导读:本文包含了乙酰神经氨酸醛缩酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:乙酰,氨酸,神经,大肠杆菌,基因,遗传学,层析。
乙酰神经氨酸醛缩酶论文文献综述
李春,戚晓熙,杨鹤,龚雅丽,祁昕[1]（2015）在《N-乙酰神经氨酸醛缩酶基因在大肠杆菌中的高效表达》一文中研究指出以大肠杆菌TG1的染色体总DNA为模板,通过引物设计和PCR扩增,克隆获得编码Neu5Ac醛缩酶基因(nanA)的片段;以p ET28(b)构建的nanA基因重组质粒p ET28(b)-nanA转化大肠杆菌BL21(DE3),达到高产N-乙酰神经氨酸醛缩酶的目的。在得到的转化子大肠杆菌BL21(DE3)/pNA1中,nanA基因受lac启动子控制,为IPTG或乳糖所诱导表达。此工程菌产酶量在浓缩后达到6.13mg/m L。(本文来源于《中国食品学报》期刊2015年08期）
张子娟[2]（2012）在《N-乙酰神经氨酸醛缩酶克隆、表达和酶活分析》一文中研究指出N-乙酰神经氨酸(N-acetyl-D-neuraminic acid, Neu5Ac)是唾液酸家族中最有代表性的一族,通常位于细胞表面糖蛋白和糖脂的糖链非还原末端,在许多生理和病理过程中发挥重要的作用,在治疗流感、神经性疾病、炎症和肿瘤等方面具有重要的医药价值。Neu5Ac的产生需要N-L酰葡萄糖胺差向异构酶(EC 5.1.3.8, Age)和N-乙酰神经氨酸醛缩酶(EC 4.1.3.3, NanA)的参与,Age催化N-乙酰葡萄糖胺产生N-乙酰甘露糖胺,N-乙酰甘露糖胺和丙酮酸可以经NanA催化形成Neu5Ac。这两步反应都是可逆反应,为了使得反应最大程度的向正反应方向进行,有必要对NanA和Age的表达进行调节,使得这两种酶能够协同表达,从而实现在不浪费能量的情况下达到Neu5Ac的最大产量。本研究一方面通过稀有密码子对NanA蛋白的表达进行调节,构建了一个可以调节蛋白表达的元件,实现了在不改变启动子的情况下调节蛋白的表达量,提高了蛋白的可溶性表达,这种构建策略为蛋白表达量调节的研究提供了非常重要的理论指导。另一方面,在Neu5Ac的合成中NanA酶的表达是瓶颈,本研究通过从不同的微生物来源克隆表达了5种NanA,并对其进行纯化和酶学性质分析,结果表明已成功寻找到酶活力及酶学性质优异的NanA,进而提高了Neu5Ac的产量,为Neu5Ac的工业化生产提供了一定的理论指导,具有广泛的应用前景和较高的市场价值。(本文来源于《兰州大学》期刊2012-05-01）
杨蕴刘,饶娆,沈健,冯磊[3]（2010）在《N-乙酰-D-神经氨酸醛缩酶基因的克隆与表达》一文中研究指出目的:为了获得N-乙酰-D-神经氨酸醛缩酶基因表达的两重组菌。方法:以大肠杆菌C600染色体DNA为模板,通过引物设计和PCR扩增,克隆获得编码Neu5Ac醛缩酶基因(nanA)的片段;以pET28b构建的nanA基因重组质粒pRY1转化E.coliBL21(DE3),然后将nanA基因片段组入到pDR540载体的Ptac启动子下游,所得重组菌E.coliDH5α/pRY3的nanA基因在tac启动子控制下呈组成型表达。结果:DNA序列测定证明,该基因的开放阅读框(open read ing frame,ORF)大小为894 bp,编码298个氨基酸组成的酶蛋白;SDS-PAGE显示,纯化的目的蛋白为33 kD的单一条带。以pET28b构建的nanA基因重组质粒pRY1转化E.coliBL21(DE3),在得到的转化子E.coliBL21(DE3)/pRY1中,nanA基因受lac启动子控制,无需IPTG或乳糖所诱导。在N-乙酰-D-神经氨酸醛缩酶固定化酶的催化下合成N-乙酰-D-神经氨酸的合成效率为78.3%,结晶回收率为90.2%,总回收率为70.6%。全波长扫描分析表明:本实验室结晶品与Sigma公司商品的全波长扫描图谱有相同的特征。结论:所构建的诱导型产酶菌株E.coliBL21(DE3)/pRY1和组成型表达菌株E.coliDH5α/pRY3都可较多量的产酶。合成的结晶品具有N-乙酰-D-神经氨酸的特征。(本文来源于《浙江大学学报(医学版)》期刊2010年01期）
杨茂区[4]（2006）在《固定化N-乙酰-D神经氨酸醛缩酶的制备及生化性质研究》一文中研究指出【目的】对一株高产Neu5Ac醛缩酶的诱导型基因工程菌株E. coli DH5α/pRY1进行发酵产酶,并对酶进行固定化,对固定化酶进行生化性质的测定分析,为固定化Neu5Ac醛缩酶应用于工业生产神经氨酸奠定基础。 【方法】用含TB培养基的发酵罐对该菌株进行发酵。发酵条件为:通气1.4vvm,搅拌550rpm,先37℃培养1～2小时,待A_(600)>1.0时,降温至22℃,分两次添加乳糖至终浓度为1.5%,继续发酵18～20小时,出料,4℃,5000rpm离心收集菌体。菌体冷冻过夜后,用pH7.5磷酸缓冲液悬浮,超声波破碎,测定酶液在不同破碎条件下的酶活,确定其最佳破碎条件。破碎后悬浮液经15000rpm,4℃离心即得无细胞上清粗酶液。通过对粗酶液热变性处理,对酶进行纯化。用Eupergit~(?) C环氧树脂对酶进行固定化,以蛋白/干载体比例、温度、时间为叁因素进行叁因素叁水平的正交试验,确定最佳固定化条件。对制得的固定化酶,研究其酶动力学性质,测定温度和pH对固定化酶活性的影响。对固定化酶进行贮存稳定性和重复使用稳定性试验。 【结果】20L发酵液得到湿菌体723g。菌体超声波破碎的最佳条件为:功率(本文来源于《浙江大学》期刊2006-05-01）
尚广东,李卓荣,王以光[5]（2004）在《N-乙酰-D-神经氨酸醛缩酶的克隆、表达和活性测定》一文中研究指出N-乙酰 - D-神经氨酸是一类特殊的氨基糖的重要代表 ,有重要的医药应用价值。本文从大肠埃希氏菌中克隆 N-乙酰 - D-神经氨酸醛缩酶基因 ,并得到高效表达的醛缩酶。经纯化后催化活性实验结果表明 ,醛缩酶可将 N-乙酰 - D-甘露糖胺高效率地转化为 N-乙酰 - D-神经氨酸 ,表现出较高的催化活性。本工作为 N-乙酰 - D-神经氨酸酶的大规模催化合成奠定了基础。(本文来源于《中国抗生素杂志》期刊2004年07期）
乙酰神经氨酸醛缩酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
N-乙酰神经氨酸(N-acetyl-D-neuraminic acid, Neu5Ac)是唾液酸家族中最有代表性的一族,通常位于细胞表面糖蛋白和糖脂的糖链非还原末端,在许多生理和病理过程中发挥重要的作用,在治疗流感、神经性疾病、炎症和肿瘤等方面具有重要的医药价值。Neu5Ac的产生需要N-L酰葡萄糖胺差向异构酶(EC 5.1.3.8, Age)和N-乙酰神经氨酸醛缩酶(EC 4.1.3.3, NanA)的参与,Age催化N-乙酰葡萄糖胺产生N-乙酰甘露糖胺,N-乙酰甘露糖胺和丙酮酸可以经NanA催化形成Neu5Ac。这两步反应都是可逆反应,为了使得反应最大程度的向正反应方向进行,有必要对NanA和Age的表达进行调节,使得这两种酶能够协同表达,从而实现在不浪费能量的情况下达到Neu5Ac的最大产量。本研究一方面通过稀有密码子对NanA蛋白的表达进行调节,构建了一个可以调节蛋白表达的元件,实现了在不改变启动子的情况下调节蛋白的表达量,提高了蛋白的可溶性表达,这种构建策略为蛋白表达量调节的研究提供了非常重要的理论指导。另一方面,在Neu5Ac的合成中NanA酶的表达是瓶颈,本研究通过从不同的微生物来源克隆表达了5种NanA,并对其进行纯化和酶学性质分析,结果表明已成功寻找到酶活力及酶学性质优异的NanA,进而提高了Neu5Ac的产量,为Neu5Ac的工业化生产提供了一定的理论指导,具有广泛的应用前景和较高的市场价值。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
乙酰神经氨酸醛缩酶论文参考文献
[1].李春,戚晓熙,杨鹤,龚雅丽,祁昕.N-乙酰神经氨酸醛缩酶基因在大肠杆菌中的高效表达[J].中国食品学报.2015
[2].张子娟.N-乙酰神经氨酸醛缩酶克隆、表达和酶活分析[D].兰州大学.2012
[3].杨蕴刘,饶娆,沈健,冯磊.N-乙酰-D-神经氨酸醛缩酶基因的克隆与表达[J].浙江大学学报(医学版).2010
[4].杨茂区.固定化N-乙酰-D神经氨酸醛缩酶的制备及生化性质研究[D].浙江大学.2006
[5].尚广东,李卓荣,王以光.N-乙酰-D-神经氨酸醛缩酶的克隆、表达和活性测定[J].中国抗生素杂志.2004
论文知识图
