导读:本文包含了人血管抑素论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:血管,细胞,内皮,基因工程,载体,活性,的人。
人血管抑素论文文献综述
应长江,林红晓,李伟[1]（2013）在《重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素对1型糖尿病大鼠肾脏TGF-β_1和VEGF表达的影响》一文中研究指出目的尾静脉注射重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素(rAAV-AS),研究rAAV-AS在1型糖尿病大鼠肾脏中表达以及其对转化生长因子(TGF-β)1和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法清洁级SD雄性大鼠随机分为正常组(NC组,n=10),其余大鼠使用链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg腹腔注射诱导糖尿病模型,分为糖尿病组(DM组,n=10),重组腺相关病毒空载体组(rAAV-0组,n=10),重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素组(AS组,n=10,2×1012VG/kg);尾静脉注射给药,8 w末,检测各组大鼠尿微量白蛋白变化,免疫印迹法检测肾组织中AS的表达以及TGF-β1和VEGF的表达。结果 DN组基本不表达AS,给予rAAV-AS治疗后,大鼠肾组织中AS表达明显增多(P<0.05);DN组的MAU、Glu、HbA1c明显增高,给予rAAV-AS治疗后,MAU明显降低(P<0.05);光镜:与NC组大鼠相比,DN组病变较明显:肾小球细胞数显着增多,毛细血管袢塌陷,管腔闭塞,肾小球明显体积增大,肾小球基底膜增厚、淋巴细胞数量增多,肾小管肿胀、变性、空泡形成,肾间质可见大量淋巴细胞和单核巨噬细胞浸润。rAAV-0组较DN组未见改善,AS组上述病变较DN组有改善,可见肾小球细胞数教多,毛细血管腔轻度狭窄,肾小管-间质见少量淋巴细胞浸润。免疫组化结果:DN组的TGF-β1和VEGF表达明显增多,rAAV-AS治疗后,TGF-β1和VEGF表达减少(P<0.05)。结论重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素能在一定时间内在肾组织中表达;重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素对大鼠糖尿病肾病具有保护作用,且这种保护作用可能通过降低TGF-β1和VEGF的表达。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2013年12期）
罗芸,薛毅珑,赵卉[2]（2012）在《微囊化人血管抑素基因工程细胞对人脐静脉内皮细胞增殖的影响》一文中研究指出目的了解海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠(alginate-polylysine-alginate,APA)微囊化人血管抑素基因工程细胞对人脐静脉内皮细胞(Huecv304)增殖的影响。方法采用APA制备微囊包裹的表达人血管抑素(human angiostatin,hAS)的基因工程细胞(APA-hAS/293细胞微囊)或空载体转染的基因工程细胞(APA-0/293细胞微囊)。分别将上述两种细胞微囊以不同浓度与人脐静脉内皮细胞Huecv304细胞共培养,于培养0、24、48及72h时,以MTT法测定Huecv304细胞的增殖情况。结果 APA-hAS/293细胞微囊对共培养的Huecv304细胞的增殖具有明显的抑制作用(P<0.01),且具有良好的量效关系。而对照组APA-0/293细胞微囊对Huecv304细胞的增殖无明显抑制作用。结论体外培养的表达人血管抑素基因的工程细胞的分泌物可以通过微囊膜并对人脐静脉内皮细胞的增殖产生显着的抑制效应。(本文来源于《医学研究杂志》期刊2012年05期）
李壮林,姚雪静,原桂勇[3]（2011）在《人血管抑素Kringles 1-3的表达纯化及生物学活性研究》一文中研究指出人血管抑素包含了4个环饼状结构域(Kringle),是一个有效的血管生成抑制因子。采用PCR方法从人胚肝cDNA文库中扩增了人血管抑素Kringles1-3的基因,重组于pPIC9K载体中,获得重组载体pPIC9K-K1-3,然后转化毕赤酵母细胞GS115,获得重组菌株。K1-3蛋白在5 L发酵罐的表达量达41.2 mg/L,发酵液上清经过浓缩、透析,然后用Lysine Sepharose 4B层析柱纯化,得到的K1-3蛋白纯度大于98%,纯化回收率达到95%以上。K1-3能明显抑制bFGF刺激的人微血管内皮细胞的迁移,达到抑制效果为50%时所需的蛋白浓度(IC50)为1.86μg/ml。K1-3也能抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管的生长,抑制率达95%。为应用人血管抑素Kringles1-3治疗肿瘤奠定了初步实验基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2011年01期）
杨炳华,何杨,赵益明,金坚[4]（2010）在《重组人血管抑素的生物学活性研究》一文中研究指出目的通过培养人微血管内皮细胞(HMEC-1)及建立鸡胚尿囊膜模型(CAM)观察重组人血管抑素(rhAS)的生物学活性。方法将不同浓度的rhAS加入含HMEC-1的培养瓶中,培养48h后,用MTT法检测其对细胞的抑制率;用乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性测定检测rhAS诱导HMEC-1凋亡的作用;用CAM模型检测rhAS对血管的抑制作用。结果 rhAS在体外可显着抑制HMEC-1细胞的增殖;在体内则可明显抑制CAM上血管的生成。通过AchE活性测定,发现rhAS既可抑制HMEC-1细胞的增殖,也可诱导HMEC-1细胞凋亡,其作用的不同与rhAS剂量相关。结论 rhAS是一个较有前景的抗肿瘤血管药物。(本文来源于《苏州大学学报(医学版)》期刊2010年04期）
李伟,应长江,林红晓[5]（2009）在《不同剂量的重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素对糖尿病肾病大鼠肾功能的影响》一文中研究指出目的探讨不同剂量的重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素(recombinant adeno-associated viruscarrying human angiostatin gene,rAAV-AS)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾功能的影响。方法60只清洁级雄性SD大鼠随机抽取10只作为正常对照组(NC组),其余造模为糖尿病大鼠。大鼠空腹12 h腹腔注射链尿佐菌素(STZ)60 mg/kg,72 h后尾静脉测血糖大于16.7 mmol/L记为造模成功,适应性喂养1周后,把糖尿病大鼠随机分为DN组(n=10),rAAV-0组(n=10),AS1组(n=10,1×1012VG/kg),AS2组(n=10,2×1012VG/kg),AS3组(n=10,4×1012VG/kg)。AS1组、AS2组和AS3组3组大鼠尾静脉注射rAAV-AS,NC组和DN组分别注射同等剂量的生理盐水,rAAV-0组注射同等剂量rAAV-0空载体;从第2周起,整个实验过程共持续8周。8周后检测各组大鼠的体重(body weight,BW)、肾重(kidney weight,KW),计算肾指数(kidney in-dex,KI),检测血糖(blood glucose,BG)、糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(serum creatinine,SCr)、尿微量白蛋白(miscroalbunminuria,MAU)。结果与NC组相比,DN、rAAV-0、AS1组的KI、MAU、BUN、SCr、BG、HbA1c明显增高(P<0.05);与DN组相比,AS2组和AS3组KI、MAU、BUN、SCr明显降低(P<0.05);与rAAV-0组相比,AS2组和AS3组KI、MAU、BUN、SCr降低(P<0.05);与AS1组相比,AS2组和AS3组KI、MAU、BUN、SCr降低(P<0.05)。结论中等剂量和大剂量rAAV-AS对DN大鼠肾脏具有保护作用,且不依赖血糖降低而起作用。(本文来源于《徐州医学院学报》期刊2009年07期）
曾静[6]（2009）在《重组人血管抑素对碱烧伤角膜新生血管作用的实验研究》一文中研究指出背景与目的眼碱烧伤是严重的致盲性眼病,碱烧伤后角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)形成是导致视力下降的主要原因。其病理过程复杂,涉及诸多因素,确切的发病机理尚未完全阐明。CNV的治疗方法较多,但目前的治疗效果仍不太理想,因此研究CNV发病机制和探讨有效的治疗措施,将对防治CNV、防盲、治盲都具有极其重要的现实意义。重组人血管抑素(angiostatin,AS)是近年来发现的血纤溶酶原的裂解片段,其前3个Kringle片段(Kringle 1-3,K1-3)对新生血管有较强的抑制作用,但作用机理尚未完全阐明,亦尚未见其对碱烧伤CNV中炎症细胞浸润、成纤维细胞及IL-1α表达影响的报道。本课题从建立角膜碱烧伤CNV模型着手,探讨AS对碱烧伤CNV的作用,利用免疫组化、ELISA和大鼠白细胞耗竭模型,探讨炎症细胞浸润、白细胞介素-1α(interleukin-1α,IL-1α)以及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等在AS对碱烧伤CNV抑制作用中的作用机制。材料与方法1、30只SD大鼠制作左眼碱烧伤CNV模型,碱烧伤后观察角膜及新生血管动态生长情况,于碱烧伤后6h、1、3、7、14、21天随机取5只大鼠处死,取角膜行组织病理学检查了解碱烧伤后角膜组织学变化及炎症细胞浸润情况,探索合适的CNV模型。2、重组人血管抑素K1-3:灭菌生理盐水无菌操作配制成10μg/ml、20μg/ml滴眼液,4℃冰箱保存备用。3、105只SD大鼠随机取5只作正常对照(不作任何处理,取角膜作正常对照),其余100只制作左眼碱烧伤CNV模型,随机分为4组(每组25只):实验对照组、地塞米松组、K1组、K2组,分别点生理盐水、0.1%地塞米松眼液和10μg/ml、20μg/ml的K1-3滴眼液;于碱烧伤后1、3、7、14、21天每组随机取5只大鼠,测量CNV长度,计算CNV面积,分析K1-3眼液对CNV的作用。随后处死大鼠,取角膜备组织病理学检查、电镜检查、免疫组化和ELISA检测。3、角膜切片HE染色,观察角膜组织学变化,各组碱烧伤后不同时间炎症细胞计数,比较各组角膜组织变化及炎症细胞浸润情况。4、电镜观察碱烧伤后K1-3治疗组与对照组角膜超微结构改变。5、制作大鼠白细胞耗竭模型,角膜碱烧伤,观察白细胞耗竭后角膜炎症细胞浸润及CNV生长情况,分析白细胞在碱烧伤角膜炎症反应及CNV形成中的作用及K1-3对碱烧伤角膜CNV及炎症细胞浸润的作用。6、免疫组化检测4组碱烧伤后不同时间角膜VEGF表达,病理图像分析仪测量平均光密度值(optical density,OD)。CD34标记新生血管,检测各组角膜新生血管密度(microvessel density,MVD)。分析K1-3对碱烧伤角膜VEGF表达及MVD的影响。7、ELISA检测各组角膜IL-1α表达,分析K1-3对碱烧伤角膜IL-1α表达的影响。结果1、成功建立碱烧伤CNV模型,大鼠角膜碱烧伤40s,为较理想的时间。2、碱烧伤后3天对照组出现CNV,碱烧伤后7天生长旺盛,14天达高峰,布满角膜,21天略消退,但仍占据大部分角膜;K1-3治疗组碱烧伤后3天未见明显CNV,7天仅达碱烧伤斑边缘,14天仅少量CNV长至瞳孔区,21天消退明显。各时间点K1-3治疗组CNV面积及MVD均较对照组减少(P<0.05),表明AS对碱烧伤CNV有明显的抑制作用。3、碱烧伤后1-3天,对照组角膜切片中可见大量炎症细胞浸润(主要是中性粒细胞),7-14天时炎症细胞仍较多,21天时炎症细胞减少;碱烧伤后1、3、7、14天,K1组、K2组、地塞米松组角膜中炎症细胞浸润较对照组少(P<0.05),K2组较K1组和地塞米松组少(P<0.05)。21天时地塞米松组炎症细胞较K1-3治疗组增多(P<0.05)。提示局部浸润的炎症细胞在角膜碱烧伤CNV形成过程中起重要作用;AS可通过抑制炎症细胞浸润而抑制CNV,其效果优于地塞米松。4、角膜组织切片显示,碱烧伤后21天,对照组角膜中央混浊,K1-3治疗组角膜较透明。电镜超微结构显示,碱烧伤后对照组角膜上皮基底膜连接松散,前弹力膜和基质层间半桥粒数量减少,细胞间隙变宽。基质胶原纤维排列紊乱,成纤维细胞增大,细胞内线粒体、粗面内质网增多;K1-3治疗组角膜损伤较对照组轻,细胞间连接较对照组紧密,基质层胶原纤维排列相对整齐,成纤维细胞形态及结构变化不明显。显示AS可抑制角膜成纤维细胞过度增生,抑制角膜瘢痕形成。5、大鼠灌服环磷酰胺3天后外周血白细胞总数及淋巴细胞、中性粒细胞数均明显下降(P<0.05);白细胞耗竭鼠角膜碱烧伤,发现角膜中浸润的炎症细胞及CNV面积较对照组减少(P<0.05)。6、正常角膜中VEGF无表达或仅在上皮层有微弱表达,碱烧伤后4组角膜VEGF表达上升,1周左右达高峰,主要表达于新生血管内皮细胞及浸润的炎症细胞内,碱烧伤后各时间点K1-3治疗组VEGF表达及OD值均明显低于对照组(P<0.05)。提示AS可降低碱烧伤角膜VEGF表达,从而抑制CNV。7、IL-1α在正常角膜中有少量表达,碱烧伤后4组IL-1α表达均明显升高,3天时达高峰,7天后开始回落,21天回落至正常水平。碱烧伤后各时间点K1-3治疗组IL-1α表达均明显低于对照组(P<0.05),表明AS可降低IL-1α表达,从而抑制CNV。结论1、角膜碱烧伤40s是一种简单方便的CNV模型,可成功诱导CNV,且无严重并发症。2、重组人血管抑素K1-3可抑制碱烧伤CNV形成、减轻炎症反应、促进角膜愈合,作用呈剂量依赖性。3、重组人血管抑素K1-3抑制碱烧伤CNV形成的作用机制可能是通过抑制角膜IL-1α、VEGF的表达及抑制炎症细胞浸润实现的。4、重组人血管抑素K1-3可抑制成纤维细胞的过度激活,抑制瘢痕形成,减轻角膜混浊。5、电镜超微结构显示K1-3治疗CNV未见角膜细胞损伤,对角膜无毒副作用,提示K1-3可能成为临床治疗CNV的一个新途径。(本文来源于《广西医科大学》期刊2009-06-01）
潘静坤,赵卉,田磊,崔忻,高宇红[7]（2009）在《体外培养下可持续分泌人血管抑素和内皮抑素基因工程细胞对血管生成的抑制效应》一文中研究指出背景:以往实验构建了可持续分泌人血管抑素和内皮抑素的基因工程细胞,即人血管抑素/293细胞和人内皮抑素293细胞,并已证明可持续分泌人血管抑素蛋白和人内皮抑素蛋白。但尚不了解其分泌物是否能发挥血管生成的抑制作用。目的:观察以基因工程技术构建的人血管抑素/293细胞和人内皮抑素/293细胞对鸡胚尿囊膜血管新生的抑制效应。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-06/2007-01在解放军总医院老年医学研究所细胞生物学研究室完成。材料:Hek/293细胞为人胚胎肾细胞,由解放军军事医学科学院提供。人血管抑素/293细胞和人内皮抑素/293细胞由课题组前期构建。SPF级鸡胚购自北京维通利华实验动物有限公司。方法:将鸡胚消毒后,置于37℃无菌恒温箱中孵育5d,在距胚头1cm两条卵黄静脉之间的卵壳投影部位磨切暴露尿囊膜,制成假气室,用无菌滤纸封闭窗口,制成鸡胚尿囊膜模型,备用。用灭菌蒸馏水配制体积分数为0.5%甲基纤维素溶液,制成甲基纤维素小杯。卵壳开窗后第3天,分别吸取浓缩的293细胞、人血管抑素/293细胞、人内皮抑素/293细胞培养上清液各20μL,或人血管抑素/293细胞和人内皮抑素/293细胞培养上清液各10μL,加于甲基纤维素小杯中,将其置于鸡胚尿囊膜的两条大血管之间的无血管区。主要观察指标:观察尿囊膜血管生成的变化。结果:共培养9d时,与单纯293细胞上清液组相比,人血管抑素/293细胞上清液或人内皮抑素/293细胞上清液组,甲基纤维素小杯内及邻近区的鸡胚尿囊膜血管明显发育不良,血管分布稀疏,数量明显减少,其一级血管数量虽未明显减少,但其管径较细,而二级血管和叁级以下的血管数量明显减少、管径明显变细,伸入尿囊膜边缘区的血管数量减少,管径明显变细。与人血管抑素/293细胞组或人内皮抑素/293细胞组相比,人血管抑素/293细胞+人内皮抑素/293细胞组的一级血管数量和管径未见明显变化,而其二级血管和叁级以下血管数量明显减少,血管树消失。结论:人血管抑素/293细胞和人内皮抑素/293细胞的分泌物对鸡胚尿囊膜的血管新生均具有明显的抑制作用,且联合用药抑制作用增强。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2009年20期）
赵卉[8]（2007）在《微囊化分泌人血管抑素和人内皮抑素的基因工程细胞的构建及其抗肿瘤生长的研究》一文中研究指出恶性肿瘤的发病率和死亡率甚高。目前常规的叁大治疗方法(手术、放疗和化疗)难以完全消灭肿瘤及控制肿瘤的转移和复发。近年的研究已证明一些细胞因子具有明确的抗肿瘤作用，如肿瘤坏死因子、血管抑素(angiostatin，AS)、内皮抑素(endostatin，ES)等。但由于这些细胞因子在体内的生物半衰期甚短，仅数十分钟；同时，经全身给予大剂量的细胞因子，不仅肿瘤组织内的浓度很低，抗肿瘤效果较差，而且常产生严重的毒副反应。为维持肿瘤局部存在高浓度的抗肿瘤细胞因子，必须反复多次地对肿瘤局部注射，这在临床上难以实施，特别是对深部肿瘤。同时，细胞因子的昂贵价格限制了其在临床的应用。采用何种方法给药，既能维持肿瘤组织局部存在高浓度的抗肿瘤细胞因子，又不致引起全身的毒副作用，是将抗肿瘤细胞因子发展成为肿瘤治疗产品的关键难题。近年来，有研究尝试将具有抗肿瘤细胞因子的基因转染入具有高增殖活性的载体细胞内，将该细胞植入荷瘤小鼠瘤体内，利用大量繁殖的载体细胞长时间分泌特定的目的基因产物，从而发挥持续给药并治疗恶性肿瘤。然而，有两个主要障碍阻止了其在临床的应用，一是异基因细胞植入将引起免疫排斥反应；二是高增殖活性的基因载体细胞，易产生过度生长成瘤的危险。本组及国内外的研究已证明：APA微囊包裹异基因细胞，具有良好的免疫隔离效应，并可限制囊内高增殖活性细胞的过度生长。如本组前期建立的APA微囊化牛肾上腺嗜铬细胞(APA-BCC微囊)植入治疗顽固性疼痛和帕金森病的方法，已取得了肯定的结果。本研究拟自行建立分泌人血管抑素和人内皮抑素的基因工程细胞；采用APA微囊包裹该细胞，将其植入肿瘤组织中。一方面发挥囊内细胞持续分泌人血管抑素和人内皮抑素的微型生物泵效应，在肿瘤组织中维持高浓度的细胞因子，产生持续杀伤肿瘤细胞、抑制肿瘤组织生长的作用；另一方面，发挥APA微囊的防止免疫排斥反应发生并限制囊内高增殖活性细胞的过度生长的效应。本研究首先采用基因克隆的技术，构建pSNA2.0-hAS和pSNA2.0-hES腺相关病毒包装载体，包装出高效表达hAS和hES的腺相关病毒，并用其转染人胚胎肾(Hek-293)细胞；采用G418抗性筛选法，建立可稳定分泌人血管抑素和人内皮抑素的hAS／293细胞和hES／293细胞；采用RT-PCR、Western blot和ELISA方法，检测人血管抑素和人内皮抑素的表达和分泌；采用本组前期建立的制备方法，用APA微囊分别包裹hAS／293细胞和hES／293细胞。然后，通过人血管内皮细胞增殖抑制实验、鸡胚尿囊膜实验，裸鼠肿瘤治疗实验了解APA微囊化hAS／293细胞和hES／293细胞对血管生成的影响及抑制肿瘤组织生长的作用。结果显示：(1)所建立的hAS／293细胞和hES／293细胞可持续分泌人血管抑素和人内皮抑素；(2)在体外培养中，hAS／293细胞和hES／293细胞所分泌的人血管抑素和人内皮抑素蛋白，具有显着地抑制bFGF刺激的人血管内皮细胞的增殖效应；并具有明显地抑制鸡胚尿囊膜血管新生的作用。表明hAS／293细胞和hES／293细胞具有明确的血管生成抑制的生物学活性。(3)在体外培养中，APA微囊化hAS／293细胞和，APA微囊化hES／293细胞，对bFGF刺激的人血管内皮细胞的增殖均有显着的抑制作用，其效应呈现剂量依赖性；对鸡胚尿囊膜血管新生也有明显的抑制作用。表明hAS／293细胞和hES／293细胞产生的蛋白可以自由扩散出APA微囊膜外发挥抗肿瘤活性。(4)将APA微囊化hAS／293细胞和hES／293细胞分别植入肝癌或结肠癌模型裸鼠瘤内，植入后21天，可观察到：HE染色显示APA微囊完整，无破损；植入APA微囊化hAS／293细胞组和APA微囊化hES／293细胞组的肿瘤体积明显小于植入APA微囊化0／293细胞组(p＜0.01)；免疫组化染色显示植入APA微囊化hAS／293细胞组和APA微囊化hES／293细胞组的肿瘤组织中微血管密度明显低于植入APA微囊化0／293细胞组(p＜0.01)，其效应呈现剂量依赖关系。表明微囊化APA微囊化hAS／293细胞和APA微囊化hES／293细胞植入肿瘤组织中，可明显抑制荷瘤裸鼠的肿瘤生长。本研究在人胚胎肾细胞中构建了可持续分泌人血管抑素和内皮抑素的基因工程细胞，即hAS／293细胞和hES／293细胞；并初步证明APA微囊化的该两种细胞植入肝癌和结肠癌肿瘤组织中，可产生抑制肿瘤组织生长的效应，并且其效应呈现剂量依赖性。提示APA微囊化hAS／293细胞和APA微囊化APA-hES／293细胞植入可能成为辅助治疗肿瘤的新技术，值得进一步研究。(本文来源于《中国人民解放军军医进修学院》期刊2007-05-31）
姜政[9]（2007）在《人血管抑素基因K(1-3)真核表达载体的构建》一文中研究指出目的构建人血管抑素基因 K(1-3)的真核表达载体,为血管抑素基因在肿瘤治疗方面的应用奠定基础。方法利用 RT-PCR 技术从人肝癌组织中获取血管抑素的基因 cDNA 片断,并对其进行双酶切,通过胶回收对目的片断进行纯化,以同样的方法对质粒 pcDNA3．1(+)进行酶切胶回收。然后将纯化的目的片断与质粒进行连接,通过转化筛选出含有目的基因的重组质粒并进行单、双酶切以及测序(本文来源于《中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编（下册）》期刊2007-05-01）
赵卉,潘静坤,罗芸,田磊,薛毅珑[10]（2007）在《持续释放人血管抑素的基因修饰化工程细胞h E/293细胞株的建立》一文中研究指出目的:在人胚肾HEK293细胞中转染真核表达载体pSNA2/hEndostatin(hEndostatin,人血管抑素),建立能稳定分泌hES的基因工程细胞株.方法:将含有IL-2分泌肽的人endostatin(ES)全长cDNA插入真核表达载体pSNA2,产生重组质粒pSNA2/hEndostatin;利用阳离子脂质体介导将其转染入HEK293细胞中;用G418筛选出阳性克隆细胞,将其命名为hE/293细胞.用Western blot法检测hE/293细胞培养上清中分泌的hES蛋白.血管内皮细胞(ECV304)增殖抑制试验及鸡胚尿囊膜试验观察其分泌的hES蛋白的抗增殖活性.结果:经过双酶切和DNA测序证实构建出了含hES基因的真核表达载体.通过G418抗性筛选筛选出稳定表达hES的细胞株3株,将其命名为hE/293细胞;Western blot检测该细胞株培养上清中存在分子量为20 kDa的ES蛋白;ECV304增殖抑制试验显示,与HEK293细胞组相比,hE/293细胞组分泌的ES蛋白对bFGF刺激的血管内皮细胞增殖有明显的抑制作用(48h:0.125±0.007 vs 0.159±0.020,P<0.01;72 h:0.088±0.016 vs 0.249±0.070,P<0.01);鸡胚尿囊膜试验证实hE/293细胞分泌的ES蛋白可以抑制鸡胚尿囊膜血管生长.结论:所构建的hE/293细胞株可以稳定的分泌hES蛋白,并能抑制ECV304细胞生长及鸡胚尿囊膜血管生长.(本文来源于《世界华人消化杂志》期刊2007年12期）
人血管抑素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的了解海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠(alginate-polylysine-alginate,APA)微囊化人血管抑素基因工程细胞对人脐静脉内皮细胞(Huecv304)增殖的影响。方法采用APA制备微囊包裹的表达人血管抑素(human angiostatin,hAS)的基因工程细胞(APA-hAS/293细胞微囊)或空载体转染的基因工程细胞(APA-0/293细胞微囊)。分别将上述两种细胞微囊以不同浓度与人脐静脉内皮细胞Huecv304细胞共培养,于培养0、24、48及72h时,以MTT法测定Huecv304细胞的增殖情况。结果 APA-hAS/293细胞微囊对共培养的Huecv304细胞的增殖具有明显的抑制作用(P<0.01),且具有良好的量效关系。而对照组APA-0/293细胞微囊对Huecv304细胞的增殖无明显抑制作用。结论体外培养的表达人血管抑素基因的工程细胞的分泌物可以通过微囊膜并对人脐静脉内皮细胞的增殖产生显着的抑制效应。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人血管抑素论文参考文献
[1].应长江,林红晓,李伟.重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素对1型糖尿病大鼠肾脏TGF-β_1和VEGF表达的影响[J].中国老年学杂志.2013
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