导读:本文包含了嵌和抗原论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:抗原,受体,病毒,嵌合体,淋巴瘤,蛋白,细胞。
嵌和抗原论文文献综述
熊冉,艾珊珊,萧晟[1]（2019）在《基于恒定链载体不同抗原表位串联嵌合体免疫原性分析》一文中研究指出为研究多抗原表位串联在恒定链(inviraint chain,Ii)功能片段载体增强免疫作用中的特性,自行设计一系列引物,克隆新城疫病毒HN和鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因片段,用连接序列将其串联,并进一步连接小鼠Ii功能片段Cyt/TM,构建HN/VP2、Cyt/TM/VP2、Cyt/TM/HN、Cyt/TM/HN/VP2和Cyt/TM/VP2/HN共5个嵌合体,定向插入pET-32a原核表达载体,转化大肠杆菌诱导表达并纯化融合蛋白,分别免疫小鼠,经间接ELISA法测定血清抗体效价。结果显示,Ii功能片段可增强小鼠分泌特异性抗体,无论是Ii功能片段连接单一抗原表位,还是Ii功能片段连接多抗原表位串联,均比单用抗原表位免疫组提高抗体效价3倍以上,而多抗原表位串联不同试验组之间差异不明显。结果表明,Ii功能片段(Cyt/TM)具有增强免疫的作用,其连接的抗原表位串联不影响其免疫原性。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年08期）
袁园[2]（2016）在《一株可应用于嵌合体抗原受体基因修饰的细胞治疗技术的CD19单克隆抗体的筛选与鉴定》一文中研究指出目的利用鼠杂交瘤技术筛选和制备治疗性CD19单克隆抗体,并探讨基于获得的CD19 scFv序列构建的CD19-CAR(pCD19-CAR)是否能特异性杀伤CD19阳性B细胞淋巴瘤细胞。方法利用偶联多肽免疫小鼠制备CD19单克隆抗体,然后用基因测序的方法获得抗体的序列。分析抗体序列,并通过基因合成和分子克隆技术构建pCD19片段,而后将pCD19片段克隆到带有CAR的慢病毒载体(PG1-CAR-pCDH)上,即pCD19-CAR-pCDH。病毒包装制备后,将其转染NK-92MI细胞。最后用流式细胞术检测被pCD19-CAR-pCDH瞬时转染的NK-92MI细胞对CD19阳性细胞株的杀伤率。结果(1)成功筛出了特异性强的CD19单克隆抗体—pCD19;(2)用抗体检测CD19阳性细胞株Ramos和Raji,结果显示Ramos的阳性率为84.3%,Raji的阳性率为85.6%,与商业化抗体结果相似;(3)杀伤结果显示未被基因修饰的NK-92MI细胞对CD19阳性细胞株Ramos和Raji细胞的基础杀伤效率分别为27.6%和21.8%;被pCD19-CAR片段瞬时转染的、pCD19-CAR阳性率为28.72%的NK-92MI细胞对上述两种细胞的杀伤效率分别为48.6%和44.1%;对于CD19阴性细胞株Jurkat,不论是未被基因修饰的NK-92MI或者是被pCD19-CAR片段修饰过的NK-92MI,几乎不存在特异性杀伤,杀伤效率分别为15.5%和17.8%。结论成功筛选出了具有高度特异性的CD19单克隆抗体,并利用其scFv序列成功构建了pCD19-CAR。经过pCD19-CAR片段修饰的NK-92MI细胞对CD19阳性细胞株的杀伤明显高于未被基因修饰过的NK-92MI细胞,说明被pCD19-CAR修饰过的NK-92MI细胞能特异性的识别CD19抗原并杀伤CD19阳性的肿瘤细胞株,显示出其在对CD19阳性的B细胞淋巴瘤的免疫治疗中的潜力。(本文来源于《苏州大学》期刊2016-04-01）
姜丽翠[3]（2015）在《嵌合体抗原受体修饰的T细胞对血液恶性肿瘤细胞的杀伤》一文中研究指出为了分别探讨靶向CD19分子和CD138分子的嵌合抗原受体修饰的T细胞(CD19/CD138-CAR-T)与未被基因修饰的T细胞相比,是否可以提高对CD19+的套式淋巴瘤细胞和CD138+骨髓瘤的杀伤率。我们通过基因合成和分子克隆手段构建CD19/CD138-CAR片段,将CD19/CD138-CAR片段分别克隆到慢病毒载体上,然后用慢病毒对T细胞进行转染。利用PCR、蛋白免疫印迹术、流式细胞术检测目的蛋白在T细胞上的表达。最后用流式细胞术检测T细胞对肿瘤细胞的杀伤效果。结果发现未被CAR基因修饰的T细胞对CD19阳性的Jeko-1、Rec-1、Maver-1细胞的杀伤效率分别为30%、17%和32%,而CD19-CAR-T细胞对上述3种肿瘤细胞的杀伤效率分别为78%、60%和75%;未被基因修饰的T细胞对CD138阳性的U266和8226细胞的杀伤率分别为10%和38%,而CD138-CAR-T细胞对上述2种肿瘤细胞的杀伤率分别为43%和86%。得出结论为经CD19/CD138嵌合抗原体受体修饰的T细胞可特异性识别CD19/CD138分子,对CD19/CD138阳性的肿瘤细胞的杀伤效率显着高于未被基因修饰的T细胞,显示出CAR-T在免疫治疗中具有巨大潜力。为了得到兼具细胞毒杀伤毒性和在体外长期维持活性的中央记忆T细胞,我们选用Persongen aAPC以及IL-7对CAR-T细胞进行扩增。(本文来源于《苏州大学》期刊2015-05-01）
姜丽翠,游凤涛,宗云辉,孟会敏,安钢力[4]（2015）在《嵌合体抗原受体修饰的T细胞对CD19~+套式淋巴瘤细胞的杀伤》一文中研究指出目的探讨靶向CD19分子的嵌合抗原受体修饰的T细胞(CD19-CAR-T)与未被基因修饰的T细胞相比,是否可以提高对CD19+的套式淋巴瘤细胞的杀伤率。方法通过基因合成和分子克隆手段构建CD19-CAR片段,将CD19-CAR片段克隆到慢病毒载体上,然后用慢病毒对T细胞进行转染。利用PCR、蛋白免疫印迹、流式细胞术检测目的蛋白在T细胞上的表达。最后用流式细胞术检测T细胞对肿瘤细胞的杀伤效果。结果未被基因修饰的T细胞对CD19阳性的Jeko-1、Rec-1、Maver-1细胞的杀伤效率分别为30%、17%和32%,而CAR-T细胞对上述3种肿瘤细胞的杀伤效率分别为78%、60%和75%。未被基因修饰的T细胞对CD19阴性的293T细胞的杀伤效率为13%,CAR-T细胞对293T细胞的杀伤效率为24%。结论经CD19嵌合抗原受体修饰的T细胞可特异性识别CD19分子,对CD19阳性的套式淋巴肿瘤细胞的杀伤效率显着高于未被基因修饰的T细胞,显示出CD19-CAR-T在套式淋巴细胞肿瘤免疫治疗的巨大潜力。(本文来源于《免疫学杂志》期刊2015年04期）
刘小娟[5]（2010）在《IBDV抗原表位与HBcAg嵌合体基因的构建及其表达产物免疫功能分析》一文中研究指出传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease, IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Disease Virus, IBDV)引起的以侵害雏鸡淋巴组织,特别是中枢免疫器官—法氏囊为主要特征的传染病。该病不仅引起患病动物死亡,而且还导致机体免疫抑制,使机体的免疫防御能力降低和疫苗免疫接种失败,对易感鸡群实施疫苗接种是预防该病最有效的方法,但由于各地流行的IBDV毒株的毒力与抗原性的差异,给疫苗毒株的选择造成较大的困难,每年由于IBD免疫失败或免疫抑制造成的经济损失巨大。为了抵抗超强毒的攻击以及母源抗体的干扰,目前广泛应用中等毒力的IBD活疫苗,给IBD的防控带来极大的隐患,灭活疫苗存在着抗原制备的困难。鉴于此,进一步分析当前IBDV的分子流行病学、研制新型的基因工程疫苗,仍是当前禽病防控工作中亟待解决的重要课题。研究内容包括两个部分：试验1：IBDV抗原表位与HBcAg嵌合体基因的构建及其表达产物分析为了提高模拟IBDV多表位基因5epis的免疫效力,运用重迭延伸PCR技术,在乙型肝炎病毒核心抗原(Hepatitis B core antigen, HBcAg)基因的231位～232位核苷酸(77位～78位氨基酸残基)之间插入BamH I和EcoR I酶切位点,构建基于HBcAg修饰基因(Modified HBc, mHBc)的抗原表位嵌合体基因分子载体pET-mHBc。将模拟IBDV多表位基因5epis定向插入到pET-mHBc的mHBc基因中,获得嵌合体基因mHBc-5epis表达质粒pET-mHBc-5epis,在大肠杆菌中表达。用SDS-PAGE分析,重组嵌合体蛋白的分子量约为29ku；在Western-blotting试验中,重组嵌合体蛋白与IBDV抗体反应形成1条特异性蛋白带。将重组菌超声破碎后,用电镜观察,可见重组嵌合体蛋白呈病毒样颗粒(VLP),直径约100nm～120nm；用IBDV抗体夹心ELISA检测,抗原效价达到1：200。本试验成功构建了5epis与HBcAg嵌合体基因,在大肠杆菌中高效表达具有IBDV抗原反应性的重组病毒样颗粒嵌合体蛋白,为表位型IBD基因工程疫苗的研究提供了一条新途径。试验2：重组mHBc-5epis嵌合体蛋白的免疫功能分析将重组菌pET-mHBc-5epis诱导表达,用SDS-PAGE胶回收方法纯化重组mHBc-5epis嵌合体蛋白,免疫1月龄SPF鸡,双抗体夹心ELISA法检测免疫鸡血清中的IFN-y、 IL-2、IL-4、IL-6动态变化,在免疫后的第2天IL-2、IL-4表达量都有明显上升;用间接ELISA去检测免疫鸡血清中IBDV抗体,在免疫后的第14天IBDV抗体效价达到1：100。试验表明,嵌合体基因HBcAg分子载体能够增强鸡产生特异性的体液免疫及细胞免疫应答。本试验首次证明了HBcAg在鸡体内能增强抗原表位的免疫保护效力,为新型IBD颗粒化多表位疫苗的研究奠定了基础。(本文来源于《南京农业大学》期刊2010-11-01）
李轶杰,陈开旭,庄淑珍,马正海,张富春[6]（2009）在《HPV16E7E6抗原表位嵌合体DNA抗肿瘤疫苗的研究》一文中研究指出目的:探讨HPV16 E7、E6抗原表位与HSP70 N端重组DNA疫苗抗肿瘤活性。方法:以重迭PCR将HPV16 E7基因N端60个氨基酸的编码序列与E6基因的10个(48～57)氨基酸的编码序列及HSP70 N端序列进行融合。以pcDNA3.0为载体,构建真核表达载体pcD-E76HSP。重组质粒免疫C57BL/6小鼠后,通过淋巴细胞增殖实验和细胞毒性杀伤实验研究该疫苗激发的细胞免疫反应及反应强度;观察该疫苗对C57BL/6小鼠TC-1肿瘤细胞移植瘤的治疗效果。结果:重组DNA疫苗免疫C57BL/6小鼠后,小鼠脾淋巴细胞体外增殖明显,并可诱导产生针对TC-1肿瘤细胞的特异性CTL反应;体内抑瘤试验显示该疫苗对HPV16病毒转化的TC-1细胞小鼠移植瘤的生长有抑制作用。结论:该疫苗能激发特异性细胞免疫反应,显着抑制HPV16转化的TC-1肿瘤细胞生长。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2009年07期）
邹一丰,张珑娟,吴小剑,何晓生,练磊[7]（2009）在《猪-人-鼠嵌合体动物模型的建立及介导人T细胞对猪异种抗原的耐受》一文中研究指出目的:通过共移植人胎胸腺、胎肝组织及猪骨髓细胞于SCID鼠体内,建立猪-人-鼠嵌合体模型,介导人T细胞对猪异种抗原的免疫耐受。方法:实验鼠分成3组:A组为猪骨髓细胞移植组,B组为人胎胸腺、肝脏组织移植组,C组为猪骨髓细胞+人胎胸腺+肝脏组织移植组;在移植后每3周,用流式细胞仪测定猪和人嵌合体的水平,直至20周;通过混和淋巴细胞反应确定人T细胞的功能及对猪异种抗原的耐受情况。结果:猪嵌合体在所有实验鼠(包括共移植人组织的实验鼠)中持续时间均超过20周;在移植人胎组织20周时,T细胞的数量为0.7×106/L,在外周血细胞中所占的百分比为0.14%±0.01%;人嵌合体在所有实验鼠(包括共移植猪骨髓细胞的实验鼠)中持续时间亦超过20周。结论:通过共移植人胎胸腺、胎肝组织及猪造血干细胞于SCID鼠体内,可以建立猪-人-鼠嵌合体模型,并能诱导人T细胞对猪异种抗原的免疫耐受。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2009年02期）
王延树[8]（2007）在《嵌合体杯状病毒的构建及FCV抗原表位的表达研究》一文中研究指出兔出血症是1984年最早发生于我国的一种对家兔及野兔危害极大的烈性传染病。目前已遍及世界各地,对养兔业造成了极大的损失。为了制备RHDV的疫苗,本试验用同是杯状病毒科的猫杯状病毒作为载体,插入兔出血症病毒的主要衣壳蛋白编码基因,以期用猫杯状病毒在细胞上可以培养的特性,表达出兔出血热病毒的衣壳蛋白,使它组装成病毒空衣壳。构建了重组质粒pUC-FCVm-VP60,用限制性内切酶将质粒线性化,用体外转录试剂盒将DNA转化成RNA,用脂质体转染试剂盒将其转染到细胞内进行表达。同时为研究猫杯状病毒的保护性抗原位点,本试验还表达了猫杯状病毒的主要保护位点,构建重组表达质粒pET-FCV,在表达菌中获得了表达,利用原核表达的融合蛋白为包被抗原建立了检测抗猫杯状病毒血清抗体的间接ELISA方法。结果表明:(1)获得了兔出血症病毒衣壳编码基因正向插入猫杯状病毒的重组质粒pUC-FCVm-VP60。(2)以猫杯状病毒为载体表达了兔出血症病毒的VP60,为探索杯状病毒载体和兔出血症的免疫打下坚实的基础。(3)构建了原核表达质粒载体pET-FCV,并获得了在E.coli中的表达产物,表达量为20%。经Western blotting检测具有一定的反应原性。(3)初步建立了基于重组蛋白的猫杯状病毒血清抗体的间接ELISA检测方法(本文来源于《吉林大学》期刊2007-12-04）
汪晓华,童德妍,徐焕宾,熊凌云,熊思东[9]（2004）在《SARS-Cov膜结合蛋白抗原表位的预测和多表位嵌合体的原核表达》一文中研究指出SARS Cov是引起非典型性肺炎的病原体。S和M蛋白都是SARS冠状病毒主要的膜结构蛋白。研究显示 ,冠状病毒感染细胞过程中 ,病毒表面膜结合蛋白起决定性作用。通过网络数据库结合生物软件分析的方法预测可能在SARS Cov感染过程中起重要作用并具较好抗原性参数的膜结合蛋白结构区域作为抗原表位。构建多表位串联基因片段 ,接入载体pET 32a后验证表明 ,该多表位串联基因可以在原核细胞内高效表达 ,从而为基于表位的SARS Cov疫苗的进一步研制奠定了基础(本文来源于《现代免疫学》期刊2004年05期）
黄亮,屠郑,阴彬,袁建刚,强伯勤[10]（1999）在《疟原虫抗原表位与沙门氏菌鞭毛蛋白嵌合体的构建》一文中研究指出疟原虫抗原B表位NKND是由本所寄生虫免疫室与分子生物学研究室合作发现的一个疟疾抗原表位。它存在于多种不同的疟原虫分离株。在其C末端加上一个D可以增强它与抗体的结合能力[1]。我们人工合成NKNDD和CST3的寡核昔酸片段并将之串联后插入沙门氏菌鞭毛蛋白表达载体。斑点杂交得到阳性克隆。序列分析鉴定为2拷贝NKNDD与2拷贝CST3的串联体。(本文来源于《基础医学与临床》期刊1999年05期）
嵌和抗原论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的利用鼠杂交瘤技术筛选和制备治疗性CD19单克隆抗体,并探讨基于获得的CD19 scFv序列构建的CD19-CAR(pCD19-CAR)是否能特异性杀伤CD19阳性B细胞淋巴瘤细胞。方法利用偶联多肽免疫小鼠制备CD19单克隆抗体,然后用基因测序的方法获得抗体的序列。分析抗体序列,并通过基因合成和分子克隆技术构建pCD19片段,而后将pCD19片段克隆到带有CAR的慢病毒载体(PG1-CAR-pCDH)上,即pCD19-CAR-pCDH。病毒包装制备后,将其转染NK-92MI细胞。最后用流式细胞术检测被pCD19-CAR-pCDH瞬时转染的NK-92MI细胞对CD19阳性细胞株的杀伤率。结果(1)成功筛出了特异性强的CD19单克隆抗体—pCD19;(2)用抗体检测CD19阳性细胞株Ramos和Raji,结果显示Ramos的阳性率为84.3%,Raji的阳性率为85.6%,与商业化抗体结果相似;(3)杀伤结果显示未被基因修饰的NK-92MI细胞对CD19阳性细胞株Ramos和Raji细胞的基础杀伤效率分别为27.6%和21.8%;被pCD19-CAR片段瞬时转染的、pCD19-CAR阳性率为28.72%的NK-92MI细胞对上述两种细胞的杀伤效率分别为48.6%和44.1%;对于CD19阴性细胞株Jurkat,不论是未被基因修饰的NK-92MI或者是被pCD19-CAR片段修饰过的NK-92MI,几乎不存在特异性杀伤,杀伤效率分别为15.5%和17.8%。结论成功筛选出了具有高度特异性的CD19单克隆抗体,并利用其scFv序列成功构建了pCD19-CAR。经过pCD19-CAR片段修饰的NK-92MI细胞对CD19阳性细胞株的杀伤明显高于未被基因修饰过的NK-92MI细胞,说明被pCD19-CAR修饰过的NK-92MI细胞能特异性的识别CD19抗原并杀伤CD19阳性的肿瘤细胞株,显示出其在对CD19阳性的B细胞淋巴瘤的免疫治疗中的潜力。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
嵌和抗原论文参考文献
[1].熊冉,艾珊珊,萧晟.基于恒定链载体不同抗原表位串联嵌合体免疫原性分析[J].中国兽医学报.2019
[2].袁园.一株可应用于嵌合体抗原受体基因修饰的细胞治疗技术的CD19单克隆抗体的筛选与鉴定[D].苏州大学.2016
[3].姜丽翠.嵌合体抗原受体修饰的T细胞对血液恶性肿瘤细胞的杀伤[D].苏州大学.2015
[4].姜丽翠,游凤涛,宗云辉,孟会敏,安钢力.嵌合体抗原受体修饰的T细胞对CD19~+套式淋巴瘤细胞的杀伤[J].免疫学杂志.2015
[5].刘小娟.IBDV抗原表位与HBcAg嵌合体基因的构建及其表达产物免疫功能分析[D].南京农业大学.2010
[6].李轶杰,陈开旭,庄淑珍,马正海,张富春.HPV16E7E6抗原表位嵌合体DNA抗肿瘤疫苗的研究[J].中国免疫学杂志.2009
[7].邹一丰,张珑娟,吴小剑,何晓生,练磊.猪-人-鼠嵌合体动物模型的建立及介导人T细胞对猪异种抗原的耐受[J].中国病理生理杂志.2009
[8].王延树.嵌合体杯状病毒的构建及FCV抗原表位的表达研究[D].吉林大学.2007
[9].汪晓华,童德妍,徐焕宾,熊凌云,熊思东.SARS-Cov膜结合蛋白抗原表位的预测和多表位嵌合体的原核表达[J].现代免疫学.2004
[10].黄亮,屠郑,阴彬,袁建刚,强伯勤.疟原虫抗原表位与沙门氏菌鞭毛蛋白嵌合体的构建[J].基础医学与临床.1999
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