导读:本文包含了皱褶假丝酵母论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:皱褶假丝酵母脂肪酶,毕赤酵母,蛋白纯化,酶学性质
皱褶假丝酵母论文文献综述
郝月绰,林影,梁书利[1]（2018）在《皱褶假丝酵母脂肪酶CRL1在毕赤酵母中的高效表达及其催化合成维生素E醋酸酯》一文中研究指出本研究将经密码子优化的皱褶假丝酵母脂肪酶(Candida rugosa lipase) CRL1基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pHKA,构建得到重组菌株GS115/pHKA-CRL1;经摇瓶发酵并结合甲醇诱导120 h处理,该菌株对底物对硝基苯酚丁酯(p NPB)的水解活力达到39.73 U/mL。通过对AOX1启动子和α分泌信号肽同时进行改造,进一步获得重组菌株GS115/pHKA-AOX1m/αm-CRL1,其脂肪酶活力提高达到63.63 U/mL。发酵液上清液经超滤浓缩、硫酸铵沉淀后,再经脱盐和阴离子交换层析处理,获得纯化的重组CRL1。该纯化工艺的纯化倍数为5.41倍,回收率为33.81%。而纯化重组CRL1的比酶活为984.5U/mg。重组CRL1的最适温度为40℃,最适pH为7.5;经40℃保温6 h,仍保留52.99%的相对活力;在偏酸性环境中较为稳定。以摇瓶发酵、真空冷冻干燥后的重组CRL1为催化剂,在无溶剂体系中催化合成维生素E醋酸酯,在最适反应条件下(200 mg D-α-生育酚、1 mL乙酸酐、100 mg CRL1、反应温度60℃、转速200 r/min、反应时间9 h),D-α-生育酚的转化率在97.00%以上。(本文来源于《现代食品科技》期刊2018年10期）
郝月绰[2]（2018）在《皱褶假丝酵母脂肪酶CRL1在毕赤酵母的高效表达及催化合成维生素E醋酸酯》一文中研究指出皱褶假丝酵母脂肪酶(Candida rugosa lipase,CRL)被认为是一种多才多艺、很有前景的生物催化剂,在制药、食品、化妆品、能源等领域具有广泛的应用。CRL商品酶主要由野生型菌株ATCC 14830和Type VII生产,目前已知由8种同工酶组成,其中CRL1具有最高的表达量和酶活力。不同商品酶之间由于同工酶的成分和比例不同,在底物选择性和催化效率上表现出显着差异。分离或生产单一的皱褶假丝酵母脂肪酶,尤其是CRL1,对开展进一步研究工作具有重要意义。毕赤酵母是目前应用最为广泛的外源蛋白表达系统,有利于外源蛋白的高效表达和工业生产。毕赤酵母表面展示体系是一种经济有效的酶固定化手段,可以有效提高酶的稳定性和重复利用效果、降低生产成本。本文以毕赤酵母为宿主细胞,分别构建皱褶假丝酵母脂肪酶CRL1的高效分泌表达和高效表面展示重组菌株,发酵生产脂肪酶催化剂。在此基础上,研究了两种类型重组CRL1的酶学性质,然后建立并优化了无溶剂体系中CRL1催化合成维生素E醋酸酯的绿色制备工艺体系,为其大规模工业化应用奠定了基础。本文的主要研究内容和结果如下:(1)将经密码子优化的CRL1基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pHKA,构建重组菌株GS115/pHKA-CRL1,经摇瓶发酵、甲醇诱导120 h,对底物对硝基苯酚丁酯的水解活力达到39.73 U/mL。通过对AOX1启动子和α分泌信号肽同时进行改造,获得重组菌株GS115/pHKA-AOX1m/αm-CRL1,脂肪酶活力提高60.18%,达到63.63 U/m L。发酵液上清液经过超滤浓缩、硫酸铵沉淀后脱盐和阴离子交换层析,获得纯化后的重组CRL1:比酶活为984.52 U/mg,纯化倍数5.41倍,回收率33.81%。重组CRL1的最适温度为40℃,最适pH为7.5;热稳定性和pH稳定性较差。经3 L补料分批发酵验证,高表达分泌型重组菌株的脂肪酶活力可达到910 U/mL,相对摇瓶水平提高13倍左右。(2)以改造后絮凝素Flo1p的N端絮凝功能域FS为锚定蛋白,首次实现了皱褶假丝酵母脂肪酶CRL1在毕赤酵母细胞的高效表面展示。在提高基因剂量的基础上,过表达内质网折迭促进因子HAC1,筛选到一株酵母重组菌株GS115/pKZA-5FSCRL1-HAC1,摇瓶发酵水平脂肪酶活力达到19,800 U/g,相对单拷贝菌株GS115/pKFS-CRL1提高164%,为目前已知酵母展示脂肪酶中水解活力最高水平。流式细胞仪检测结果证明CRL1成功展示在毕赤酵母细胞表面,定量分析结果表明CRL1在毕赤酵母细胞表面的展示效率在90%以上。表面展示CRL1的最适温度为50℃、最适pH为8.5;同时热稳定性和pH稳定性较游离酶均有明显高。同时研究了金属离子、金属螯合剂、表面活性剂和有机溶剂对表面展示CRL1酶活力的影响。此外,高表达表面展示重组菌株在3 L补料分批发酵中的水解活力为18,800 U/g,与摇瓶发酵水平相当。(3)以毕赤酵母重组表达CRL1为催化剂,建立了无溶剂体系中微生物酶法催化合成维生素E醋酸酯的绿色制造工艺方法。最适反应条件为:200 mg D-α-生育酚、1 m L乙酸酐、100 mg CRL1、反应温度60℃、转速200 rpm、反应时间9 h,D-α-生育酚的转化率在97.00%以上。反应混合物经碳酸钠中和、抽滤、正己烷洗涤和减压蒸馏等纯化步骤,收获维生素E醋酸酯产品:外观呈浅黄色油状,纯度为96.50%(HPLC)、初步达到QB2483-2000标准(>96.0%)。维生素E醋酸酯产品经过FTIR和GC-MS检测得到进一步表征和确认。(本文来源于《华南理工大学》期刊2018-04-12）
杜焕梅,缪铭,冯骉,江波,张涛[3]（2018）在《超高压体系下皱褶假丝酵母脂肪酶的水解特性》一文中研究指出研究了压力、温度、pH、保压时间对脂肪酶活性的影响,并分析了酶的复原性,测定了不同温度和压力处理脂肪酶的动力学参数。结果表明,200 MPa时脂肪酶酶活最高,是常压的1.76倍。200 MPa时脂肪酶最适温度为40℃,最适pH值7.5,最佳保压时间为10 min。与常压相比,200 MPa时,40℃时K_m值变化不大,50℃时K_m值有所增加,而V_(max)、K_(cat)、K_(cat)/K_m值随压力的升高而增大。(本文来源于《食品与生物技术学报》期刊2018年03期）
陈苑[4]（2016）在《皱褶假丝酵母（Candida rugosa）脂肪酶LIP1的热稳定性改造》一文中研究指出褶皱假丝酵母脂肪酶LIP1(Candida Rugosa Lipase 1,CRL1)是一个兼具水解、转酯、酯化等活力的多功能脂肪酶,同时还拥有着与其他七种同工酶相比更高的表达量,因此现已被广泛地应用于生物医药(手性拆分)、食品、生物柴油等多个领域中。但CRL1作为一种常温酶,热稳定性欠佳,这一不足严重制约了其在工业条件下更进一步的应用。为此,本研究采用多种计算机辅助的理性设计方法,结合定点突变技术对CRL1进行热稳定性改造,筛选获得热稳定性改良且具有更强工业适应性的脂肪酶催化剂。主要的研究工作及结果摘要如下:1、以全基因序列密码子优化后的CRL1基因为原初基因,构建N端含有6×Histag的毕赤酵母表达载体pPICZα-N6×His-CRL1,并电转至毕赤酵母GS115中实现分泌表达。随后,镍柱纯化诱导表达的目的蛋白CRL1,并对纯化后的重组脂肪酶CRL1进行了相关酶学性质表征,为后续重要参数的测定及突变体蛋白的筛选研究奠定基础。结果表明重组CRL1的最适温度为40°C,50°C下的半衰期仅为4 min,最适pH与最适底物分别为pH 8.5和对硝基苯酚丁酸酯(C4)。2、综合运用Fold X、Rosetta ddG of mutation和I-Mutant 2.0这叁种计算机辅助设计软件进行理性设计,同时对CRL1的活性中心进行分析、筛选,排除会影响CRL1催化特性的功能位点,最终获得13个可以潜在提高重组CRL1热稳定性的突变位点。3、分别构建并表达上述13种CRL1的热稳定突变子,通过对比研究13个突变酶与原初重组酶相应的Tm值,从中筛选获得一株热稳定性显着提高的突变子D457F,其Tm值较原初重组酶CRL1提高了9.4°C。通过对D457F突变子进行其他热稳定性相关酶学性质的测定,发现该突变体蛋白最适温度与50°C下的半衰期较重组CRL1分别提高了10°C和6.5倍,但酶的比活力相差不大,表明457号位点氨基酸残基的替换对酶蛋白的活性影响较小。4、已知α-螺旋是蛋白质二级结构中最为稳定的一种结构,其稳定性在一定程度上影响着整个蛋白质的稳定性。通过SWISS-MODEL的同源建模功能对D457F突变子进行空间结构的预测,发现突变体蛋白中457号位点所在的α-螺旋空间结构延长,同时疏水性氨基酸的引入加强了该螺旋内部的疏水作用,使得α-螺旋变得更为稳定。此外,芳香族氨基酸Phe的引入使得其庞大的侧链恰好填充了Asp由于侧链基团短小而留下的空隙,增强了结构上的刚性从而稳定了蛋白质的结构。(本文来源于《华中科技大学》期刊2016-05-01）
朱振南,徐莉,张后今,闫云君[5]（2013）在《响应面法优化皱褶假丝酵母脂肪酶催化合成甾醇共轭亚油酸酯》一文中研究指出以皱褶假丝酵母(Candida rugosa)脂肪酶为催化剂,在正己烷体系中催化植物甾醇与共轭亚油酸合成甾醇共轭亚油酸酯。以植物甾醇酯化率为考察指标,通过单因素实验和响应面实验确定最佳工艺参数为:酸醇摩尔比6∶1,反应温度40℃,酶用量9.6%(占底物质量),反应时间87 h。在此条件下,酯化率达97.5%。(本文来源于《中国油脂》期刊2013年07期）
陈贵佺,郑二丽[6]（2013）在《皱褶假丝酵母脂肪酶催化合成VE阿魏酸酯的研究》一文中研究指出本文研究了反胶束体系中利用褶皱假丝酵母脂肪酶催化维生素E和阿魏酸乙酯合成维生素E阿魏酸酯的反应。通过单因素试验利用褶皱假丝酵母脂肪酶在AOT-异辛烷-水反胶束体系中催化阿魏酸乙酯和维生素E反应136 h生成VE阿魏酸酯,并研究了含水率、转速、温度、缓冲液pH值、AOT的浓度等反应条件对VE阿魏酸酯合成的影响。通过均匀设计法设计实验,并对结果进行二次多项式逐步回归分析,得到一组最优合成的反应条件,即含水率10、AOT浓度80 mmol/L、缓冲液pH值5.0、温度25℃、转速270 rpm,VE阿魏酸酯的得率为15.36%。(本文来源于《现代食品科技》期刊2013年02期）
肖潇[7]（2013）在《皱褶假丝酵母脂肪酶LIP1在毕赤酵母中的高效表达与高密度发酵研究》一文中研究指出皱褶假丝酵母脂肪酶(Candida rugosa lipases，CRLs)是工业生产中应用最为广泛的脂肪酶之一，其八种同工酶性质各异。在原始的C. rugosa菌株中，脂肪酶LIP1相对其他同工酶有更高的表达量，并且具有较高的水解、转酯和酯化活力。但原始菌株的表达量难以满足实际需要。利用基因工程技术实现其异源高效表达，对该酶的工业化生产具有重要意义。本文以皱褶假丝酵母菌株(ATCC1480)脂肪酶基因lip1为对象，为在毕赤酵母中表达有活性的CRLLIP1蛋白，将lip1脂肪酶基因中19个非通用丝氨酸密码子进行改造，并利用多种策略提高CRLLIP1的表达量，实现了异源高效表达。同时，优化重组菌株的摇瓶发酵条件，考察了重组脂肪酶CRLLIP1的酶学性质。本文的主要工作和结果如下：1.采用PCR-based accurate synthesis法合成lip1基因，并将其中19个编码丝氨酸的密码子CTG改造为TCT。以合成的基因为基础构建诱导分泌型表达载体pPIC9Klip1，电转入Pichia pastoris GS115菌株，筛选到一株酶活力最高的重组菌株GS115/9Klip1139~#，酶活为365U/mL。对该菌株单因子摇瓶发酵条件进行了优化，摇瓶发酵初始pH为7.5，接种量4.0%(v/v)，摇瓶装液量为40mL，每隔24h补加1.0%(v/v)的甲醇，诱导96h，测定的脂肪酶活力最高为435U/mL。同时，对重组CRLLIP1进行了酶学性质分析。结果表明，CRLLIP1的最适反应温度和pH分别为40°C和8.0，40°C温浴4h后，还保留有59%的酶活力，最适底物为对硝基苯酚癸酸酯(C10)，与原始菌株一致。2.构建表达载体pGAPlip1和pFZlip1；克隆含有编码VHb蛋白基因片段5’AOXVgb3’AOXTT，并成功构建重组表达载体pGAPvgb-lip1和pFZvgb-lip1。将pGAPlip1、pFZlip1、pGAPvgb-lip1和pFZvgb-lip1二次电转入GS115/9Klip1139~#，分别构建两种不同类型的双启动子重组菌株和两种启动子表达CRLLIP1且胞内共表达VHb的重组工程菌株。摇瓶发酵筛选得到GS115/9Klip1GAPlip120~#、GS115/9Klip1FZlip139~#、GS115/9Klip1GAPvgb-lip171~#和GS115/9Klip1FZvgb-lip11~#四株高产脂肪酶菌株，酶活力分别为437U/mL、450U/mL、512U/mL和620U/mL，分别是GS115/9Klip1139~#酶活力的1.19、1.23、1.40和1.69倍。3.以FM22盐培养基为发酵培养基，甲醇/山梨醇(1:1，v/v)混合物作为诱导期的碳源对GS115/9Klip1139~#、GS115/9Klip1GAPlip120~#、GS115/9Klip1FZlip139~#、GS115/9Klip1GAPvgb-lip171~#和GS115/9Klip1FZvgb-lip11~#五种重组菌株进行10-L发酵罐高密度发酵。其中，GS115/9Klip1FZvgb-lip11~#在130.7h时，酶活力达到7,490U/mL，总蛋白含量为4.80g/L，细胞湿重为413.3g/L。GS115/9Klip1GAPlip120~#(5,100U/mL)、 GS115/9Klip1FZlip139~#(4,100U/mL)、GS115/9Klip1GAPvgb-lip171~#(6,250U/mL)和GS115/9Klip1FZvgb-lip11~#发酵上清液酶活力分别是GS115/9Klip1139~#酶活力(2,820U/mL)的1.81、1.45、2.21和2.65倍。将重组工程菌株分泌的约64KDa蛋白在MALDT-TOP-TOP中检测得到的质谱结果与蛋白质结果在NCBI数据库中比对，鉴定重组工程菌株表达的蛋白为CRLLIP1。(本文来源于《华中科技大学》期刊2013-01-01）
王殊睿,刘双凤,师慧,王帅坤,王振伟[8]（2012）在《皱褶假丝酵母脂蛋白脂酶的分离纯化及酶学性质的研究》一文中研究指出目的从皱褶假丝酵母的发酵液中纯化脂蛋白脂酶,并对其酶学性质进行研究。方法利用硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose Fast Flow和Phenyl Sepharose CL-4B层析等方法进行纯化,利用SDS-PAGE、PAGE和HPLC法进行鉴定。结果获得的脂蛋白脂酶为单一组分,相对分子质量为34 kDa;此酶在50℃、pH6～9时保持稳定;在最适条件下测得其米氏常数(Km)为3.4×10-4mol·L-1;用等电点沉淀法测得脂蛋白脂酶的pI=5.5;Hg+、Cu2+、Ag+和SDS是脂蛋白脂酶的抑制剂,Mg2+和Triton X-100对此酶有激活作用。结论文中方法获得了皱褶假丝酵母脂蛋白脂酶的酶学性质,对此酶在食品、医药和生物技术等领域的应用提供了理论支持。(本文来源于《华西药学杂志》期刊2012年04期）
赵兴秀,何义国,邓静,吴华昌,孟延发[9]（2011）在《皱褶假丝酵母Candida rugosa产脂蛋白酯酶的发酵培养基优化》一文中研究指出将筛选得到的产脂蛋白酯酶的皱褶假丝酵母进行了底物诱导和发酵培养基的优化,确定了其最适培养基配方:橄榄油0.6%,蛋白胨0.5%,酵母膏0.3%,麦芽浸膏0.3%,Tween-80 0.1%,K2HPO4 0.05%,Na2HPO4 0.1%,MgSO4.7H2O 0.1%。在最适培养基中培养,脂蛋白酯酶的酶活力可达121.65U/L,比未优化前提高了80倍。(本文来源于《食品与发酵科技》期刊2011年04期）
赵兴秀,何义国,方春玉,邓静,孟延发[10]（2010）在《皱褶假丝酵母产脂蛋白酯酶的发酵条件优化及性质研究》一文中研究指出皱褶假丝酵母经发酵培养可合成分泌脂蛋白酯酶,对该菌种进行了发酵条件的优化,其最适培养基条件为:pH值6.0,250mL叁角瓶中装量25mL,所接菌种种龄为24h,接种量为10%,摇床转速为200r/min,28℃培养27h。酶学性质研究结果表明,该酶的最适温度为45℃,最适pH值为7.5。(本文来源于《中国酿造》期刊2010年11期）
皱褶假丝酵母论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
皱褶假丝酵母脂肪酶(Candida rugosa lipase,CRL)被认为是一种多才多艺、很有前景的生物催化剂,在制药、食品、化妆品、能源等领域具有广泛的应用。CRL商品酶主要由野生型菌株ATCC 14830和Type VII生产,目前已知由8种同工酶组成,其中CRL1具有最高的表达量和酶活力。不同商品酶之间由于同工酶的成分和比例不同,在底物选择性和催化效率上表现出显着差异。分离或生产单一的皱褶假丝酵母脂肪酶,尤其是CRL1,对开展进一步研究工作具有重要意义。毕赤酵母是目前应用最为广泛的外源蛋白表达系统,有利于外源蛋白的高效表达和工业生产。毕赤酵母表面展示体系是一种经济有效的酶固定化手段,可以有效提高酶的稳定性和重复利用效果、降低生产成本。本文以毕赤酵母为宿主细胞,分别构建皱褶假丝酵母脂肪酶CRL1的高效分泌表达和高效表面展示重组菌株,发酵生产脂肪酶催化剂。在此基础上,研究了两种类型重组CRL1的酶学性质,然后建立并优化了无溶剂体系中CRL1催化合成维生素E醋酸酯的绿色制备工艺体系,为其大规模工业化应用奠定了基础。本文的主要研究内容和结果如下:(1)将经密码子优化的CRL1基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pHKA,构建重组菌株GS115/pHKA-CRL1,经摇瓶发酵、甲醇诱导120 h,对底物对硝基苯酚丁酯的水解活力达到39.73 U/mL。通过对AOX1启动子和α分泌信号肽同时进行改造,获得重组菌株GS115/pHKA-AOX1m/αm-CRL1,脂肪酶活力提高60.18%,达到63.63 U/m L。发酵液上清液经过超滤浓缩、硫酸铵沉淀后脱盐和阴离子交换层析,获得纯化后的重组CRL1:比酶活为984.52 U/mg,纯化倍数5.41倍,回收率33.81%。重组CRL1的最适温度为40℃,最适pH为7.5;热稳定性和pH稳定性较差。经3 L补料分批发酵验证,高表达分泌型重组菌株的脂肪酶活力可达到910 U/mL,相对摇瓶水平提高13倍左右。(2)以改造后絮凝素Flo1p的N端絮凝功能域FS为锚定蛋白,首次实现了皱褶假丝酵母脂肪酶CRL1在毕赤酵母细胞的高效表面展示。在提高基因剂量的基础上,过表达内质网折迭促进因子HAC1,筛选到一株酵母重组菌株GS115/pKZA-5FSCRL1-HAC1,摇瓶发酵水平脂肪酶活力达到19,800 U/g,相对单拷贝菌株GS115/pKFS-CRL1提高164%,为目前已知酵母展示脂肪酶中水解活力最高水平。流式细胞仪检测结果证明CRL1成功展示在毕赤酵母细胞表面,定量分析结果表明CRL1在毕赤酵母细胞表面的展示效率在90%以上。表面展示CRL1的最适温度为50℃、最适pH为8.5;同时热稳定性和pH稳定性较游离酶均有明显高。同时研究了金属离子、金属螯合剂、表面活性剂和有机溶剂对表面展示CRL1酶活力的影响。此外,高表达表面展示重组菌株在3 L补料分批发酵中的水解活力为18,800 U/g,与摇瓶发酵水平相当。(3)以毕赤酵母重组表达CRL1为催化剂,建立了无溶剂体系中微生物酶法催化合成维生素E醋酸酯的绿色制造工艺方法。最适反应条件为:200 mg D-α-生育酚、1 m L乙酸酐、100 mg CRL1、反应温度60℃、转速200 rpm、反应时间9 h,D-α-生育酚的转化率在97.00%以上。反应混合物经碳酸钠中和、抽滤、正己烷洗涤和减压蒸馏等纯化步骤,收获维生素E醋酸酯产品:外观呈浅黄色油状,纯度为96.50%(HPLC)、初步达到QB2483-2000标准(>96.0%)。维生素E醋酸酯产品经过FTIR和GC-MS检测得到进一步表征和确认。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
皱褶假丝酵母论文参考文献
[1].郝月绰,林影,梁书利.皱褶假丝酵母脂肪酶CRL1在毕赤酵母中的高效表达及其催化合成维生素E醋酸酯[J].现代食品科技.2018
[2].郝月绰.皱褶假丝酵母脂肪酶CRL1在毕赤酵母的高效表达及催化合成维生素E醋酸酯[D].华南理工大学.2018
[3].杜焕梅,缪铭,冯骉,江波,张涛.超高压体系下皱褶假丝酵母脂肪酶的水解特性[J].食品与生物技术学报.2018
[4].陈苑.皱褶假丝酵母（Candidarugosa）脂肪酶LIP1的热稳定性改造[D].华中科技大学.2016
[5].朱振南,徐莉,张后今,闫云君.响应面法优化皱褶假丝酵母脂肪酶催化合成甾醇共轭亚油酸酯[J].中国油脂.2013
[6].陈贵佺,郑二丽.皱褶假丝酵母脂肪酶催化合成VE阿魏酸酯的研究[J].现代食品科技.2013
[7].肖潇.皱褶假丝酵母脂肪酶LIP1在毕赤酵母中的高效表达与高密度发酵研究[D].华中科技大学.2013
[8].王殊睿,刘双凤,师慧,王帅坤,王振伟.皱褶假丝酵母脂蛋白脂酶的分离纯化及酶学性质的研究[J].华西药学杂志.2012
[9].赵兴秀,何义国,邓静,吴华昌,孟延发.皱褶假丝酵母Candidarugosa产脂蛋白酯酶的发酵培养基优化[J].食品与发酵科技.2011
[10].赵兴秀,何义国,方春玉,邓静,孟延发.皱褶假丝酵母产脂蛋白酯酶的发酵条件优化及性质研究[J].中国酿造.2010