白SET介导组蛋白修饰调控53BP1在该过程中的作用,为研究Cr(Ⅵ)致癌的分子机制提供新的方向。方法①以Cr(Ⅵ)恶性转化16HBE(16HBE-T)细胞为研究对象,提取细胞总蛋白与组蛋白并酶解为肽段,用Tandem Mass Tag标记总蛋白肽段,组蛋白肽段采用Lable free,利用LC-ESI-MS/MS对肽段进行鉴定及相对定量;Western blot验证差异蛋白SET表达,组蛋白H3K18ac、H3K27ac水平。②染色质免疫共沉淀技术(ChIP)分析53BP1启动子区H3K18ac、H3K27ac修饰水平;si-RNA干扰技术靶向抑制16HBE-T细胞SET后,Western blot检测16HBE-T细胞组蛋白H3K18ac、H3K27ac及53BP1表达水平,流式细胞检测细胞凋亡及周期改变。结果①LC-ESI-MS/MS共鉴定3517个蛋白,对表达差异大于1.5倍或小于0.67倍的蛋白进行分析发现,上调蛋白185个、下调蛋白201个。信号通路与聚类分析发现差异蛋白SET参与组蛋白修饰信号通路与DNA损伤修复过程;LC-ESI-MS/MS鉴定发现组蛋白H2A、H3、H4均存在差异修饰位点;Western blot结果显示,与对照组相比,SET蛋白表达水平上调(P<0.05),H3K18ac、H3K27ac水平下降,差异具有统计学意义(P<0.05),与筛选结果一致。②ChIP结果显示,16HBE-T细胞中53BP1启动子区H3K18ac、H3K27ac水平下降,差异具有统计学意义(P<0.05);si-RNA靶向抑制SET后,组蛋白H3K18ac、H3K27ac和53BP1表达水平上调,差异具有统计学意义(P<0.05);流式细胞结果显示,抑制SET后,细胞凋亡水平增加,细胞G2+S期减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。③Western blot结果显示其他肺癌细胞中SET、H3K18ac、H3K27ac和53BP1表达水平趋势与16HBE-T细胞不一致。结论Cr(Ⅵ)诱导16HBE细胞恶性转化过程中,涉及多个生物学过程与分子功能的蛋白发生改变;SET介导组蛋白H3K18ac、H3K27ac进而调控53BP1的模式可能特异性存在于Cr(Ⅵ)致癌中并发挥重要作用。(本文来源于《中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集》期刊2019-09-17）
Zhang,J,Wang,Y,Fan,C,赵泽亮[8]（2019）在《白细胞介素8/β连环蛋白介导成釉细胞瘤的上皮-间充质转化》一文中研究指出目的:上皮-间充质转化(EMT)在牙发育和肿瘤侵袭中发挥重要作用。作者研究了白细胞介素8(IL-8)对原代培养的成釉细胞瘤细胞(AM-P)和成釉细胞瘤永生化肿瘤细胞(AM-L)的EMT过程的影响及其潜在机制。方法:通过免疫荧光染色和ELISA检测成釉细胞瘤中的IL-8水平。用IL-8刺激AM-P细胞和AM-L细胞,通过Western印迹分析和免疫荧光染色检测EMT转录因子、总β连环蛋白和磷酸化β连环蛋白(本文来源于《中国口腔颌面外科杂志》期刊2019年05期）
陈佳琦,董礼,樊悦,王妮[9]（2019）在《基因枪介导抗逆相关基因转化小麦的研究》一文中研究指出目前,植物结构培养技术、DNA体外重组等技术已经被应用于农作物育种。破生殖隔离这项转基因技术可以利用基因库创建新的条件,同时还能提供新的创造变异技术门径。基于此,分析并研究相关技术,以期为广大研究者提供参考借鉴。(本文来源于《种子科技》期刊2019年08期）
殷玥,孙培,冯维佳,安红德,魏东盛[10]（2019）在《褐腐菌Postia placenta SB-12菌株农杆菌介导的转化系统构建》一文中研究指出将褐腐菌Postia placenta单核体菌株SB-12的菌丝与带有双元载体的两种农杆菌菌株LBA4404和EHA105共培养,并评估双元载体上驱动抗性基因表达的不同启动子的影响,完成了转化体系的构建和优化.结果表明:两种共培养方法中,用6 d菌龄的菌丝形成的菌丝垫能够被农杆菌有效转化获得转化子.无论采用哪种双元载体,EHA105菌株都比LBA4404更有效地转化菌丝体.用来自受体菌叁磷酸甘油醛脱氢酶基因的启动子获得了比其他两种启动子(CaMV35S和trpC)更高的转化效率.这是国际上首次报道该菌株转化体系的构建,为对该菌株进行遗传操作打下了基础.(本文来源于《南开大学学报(自然科学版)》期刊2019年04期）
介导转化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
转基因技术的突破打开了分子生物学的大门,为人类破译生物界遗传信息和定向改造生物提供了可能。转基因技术是利用自然界中现实存在的农杆菌侵染植物的现象,加以改造从而演化出来可以被科研实际应用的技术。自转基因技术可以在植物中实际应用以来,转基因植物在农业生产中产生了巨大的效益,降低了农药的施用量,降低了人力成本,改善了作物本身营养物质不均衡的缺点,为人类带来了巨大的效益。其实转基因技术并不可怕,可怕的是人们不能用理性的视角来看待转基因问题。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
介导转化论文参考文献
[1].李雪莲,李智,黄芊,李瑞晓.山慈菇介导VEGF-A血管生成抑制乳腺癌细胞上皮-间质转化的实验研究[J].中国医师杂志.2019
[2].黄颜众,郭娜,轩慧冬,邢邯.农杆菌介导的基因转化及在生产中的作用[J].大豆科技.2019
[3].曾繁丽,王浩,汪健,汪承刚,陈国户.利用农杆菌介导花药遗传转化方法获得乌塌菜转基因植株[C].中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会论文摘要集.2019
[4].王欢,付小蕾,毛洪玉,祝朋芳.根癌农杆菌介导观赏羽衣甘蓝遗传转化体系优化[J].沈阳农业大学学报.2019
[5].王宁宁,王伟杰,王玉康,曹维,李明.农杆菌介导的浸花法转化甘蓝型油菜过程中柱头顶端开裂时期的确定[J].江苏农业科学.2019
[6].范少鹏,李晓辉,时彩霞,范春霞,叶发刚.慢病毒介导BMP-2过表达质粒转染骨髓间充质干细胞联合丝素蛋白支架向成骨细胞转化的实验研究[J].中国骨伤.2019
[7].任晓虎,陈志鸿,刘威,罗暖媛,常群群.Cr（Ⅵ）诱导16HBE细胞恶性转化中SET介导组蛋白修饰调控53BP1的研究[C].中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集.2019
[8].Zhang,J,Wang,Y,Fan,C,赵泽亮.白细胞介素8/β连环蛋白介导成釉细胞瘤的上皮-间充质转化[J].中国口腔颌面外科杂志.2019
[9].陈佳琦,董礼,樊悦,王妮.基因枪介导抗逆相关基因转化小麦的研究[J].种子科技.2019
[10].殷玥,孙培,冯维佳,安红德,魏东盛.褐腐菌PostiaplacentaSB-12菌株农杆菌介导的转化系统构建[J].南开大学学报(自然科学版).2019
论文知识图
