分子印迹空心球在蛋白质固相萃取中的应用

论文摘要

建立了分子印迹固相萃取-高效液相色谱相结合分离复杂样品中牛血红蛋白（Hb）的方法.以单分散的二氧化硅球为载体,Hb为模板,采用表面印迹法制备了分子印迹空心球（MIHS）.采用透射电子显微镜（TEM）对该印迹材料的形貌进行了表征.结果表明,所制备的MIHS的单分散性好、粒径均匀,是一种理想的固相萃取填料.以该印迹材料作为固相萃取吸附剂,并结合高效液相色谱（HPLC）研究了其对Hb的吸附行为,结果表明,制备的MIHS在磷酸盐缓冲液（p H=7. 0）中对Hb的回收率高于80%,而对核糖核酸酶A（RNase A）和细胞色素C（Cyt C）的回收率低于50%,方法的精密度高（RSD<5%）.与Hb印迹硅球相比,MIHS具有较快的传质速率和萃取效率.将MHIS应用于复杂样品中Hb的分离,结果表明,MIHS可以从加标牛血清中选择性吸附Hb,吸附率达82%.

论文目录

• 1 实验部分
•   1.1 试剂与仪器
•   1.2 色谱条件
•   1.3 蛋白质印迹聚合物的制备
•     1.3.1 纳米二氧化硅的制备
•     1.3.2 蛋白质印迹硅球 （SIS） 和非印迹硅球 （NIS） 的制备
•     1.3.3 蛋白质印迹空心球 （MIHS） 和非印迹空心球 （NIHS） 的制备
•   1.4 固相萃取实验
•   1.5 实际样品中牛血红蛋白的分离
• 2 结果与讨论
•   2.1 SIS和MIHS的制备及形貌表征
•   2.2 SIS和MIHS应用于固相萃取填料
•     2.2.1 固相萃取柱容量的考察
•     2.2.2 固相萃取洗脱条件的优化
•     2.2.3 上样流速对Hb回收率的影响
•     2.2.4 固相萃取柱对Hb的选择性
•     2.2.5 印迹空心球的可重复利用性
•     2.2.6 实际样品中Hb的吸附
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 孟子晖,王一飞,谢腾升,陈伟,邱丽莉,薛敏

关键词: 固相萃取,牛血红蛋白,分子印迹,空心球

来源: 高等学校化学学报 2019年01期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 化学

单位: 北京理工大学化学与化工学院

基金: 北京理工大学基础研究基金(批准号:20141642005)资助~~

分类号: O631.3;O658.2

页码: 62-68

总页数: 7

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