上调FoxM1增强骨髓间充质干细胞抗脂多糖诱导肺泡上皮细胞凋亡

上调FoxM1增强骨髓间充质干细胞抗脂多糖诱导肺泡上皮细胞凋亡

论文摘要

【目的】本研究旨在探讨上调骨髓间充质干细胞(BMSC)的FoxM1表达水平对其抗脂多糖诱导肺泡上皮细胞凋亡作用的影响,并初步探索其可能机制。【方法】采用全骨髓细胞贴壁培养法分离获取大鼠BMSC,通过慢病毒转染技术使BMSC过表达FoxM1,利用Transwell小室构建BMSC与肺泡上皮细胞共培养体系,使用TUNEL法与Annexin V法检测不同FoxM1表达水平BMSC的抗脂多糖诱导肺泡上皮细胞凋亡作用,采用MILLIPLEX MAP液相芯片检测共培养体系中多种细胞因子的表达水平。【结果】TUNEL与Annexin V检测结果显示,相较于野生型BMSC,与过表达FoxM1的BMSC共培养的肺泡上皮细胞受脂多糖刺激后凋亡水平更低,差异均有统计学意义(P <0.05)。MILLIPLEX MAP液相芯片检测显示,上调BMSC的FoxM1表达水平可使其与肺泡上皮细胞的共培养体系中IL-13、IL-21、IL-23、MIP-1a、MIP-1b表达水平升高,而使MIP-3a表达水平降低。【结论】上调FoxM1表达水平可增强BMSC抗脂多糖诱导肺泡上皮细胞凋亡作用,可能与其改变肺泡上皮细胞某些炎症因子的释放水平有关。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 药品与试剂
  •     1.1.2仪器
  •     1.1.3实验动物
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 大鼠BMSC的分离培养
  •     1.2.2 人肺泡上皮细胞培养
  •     1.2.3 大鼠BMSC的鉴定
  •     1.2.4 重组慢病毒载体转染BMSC及相关检测
  •     1.2.5 A549-MSC共培养体系建立
  •     1.2.6 TUNEL法检测各组A549细胞的凋亡
  •     1.2.7 流式细胞仪检测各组A549细胞的凋亡
  •     1.2.8 共培养后培养基的细胞因子
  •   1.3 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 大鼠BMSC分离培养
  •   2.2 大鼠BMSC细胞表面标志物鉴定
  •   2.3 重组慢病毒载体转染后各组BMSC FoxM1蛋白表达水平
  •   2.4 过表达FoxM1的BMSC对LPS诱导的A549细胞凋亡的影响
  •   2.5 共培养体系的细胞因子水平
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张莉珊,陈钦桂,葛珊慧,徐彩霞,曾勉

    关键词: 急性肺损伤,骨髓间充质干细胞,肺泡上皮细胞,凋亡

    来源: 中山大学学报(医学版) 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 呼吸系统疾病

    单位: 中山大学附属第一医院MICU,中山大学附属第一医院转化医学中心

    基金: 国家自然科学基金(81670066),广东省自然科学基金(2019A1515011198),广东省科技计划项目(2016A020216009),2017年贝朗蛇牌学院重症科学研究基金

    分类号: R563

    DOI: 10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2019.0116

    页码: 833-841

    总页数: 9

    文件大小: 3587K

    下载量: 146

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