鳗弧菌论文_周建波,孟繁星,黎明,王日昕,石戈

导读:本文包含了鳗弧菌论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:弧菌,大菱鲆,疫苗,基因,抑菌,灭活,指标。

鳗弧菌论文文献综述

周建波,孟繁星,黎明,王日昕,石戈[1](2019)在《大弹涂鱼TLR基因分子进化研究及其在鳗弧菌胁迫后的表达分析》一文中研究指出大弹涂鱼(Boleophthalmuspectinirostris)是一种生活在潮间带的淤泥滩和红树林等两栖环境中的鱼类,其免疫系统面临比水生生活更大的选择压力。Toll样受体基因(简称TLR)是重要的先天免疫成员,一直是鱼类分子免疫学的研究热点之一。为了探究大弹涂鱼TLR基因是否因为其独特的生活环境而产生适应性进化以及其TLR基因在受到细菌攻击后的免疫应答模式,本研究从大弹涂鱼皮肤转录组中获得了TLR5, TLR8和TLR9完整序列以及TLR3和TLR7部分序列,采用分子生物信息学对大弹涂鱼TLR5, TLR8和TLR9基因序列以及氨基酸序列进行了分析,并根据所构建的系统发育树对5个TLR基因进行了分子进化分析,采用荧光定量PCR方法对大弹涂鱼5个TLR基因的组织表达分布和鳗弧菌攻击后5个TLR基因的免疫应答模式开展了研究。结果显示, TLR5基因全长3071 bp,包括长度为2646 bp的编码区,共编码882个氨基酸; TLR8基因全长3175 bp,包括长度为3033 bp的编码区,共编码1011个氨基酸; TLR9基因全长3398 bp,编码区长度为3093 bp,共编码1031个氨基酸。大弹涂鱼3个TLR基因与其他物种的TLR基因结构相似,具有高度保守性。位点模型结果表明,鱼类TLR3, TLR5和TLR8是高度保守的,而TLR7和TLR9在长期进化过程中产生了适应性进化;而进化枝–位点模型结果表明,为了适应更加复杂多变的两栖环境,大弹涂鱼TLR9基因可能产生了适应性进化。大弹涂鱼5个TLR基因在8个健康组织(肠,眼,肾,肝,脑,肌肉,脾和皮肤)中均有表达,在肝脏和脾脏中的表达量较高。在受到鳗弧菌(Vibrio anguillarum)攻击后的免疫表达模式表明了大弹涂鱼5个TLR基因在应对细菌入侵时起到了重要作用。(本文来源于《中国水产科学》期刊2019年06期)

李杜文[2](2019)在《鳗弧菌金属蛋白酶诱导大菱鲆头肾细胞凋亡的作用机制研究》一文中研究指出为了明确鳗弧菌金属蛋白酶对大菱鲆头肾细胞的毒性作用机制,本试验将金属蛋白酶作用于头肾细胞,试验分为对照组(0μg/mL)、低浓度组(1.6μg/mL)、中浓度组(8μg/mL)与高浓度组(40μg/mL)。通过LDH法和MTT法测定细胞膜的完整性和细胞存活率,Hoechst33342荧光染色法检测细胞凋亡形态,采用流式细胞仪检测细胞凋亡、活性氧、线粒体膜电位的变化,并利用RT-qPCR、ELISA法检测凋亡相关基因的表达及酶活变化。试验结果表明,与对照组相比,试验组细胞内LDH释放率随着胁迫时间延长均有上升趋势,且均显着高于对照组(P<0.05),以金属蛋白酶高浓度组24h LDH释放率最高,为82.61±9.48%;MTT结果表明低浓度组金属蛋白酶3h对细胞的毒性作用较小,与对照组无显着性差异(P>0.05),其他时间点均显着低于对照组(P<0.05),24h后细胞存活率为76.19±0.04%,而金属蛋白酶高浓度组在胁迫细胞6h后,细胞存活率在50%以下;Hoechst 33342荧光染色法和Annexin V-FITC/PI双染法结果均显示金属蛋白酶高浓度组在24h细胞凋亡率最高;膜电位结果显示,6~24h金属蛋白酶低浓度组、中浓度组和高浓度组的膜电位均呈现下降趋势,且显着低于对照组(P<0.05)。金属蛋白酶高浓度组活性氧24h时细胞的DCF荧光信号最大且显着高于对照组(P<0.05)。另外,Caspase 3、Caspase 9与Cyt C基因的表达量呈现先升高后下降的趋势,金属蛋白酶高浓度组Cyt C和Caspase 9基因表达量均在12h时达到最大值,Caspase 3表达量在6h达最高值,且均与对照组具有显着性差异(P<0.05),高浓度组Caspase 3的活性在3~24h内呈现上升的趋势,除3h外,其他时间点均显着高于对照组(P<0.05)。综上所述,金属蛋白酶对大菱鲆头肾细胞具有细胞毒性作用,高浓度金属蛋白酶可以在短时间内诱导头肾细胞发生凋亡,且具有一定的时间和剂量关系。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2019-06-01)

黄辛,张婷[3](2019)在《国产海水养殖动物疫苗从单联走向多联》一文中研究指出我国是水产养殖大国,但近年来病害问题日渐突出,水产动物病害种类达200余种,每年养殖病害发病率达50%,平均死亡率达30%。面对海水鱼类病害,养殖户惯用的手段便是使用抗生素。以化学药物为主的病害防控方案已经深层次影响到水环境安全、水产食品安全以及人类健康(本文来源于《中国科学报》期刊2019-05-14)

李朝,柯常亮,古小莉,李惠青,黎智广[4](2019)在《麻醉剂丁香酚对鳗弧菌抑菌效果初步研究》一文中研究指出水产麻醉剂丁香酚具有良好的抑菌和杀菌作用,不仅对食源性致病菌具有良好的抑制作用,也对水产致病菌具有潜在的抑菌效力。为探讨丁香酚对水产养殖业主要致病菌的抑菌作用,文章初步开展了丁香酚对鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的抑菌效果研究。丁香酚质量浓度为6 400μg·mL~(-1)时,鳗弧菌培养平板中抑菌圈直径为(21.13±0.74) mm,表明鳗弧菌对此浓度的丁香酚表现为极敏。吸光度测定结果显示微孔中丁香酚质量浓度≥400μg·mL~(-1)时弧菌没有生长,表明丁香酚对鳗弧菌的最低抑菌浓度(MIC)为400μg·mL~(-1)。取400μg·mL~(-1)、800μg·mL~(-1)和1 600μg·mL~(-1)微孔中溶液涂抹于培养平板继续培养24 h,质量浓度≥800μg·mL~(-1)时鳗弧菌没有生长,表明最小杀菌浓度(MBC)为800μg·mL~(-1)。研究结果表明丁香酚对鳗弧菌具有良好的抑菌作用。(本文来源于《南方水产科学》期刊2019年02期)

孙承文,李杰,赖迎迢,江小燕,莫照兰[5](2019)在《大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗生产工艺条件的优化》一文中研究指出目的优化大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗的生产工艺条件。方法通过对大菱鲆鳗弧菌VAM003株培养基(TSB和LB)、培养基盐度(1. 5%、2. 0%、2. 5%、3. 0%、3. 5%NaCl)、接种量(5%、10%、15%)、发酵时间(6~12 h)进行筛选,采用最适发酵条件制备大菱鲆鳗弧菌VAM003株发酵菌液,分别加入不同终浓度的甲醛(0. 1%、0. 2%、0. 3%、0. 4%)灭活24、48、72 h,确定最适灭活条件。采用最适生产工艺制备2批大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗,并进行安全性及效力试验。结果大菱鲆鳗弧菌VAM003株最适发酵培养条件为:用含2. 5%NaCl的TSB培养基,在接种量10%条件下发酵培养10~12 h,活菌量达5×109 CFU/m L以上;最适灭活条件为:甲醛终浓度0. 2%灭活24 h。大菱鲆注射灭活疫苗后,全部健活,未出现临床症状,摄食、游姿及体色均正常,注射部位无红肿,内脏器官无病变;疫苗的免疫保护率达90%以上。结论成功优化了大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗规模化生产工艺条件,制备的灭活疫苗具有良好的安全性及效力,可用于大菱鲆鳗弧菌病的预防。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年03期)

李杰,李淑芳,丁山,唐磊,李贵阳[6](2019)在《鳗弧菌O1/O2二价灭活疫苗免疫大菱鲆的抗体持续期和免疫保护期》一文中研究指出本研究分析了鳗弧菌(Vibrio anguillarum)O1/O2血清型二价灭活疫苗免疫大菱鲆后的抗体持续期和免疫保护期。以鳗弧菌O1血清型VAM003株和O2血清型VAM007株为抗原制备了福尔马林灭活二价疫苗,将疫苗按照叁种剂量(10~7 cells/尾、10~8 cells/尾、10~9 cells/尾)以腹腔注射途径免疫大菱鲆,在免疫后3 d、7 d、14 d、30 d、60 d、90 d、120 d、150 d,用血清凝集实验检测了免疫鱼血清的VAM003和VAM007抗体效价,用攻毒实验检测了疫苗的免疫保护率(RPS)。结果显示,在免疫后7 d叁个剂量组的大菱鲆均产生了特异抗体,并获得27%~60%的RPS。叁个剂量组大菱鲆的O1血清型抗体持续期分别>90 d (10~7 cells/尾组)、>150 d (10~8 cells/尾组)、>150 d (10~9cells/尾组),而叁个剂量组大菱鲆的O2血清型抗体持续期均>150 d。叁个剂量组的大菱鲆获得的免疫保护持续期均>150 d;以RPS>75%为有效免疫保护,各剂量组大菱鲆抵抗O1血清型病原感染的有效免疫保护期为:14~120d(10~7 cells组)、14~120 d (10~8 cells/尾)、14~150 d (10~9 cells/尾),抵抗O2血清型病原感染的有效免疫保护期为:14~60 d (10~7 cells组)、14~120 d (10~8 cells/尾)、14~120 d (10~9 cells/尾)。研究结果表明鳗弧菌二价灭活疫苗可为大菱鲆提供有效而稳定的免疫保护,获得的抗体持续期和免疫保护期为该疫苗的临床中试研究提供了基础。(本文来源于《中国水产科学》期刊2019年02期)

侯梓园,高姗,潘宝平,闫春财[7](2019)在《青蛤(Cyclina sinensis)IKK基因的克隆及其在鳗弧菌(Vibrio anguillarum)刺激下的表达分析》一文中研究指出利用构建的青蛤(Cyclina sinensis)转录组文库,筛选到青蛤IKK基因的类似序列。经设计引物克隆比对后确认为CsIKK基因。利用生物信息学软件在线对该基因进行结构分析。采用PCR技术克隆基因,并使用实时荧光定量PCR技术克隆得到CsIKK基因在青蛤五个不同组织中的表达情况及在鳗弧菌(Vibrioanguillarum)的刺激下IKK基因在青蛤血淋巴中的时序性表达情况。综合结果得到, CsIKK基因序列开放阅读框长2298bp,编码765个氨基酸。IKK基因在青蛤的血淋巴、外套膜、闭壳肌、肝脏、性腺和鳃六个组织中均表达,在血淋巴中表达量最高。青蛤IKK基因在鳗弧菌胁迫下表达量在6h时达到最大值,与对照组相比差异极显着(P<0.01),表明该基因所指导的蛋白是青蛤重要的免疫信号通路蛋白。(本文来源于《海洋与湖沼》期刊2019年02期)

孙承文,李杰,赖迎迢,江小燕,黄志斌[8](2018)在《大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗原液发酵条件的优化》一文中研究指出为实现大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗中试生产,通过对大菱鲆鳗弧菌菌株VAM003二级种子培养时间、盐度、培养基、接种量、补料等发酵条件的优化筛选,确定大菱鲆鳗弧菌菌株VAM003灭活疫苗发酵原液的发酵工艺条件。鳗弧菌菌珠VAM003接种于含2. 5%Na Cl的TSB液体发酵培养基,28℃振荡培养12~14 h,制备二级种子液,按发酵罐培养基总量的10%接种二级种子液,28℃补料发酵10~12 h。在该条件下鳗弧菌菌株VAM003发酵活菌数达到1. 20×1010cfu/m L,比优化前提高120%以上。(本文来源于《微生物学杂志》期刊2018年06期)

刘丹阳,李超,张敏,姜光朋,周顺[9](2018)在《鳗弧菌菌蜕疫苗的初步制备》一文中研究指出菌蜕作为一种新型疫苗,较好的保留了细菌的原有形态及膜蛋白结构,能够诱导机体产生体液免疫反应及细胞免疫反应。为制备鳗弧菌菌蜕疫苗,本实验通过基因重组技术,构建了含噬菌体PhiX174裂解酶基因E(LysisE)及温控表达系统cIts857的重组载体pRK-857-E,通过结合转移技术,将重组表达载体转移至鳗弧菌,成功构建鳗弧菌菌蜕。结果表明,42℃升温诱导后,菌体OD600于1h时开始下降,3h后趋于平稳,表示细菌裂解基本完成。平板涂布结果显示,活菌数由诱导前的8.21×10~7 CFU/mL,下降至诱导后的2.31×10~3 CFU/mL,裂解效率接近99.999%。电镜对比观察诱导前后的细菌,发现诱导后的鳗弧菌形态未发生变化,可观察到直径为100~300nm的跨膜裂解孔洞,且有细胞质流出。本研究成功构建鳗弧菌菌蜕疫苗,并对其裂解效果进行检测,为弧菌菌蜕疫苗的开发奠定了基础。(本文来源于《青岛农业大学学报(自然科学版)》期刊2018年04期)

栾林林,张永刚,王凤军,任媛,任海[10](2018)在《大菱鲆源鳗弧菌的分离鉴定及药敏分析》一文中研究指出为了研究河北昌黎某养殖场大菱鲆大量死亡的原因,试验从患病大菱鲆肝脏中分离得到1株优势菌DLP-1,并对该菌株进行了人工感染、生理生化、药物敏感性、16S rRNA基因序列及系统发育树分析。结果显示,人工感染大菱鲆出现与自然发病相同的症状,且从组织中再分离的菌株特性与原感染菌相同,表明菌株DLP-1为发病大菱鲆的病原菌。菌株DLP-1为革兰氏阴性弧菌,无芽孢。序列分析显示,DLP-1与鳗弧菌(Vibrio anguillarum DSM 21597 CP010084)的同源性达99%。药敏试验结果显示,DLP-1对氟苯尼考、头孢唑林和头孢匹胺等11种抗生素敏感,对四环素、青霉素等11种抗生素耐药;对菌陈、黄岑、乌梅等中草药高敏,对车前子、白头翁及益母草等耐药。在优选中草药中,五倍子抑菌、杀菌效果最强,MIC为1.512 5 mg/ml、MBC为12.5 mg/ml,可为大菱鲆鳗弧菌的疾病防治提供参考依据。(本文来源于《饲料工业》期刊2018年22期)

鳗弧菌论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为了明确鳗弧菌金属蛋白酶对大菱鲆头肾细胞的毒性作用机制,本试验将金属蛋白酶作用于头肾细胞,试验分为对照组(0μg/mL)、低浓度组(1.6μg/mL)、中浓度组(8μg/mL)与高浓度组(40μg/mL)。通过LDH法和MTT法测定细胞膜的完整性和细胞存活率,Hoechst33342荧光染色法检测细胞凋亡形态,采用流式细胞仪检测细胞凋亡、活性氧、线粒体膜电位的变化,并利用RT-qPCR、ELISA法检测凋亡相关基因的表达及酶活变化。试验结果表明,与对照组相比,试验组细胞内LDH释放率随着胁迫时间延长均有上升趋势,且均显着高于对照组(P<0.05),以金属蛋白酶高浓度组24h LDH释放率最高,为82.61±9.48%;MTT结果表明低浓度组金属蛋白酶3h对细胞的毒性作用较小,与对照组无显着性差异(P>0.05),其他时间点均显着低于对照组(P<0.05),24h后细胞存活率为76.19±0.04%,而金属蛋白酶高浓度组在胁迫细胞6h后,细胞存活率在50%以下;Hoechst 33342荧光染色法和Annexin V-FITC/PI双染法结果均显示金属蛋白酶高浓度组在24h细胞凋亡率最高;膜电位结果显示,6~24h金属蛋白酶低浓度组、中浓度组和高浓度组的膜电位均呈现下降趋势,且显着低于对照组(P<0.05)。金属蛋白酶高浓度组活性氧24h时细胞的DCF荧光信号最大且显着高于对照组(P<0.05)。另外,Caspase 3、Caspase 9与Cyt C基因的表达量呈现先升高后下降的趋势,金属蛋白酶高浓度组Cyt C和Caspase 9基因表达量均在12h时达到最大值,Caspase 3表达量在6h达最高值,且均与对照组具有显着性差异(P<0.05),高浓度组Caspase 3的活性在3~24h内呈现上升的趋势,除3h外,其他时间点均显着高于对照组(P<0.05)。综上所述,金属蛋白酶对大菱鲆头肾细胞具有细胞毒性作用,高浓度金属蛋白酶可以在短时间内诱导头肾细胞发生凋亡,且具有一定的时间和剂量关系。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

鳗弧菌论文参考文献

[1].周建波,孟繁星,黎明,王日昕,石戈.大弹涂鱼TLR基因分子进化研究及其在鳗弧菌胁迫后的表达分析[J].中国水产科学.2019

[2].李杜文.鳗弧菌金属蛋白酶诱导大菱鲆头肾细胞凋亡的作用机制研究[D].内蒙古农业大学.2019

[3].黄辛,张婷.国产海水养殖动物疫苗从单联走向多联[N].中国科学报.2019

[4].李朝,柯常亮,古小莉,李惠青,黎智广.麻醉剂丁香酚对鳗弧菌抑菌效果初步研究[J].南方水产科学.2019

[5].孙承文,李杰,赖迎迢,江小燕,莫照兰.大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗生产工艺条件的优化[J].中国生物制品学杂志.2019

[6].李杰,李淑芳,丁山,唐磊,李贵阳.鳗弧菌O1/O2二价灭活疫苗免疫大菱鲆的抗体持续期和免疫保护期[J].中国水产科学.2019

[7].侯梓园,高姗,潘宝平,闫春财.青蛤(Cyclinasinensis)IKK基因的克隆及其在鳗弧菌(Vibrioanguillarum)刺激下的表达分析[J].海洋与湖沼.2019

[8].孙承文,李杰,赖迎迢,江小燕,黄志斌.大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗原液发酵条件的优化[J].微生物学杂志.2018

[9].刘丹阳,李超,张敏,姜光朋,周顺.鳗弧菌菌蜕疫苗的初步制备[J].青岛农业大学学报(自然科学版).2018

[10].栾林林,张永刚,王凤军,任媛,任海.大菱鲆源鳗弧菌的分离鉴定及药敏分析[J].饲料工业.2018

论文知识图

甲胺失活TEP蛋白后扇贝被鳗弧菌不同反应时间的LAMP结果不同反应温度的LAMP结果海洋细菌不同菌株对鳗弧菌的抑...1 温度对鳗弧菌 W-1 菌体生长及胞...鳗弧菌诱导前后不同时间中国明...

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