纹藤壶附生菌的分离鉴定及蛋白酶菌株的产酶性质研究

论文摘要

目的:研究纹藤壶附生菌的分离鉴定及蛋白酶菌株的产酶性质。方法:黄渤海潮间带海域纹藤壶中分离到54株菌株,经酪蛋白酶实验,筛选得到4株高产蛋白酶的菌株,并对其进行菌种鉴定、产蛋白酶的发酵条件优化及产酶活性测定。结果:经筛选,得到4株高产蛋白酶的菌株,编号分别为X8、X18、X21、X48。通过16S rDNA序列分析,结合透射电镜及形态学观察、生理生化测试结果,初步鉴定X8为河豚毒素假交替单胞菌、X18为乔治亚海杆菌、X21为杀鱼假交替单胞菌、X48为康氏菌。通过测定菌株的生长曲线,确定菌株X8发酵量最高的培养时间为18h、确定菌株X18发酵量最高的培养时间为18h、确定菌株X21发酵量最高的培养时间为21h、确定菌株X48发酵量最高的培养时间为18 h。在最适培养时间的基础上,通过单因素多水平试验设计,可得产蛋白酶菌株X8的最佳发酵条件:可溶性淀粉5. 0‰、初始p H 7. 0、培养基盐度10‰、培养温度25℃; X18最佳发酵条件:可溶性淀粉5. 0‰、初始p H 7. 0、培养基盐度15‰、培养温度30℃; X21最佳发酵条件:蔗糖5. 0‰、初始p H 7. 0～8. 0、培养基盐度15‰、培养温度25℃; X48最佳发酵条件:可溶性淀粉5. 0‰、初始p H 7. 0、培养基盐度15‰、培养温度25℃。结论:在优化发酵条件下,X8、X18、X21、X48菌株产蛋白酶酶活力分别达到707. 06、240. 00、441. 18、328. 22 U/m L。该研究为探索潜在的高产蛋白酶菌株提供了科学依据。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•     1.1.1 材料
•     1.1.2 试剂
•     1.1.3 培养基
•   1.2 方法
•     1.2.1 样品的采集
•     1.2.2 样品的处理
•     1.2.3 纹藤壶附生菌的分离纯化
•     1.2.4 高产蛋白酶菌株的筛选
•     1.2.5 高产蛋白酶菌株的透射电镜超薄切片观察及鉴定
•     1.2.6 高产蛋白酶菌株生长曲线的测定
•     1.2.7 高产蛋白酶菌株发酵条件优化
•     1.2.8 蛋白酶活力的测定
• 2 结果与分析
•   2.1 菌株的分离、筛选和鉴定
•     2.1.1 纹藤壶附生菌的分离纯化
•     2.1.2 高产蛋白酶菌株的筛选结果
•     2.1.3 透射电镜观察
•     2.1.4 形态学观察及生理生化鉴定结果
•     2.1.5 分子生物学鉴定
•   2.2 高产蛋白酶菌株的生长曲线
•   2.3 高产蛋白酶菌株发酵条件优化
•     2.3.1 碳源对菌株生长的影响
•     2.3.2培养基初始p H值对菌株生长的影响
•     2.3.3培养基盐度对菌株生长的影响
•     2.3.4 培养温度对菌株生长的影响
•   2.4 蛋白酶活力的测定
•     2.4.1 酪氨酸标准曲线
•     2.4.2 福林法测定蛋白酶活力
• 3 结论
• 4 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 徐萌,杨召阳,李夏云,路宜男,陈依帆,邢翔

关键词: 分离鉴定,发酵条件优化,蛋白酶

来源: 中国食物与营养 2019年07期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业

单位: 山东大学海洋学院

基金: 山东省重点研发计划(公益类)(项目编号:2019GSF109007)

分类号: TQ925

页码: 34-40

总页数: 7

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