导读:本文包含了原位渗入转化论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:原位,植株,真空,芥菜,杆菌,小白菜,春化。
原位渗入转化论文文献综述
金万梅,巩振辉,吕元红[1]（2004）在《芥菜植株原位真空渗入遗传转化方法的研究》一文中研究指出以蕾期的芥菜生态型雪里蕻和圆叶芥为试材,在携带潮霉素磷酸转移酶标记基因的根癌农杆菌菌株GV3101的介导下,对影响芥菜植株原位真空渗入遗传转化效果的真空渗入时间、根癌农杆菌悬浮孢子的浓度、渗入培养基、感染方式以及根癌农杆菌菌株等进行研究。结果表明,真空渗入时间为2 min／间歇30s／30s;菌液浓度OD600为0.8;渗入培养基为1／2MS无机+Bs有机;菌株采用强感染型的;对花蕾进行真空渗入,可以获得最佳转化效果。(本文来源于《华北农学报》期刊2004年03期）
金万梅,巩振辉,吕元红[2]（2004）在《芥菜植株原位真空渗入遗传转化技术》一文中研究指出Bechtold等[1]建立了植株原位真空渗入遗传转化方法。此后,许多学者在拟南芥[2]和芸薹属一些作物[3]上进行了尝试,但尚未对芥菜植株原位真空渗入遗传转化效果的因素进行研究。本实验以芥菜为试材,旨在建立和优化芥菜植株原位真空渗入高效遗传转化技术,为(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2004年03期）
金万梅,巩振辉,吕元红[3]（2004）在《芥菜植株原位真空渗入遗传转化技术的研究》一文中研究指出以蕾期的芥菜(Brassica juncea Coss)生态型雪里蕻和圆叶芥为试材,在携带潮霉素磷酸转移酶标记基因的根癌农杆菌(Agrbacterium tumefaciens)菌株GV3101的介导下,对影响芥菜植株原位真空渗入遗传转化效果的真空渗入时间、根癌农杆菌悬浮孢子的浓度、渗入培养基、感染方式等进行研究。结果表明,真空渗入时间为2 min/间歇30s/30s;菌液浓度OD600为0.8;渗入培养基为1/2MS无机+B5有机;菌株采用强感染型的;对花蕾进行真空渗入,可以获得最佳转化效果。(本文来源于《中国园艺学会第六届青年学术讨论会论文集》期刊2004-07-01）
金万梅,巩振辉,宋正旭,宋献军,严慧玲[4]（2003）在《通过植株原位真空渗入遗传转化获得转基因芥菜》一文中研究指出以芥菜(BrassicajunceaCoss)雪里蕻和圆叶芥为试材,在携带潮霉素磷酸转移酶基因和CaMVBari-1基因 的根癌农杆菌菌株GV3101的介导下,采用植株原位真空渗入遗传转化技术,将外源基因潮霉素磷酸转移酶基因和CaMVBari-1基因 导入芥菜。采收T1种子,经潮霉素抗性筛选和PCR分子检测,证实获得了转基因植株。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2003年05期）
宋正旭,巩振辉[5]（2003）在《小白菜植株原位真空渗入遗传转化相关因子的研究》一文中研究指出在 GV310 1和 L BA4 4 0 4 2个农杆菌菌株的介导下 ,以 3个品种小白菜 (Brassica campestris L.ssp.chinensis var.communis Tsen et L ee)为试材 ,对影响小白菜植株原位真空渗入遗传转化效率的相关因子进行了研究。结果表明 ,不同小白菜基因型的转化效率不同 ,其中黄心乌的转化率最高 ;不同菌株的转化效率亦有差异 ,L BA4 4 0 4的转化效率高于 GV310 1;植株打薹后 10 d转化率高于其他几个时期 ;植株大小对转化率的影响不显着。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2003年02期）
宋正旭,巩振辉,金万梅,顾丽红[6]（2002）在《小白菜植株原位真空渗入遗传转化适宜苗态建成方法的研究》一文中研究指出低温处理小白菜 ( Brassica Campestrisssp.Chinensis var.communis Tsen et Lee)种子和春秋 6个播期实验 ,研究了小白菜春化和植株原位真空渗入遗传转化适宜苗态的建成方法。结果表明 ,小白菜种子经5 0℃温烫 1 0 min,2 3℃浸种 4 h,催芽 1 2 h后 ,在 0～ 4℃低温下 ,上海青处理 1 7d,黄心乌处理 2 5 d,四月慢处理 2 9d,7～ 9℃黄心乌处理 2 5 d,播种于大田 ,在长日照下均可完成春化 ,形成适宜植株原位真空渗入遗传转化的苗态。上海青、黄心乌和四月慢 9月 7日露地播种均可完成春化 ,形成适宜植株原位真空渗入遗传转化的最佳苗态 ,上海青和黄心乌 2月 1 7日播种也可完成春化 ,形成适宜植株原位真空渗入遗传转化的苗态。(本文来源于《西北农业学报》期刊2002年03期）
宋正旭[7]（2002）在《小白菜植株原位真空渗入遗传转化体系的研究》一文中研究指出本研究以叁个品种小白菜(Brassica campestris L.ssp.chinensis var communis Tsten et Lee)为材料、在两个菌株LBA4404(携带nptⅡ基因和gus基因)和GV3101(携带Bari-1基因和hpt基因)介导下，重点研究了植株原位真空渗入遗传转化体系，包括适宜苗态的建成方法研究、转化影响因素研究、转化体筛选和转化机理初步研究四部分。另外，初步探讨了用浸花方式进行遗传转化的方法。试验结论如下： 1．通过自然春化和种子人工低温处理两种途径对适宜苗态建成方法的研究表明：自然春化条件下，杨凌地区秋季9月7日是叁个材料形成最佳适宜苗态的播期；春季2月17日是上海青和黄心乌形成适宜苗态的播期。而种子人工低温处理中，0～4℃下，上海青17d，黄心乌25d，四月慢29d，同时7～9℃下，黄心乌25d，皆能形成适宜苗态。以上途径相比前者相对较好，但后者也不失为一种较好的方法。 2．影响转化诸因素的研究表明：(1)外源基因向黄心乌转化的效率明显高于其他两个品种；(2)菌株LBA4404介导转化的效率比GV3101高：(3)渗入培养基中添加AS对转化率影响不明显，将Ca~(2+)浓度提高到0.1mol／L转化率为0；(4)真空渗入时间黄心乌以1min+间歇30S+30S为佳，上海青和四月慢为2min+间歇30S+30S为佳；(5)打主薹后10d的植株比其他时期的转化率高；(6)植株大小对转化率影响不大；(7)植株在真空渗入前经0～4℃低温处理7小时转化率高于对照。 3．叁个材料抗生素抗性试验结果表明：鉴别转化体的标准为植株生长正常，叶片绿色，有侧根发出或真叶长出或既有真叶长出又有侧根出现。用潮霉素筛选上海青转化植株时，最佳浓度为30mg／L，筛选黄心乌和四月慢转化植株时，最佳浓度均为50mg／L；用卡那霉素筛选叁个材料转化植株最佳浓度为50mg／L；筛选的的最佳时间是从培养基播种后第20天开始。 4．分别用真空渗入处理植株和未处理植株作父、母本和母、父本进行杂交，以真空渗入处理植株自交作对照，对转化机理进行了初步研究。结果表明花粉和胚珠皆可作为外源基因的最初受体。 5．将处于盛花期的黄心乌植株浸入农杆菌渗入菌液中进行转化，初步研究了浸花法。结果表明浸花5min和10min都能得到卡那霉素抗性植株，但浸花10min转化率低于浸花5min。 6．本研究共得到了卡那霉素抗性植株170株，潮霉素抗性植株67株。从卡那霉素抗性植株中随机抽取15株进行PCR检测，其中8株出现了目标条带。扩增结果初步说明外源基因已整合到植物基因组中。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2002-05-01）
金万梅[8]（2001）在《芥菜（Brassica juncea Coss）植株原位真空渗入遗传转化体系的研究》一文中研究指出芥菜营养丰富，栽培面积广泛，但在生产上存在着病虫害严重、产量低、品质差等问题。解决的根本途径是培育新品种，常规育种不仅年限长，而且目标性状常常与不良经济性状呈紧密连锁关系。转基因技术能将目标基因直接导入植物染色体组中，育种效率高。国内关子芥菜遗传转化技术还很不成熟，难以适宜育种需求。真空渗入法以其独特的优点受到了广泛的关注和探索。本试验通过对影响转化效果诸因素的研究试图建立芥菜植株原位真空渗入高效遗传转化体系，为该法的广泛应用提供理论依据和方法技术。 本项研究于1999年6月至2001年5月，以芥菜雪里凝和园叶芥为材料，采用人工低温处理和春秋播期试验以及对影响原位真空渗入遗传转化效果的真空渗入时间、菌液浓度、渗入培养基、芥菜生长发育时期、组织器官和农杆菌菌株进行处理试验，建立了芥菜原位真空渗入遗传转化体系，获得了以下主要结果： 1．雪里散和圆叶芥芥菜种子经 50C温烫 10min，23oC浸种 2－6h，催芽 20h，或 23t浸种 5 h不催芽，置0－4’C处理25d 圆叶芥9月20日、9月30日和2月27日，雪里数9月30日和2月27日露地播种，均易形成芥菜植株原位真空渗入遗传转化适宜苗态。 2．通过对影响转化效果的诸因素的研究，建立了芥菜植株原位真空渗入高效遗传转化方法：真空渗入时间为Zmin／间歇30s／30s或Zmin／间歇1．smin／30s；菌液浓度OD。为0．8－l二，渗入培养基为 l／ZMS无机十B。有机；菌株采用强感染型的；在蕾期对花蕾进行真空渗入。 3．初步建立一种鉴定转基因植株的方法--生长点点滴筛选法，该法筛选雪里敦和圆叶芥的最佳潮霉素浓度为 800mg／L，筛选时间自接种潮霉素后 10d开始。筛选转化体的标准：真叶长出，叶色显绿，生长正常。由于其不需要培养基，无污染，节省药品，筛选出的转化体移栽成活率高，具有一定的应用前景。 4．建立了培养基筛选芥菜转基因植株的潮霉素最佳浓度和筛选最佳时期。25mg／L为芥菜雪里票和圆叶芥潮霉素筛选的最佳浓度；筛选的最佳时间从16日龄开始。鉴别转化体的标准：在潮霉素浓度为 25m叭的筛选培养基上，16日龄以上的雪里燕和圆叶芥植株生长正常，叶片现绿，有侧根发出或真叶长出或既有侧根又有真叶出现。 5．参考微量DNA提取方法，成功地提取了用于PCR扩增的芥菜DNA，并建立了PCR扩增反应体系。 6．获得了转基因植株。本试验经潮霉素筛选获抗性苗386棵，随机取样六棵，对其提取基因组DNA，进行PCR分子检测，均有条带扩出，证明外源基因己整合在芥菜基因组DNA上。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2001-06-01）
原位渗入转化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
Bechtold等[1]建立了植株原位真空渗入遗传转化方法。此后,许多学者在拟南芥[2]和芸薹属一些作物[3]上进行了尝试,但尚未对芥菜植株原位真空渗入遗传转化效果的因素进行研究。本实验以芥菜为试材,旨在建立和优化芥菜植株原位真空渗入高效遗传转化技术,为
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
原位渗入转化论文参考文献
[1].金万梅,巩振辉,吕元红.芥菜植株原位真空渗入遗传转化方法的研究[J].华北农学报.2004
[2].金万梅,巩振辉,吕元红.芥菜植株原位真空渗入遗传转化技术[J].农业生物技术学报.2004
[3].金万梅,巩振辉,吕元红.芥菜植株原位真空渗入遗传转化技术的研究[C].中国园艺学会第六届青年学术讨论会论文集.2004
[4].金万梅,巩振辉,宋正旭,宋献军,严慧玲.通过植株原位真空渗入遗传转化获得转基因芥菜[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2003
[5].宋正旭,巩振辉.小白菜植株原位真空渗入遗传转化相关因子的研究[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2003
[6].宋正旭,巩振辉,金万梅,顾丽红.小白菜植株原位真空渗入遗传转化适宜苗态建成方法的研究[J].西北农业学报.2002
[7].宋正旭.小白菜植株原位真空渗入遗传转化体系的研究[D].西北农林科技大学.2002
[8].金万梅.芥菜（BrassicajunceaCoss）植株原位真空渗入遗传转化体系的研究[D].西北农林科技大学.2001
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