导读:本文包含了溶解红细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:红细胞,横纹肌,损伤,脑出血,血红素,虹鳟,螺旋体。
溶解红细胞论文文献综述
义玉思[1]（2018）在《钩体溶血素溶解红细胞释放的亚铁血红素对巨噬细胞炎症因子表达的影响》一文中研究指出目的 确定问号钩端螺旋体赖株基因组编码的溶血素Sph2、TlyA、HlpA裂解红细胞释放出游离状态亚铁血红素(heme),heme诱导巨噬细胞产生炎症因子,从而加深了解钩体溶血素在钩体致病过程中的作用,进一步阐明钩体的致病机制。方法 (1)T-A克隆钩体溶血素Sph2、TlyA、HlpA的编码基因片段sph2、tlyA、hlpA,构建以上各基因的原核表达系统,纯化各目的蛋白并测定各重组表达蛋白浓度;(2)采用血平板溶血圈及分光光度法检测重组表达蛋白的溶血活性;(3)应用分光光度法定量测定重组表达蛋白裂解2%绵羊血红细胞悬液后释放的heme;(4)采用Real-timePCR检测NF-κB、p38MAPK或JNK信号通路阻断前后heme刺激人THP-1和小鼠J774A.1巨噬细胞产生炎症因子IL-6、IL-18、IL-33、IL-1β、TNF-α MCP-1、IL-8(人)、KC(小鼠)的 mRNA 水平变化。结果 成功构建目的基因sph2、tlyA、hlpA的原核表达系统,得到具有溶血活性的各重组溶血素蛋白;rSph2、rTlyA、rHlpA均能够引起绵羊红细胞裂解并释放出heme;heme可通过NF-κB、p38MAPK或JNK信号通路诱导人THP-1巨噬细胞炎症因子IL-6、IL-8、IL-18、MCP-1的mRNA水平上调,诱导小鼠J774A.1巨噬细胞炎症因子IL-6、KC、IL-18、IL-33、IL-1β和TNF-α的mRNA水平上调。结论问号钩端螺旋体溶血素rSph2,rH1pA,rT1yA具有溶血活性并能裂解红细胞释放heme,heme可刺激巨噬细胞炎症因子表达,从而与钩体溶血素诱导巨噬细胞产生的促炎因子协同引起宿主细胞的炎症损伤,这将有助于更深入地了解钩体感染宿主后引起的炎症反应机制。(本文来源于《浙江大学》期刊2018-03-01）
杨悦凡[2]（2017）在《脑出血后的红细胞溶解清除与谷氨酸毒性中RNF146作用的研究》一文中研究指出研究背景脑出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)是一种常见的神经系统疾病,具有很高的发病率与死亡率。它在每年新发的卒中病例中大约占有10%-15%的比例,这个比例随着人口平均寿命的增加而增长。在过去几十年里,ICH总的发病率与死亡率没有显着下降,其30天的死亡率约为30%-50%,并且只有20%的病人能在6个月后恢复自理能力。脑出血后大量的红细胞进入脑实质中,这些红细胞在早期就开始溶解并释放出血红蛋白。血红蛋白在损伤部位降解,最终的降解产物包括铁、胆绿素、一氧化碳等,其中铁能够引起一系列下游分子反应,如引起谷氨酸释放,氧化应激反应等。这些应激性反应,引起脑出血后早期的脑水肿、血脑屏障破坏以及神经元变性等大脑损伤。脑出血后引起的一系列继发性分子病理事件是造成进一步损伤的主要机制,尤其是谷氨酸损伤引起的钙离子浓度升高以及氧化应激反应。RNF146是一种泛素化E3连接酶,研究认为它在脑缺血后具有神经保护作用。但是,RNF146在谷氨酸损伤中的具体保护机制并不清楚。脑出血后若能及时清除血红蛋白减少其代谢产物的生成,能够极大减少神经系统损害以及谷氨酸过量释放等继发性改变,同时使用RNF146治疗可以减少其下游分子事件引起的继发性损害。该研究结果提示:(1)脑出血后4小时就可以发生红细胞溶解。(2)血红蛋白代谢产物铁可以引起血红蛋白清除受体(CD163)与Haptoglobin的升高。(3)谷氨酸损伤可以引起神经细胞发生自噬。(4)RNF146可以通过调控谷氨酸诱导的自噬发挥神经保护作用。本研究主要分为以下叁个方面:第一部分:脑出血后早期红细胞溶解的作用与机制研究背景:脑出血后血液从破裂血管中大量进入脑实质中引起脑损伤。大量研究认为血液中的红细胞是导致脑损伤的重要因素。一般认为红细胞进入脑实质后在出血后一天左右开始溶解,溶解后释放出大量的血红蛋白引起脑肿胀与神经元死亡等。因此,红细胞的溶解程度与脑损伤程度密切相关。肝素是一种抗凝剂,能够减少血液的凝固。但是如何测定脑出血后红细胞溶解程度仍没有方法。肝素能否减慢红细胞的溶解仍不可知。方法:我们的实验分为叁部分:首先,将SD大鼠分为两组,一组注射100μl盐水,另外一组注射100μl自体血。在4小时进行核磁扫描T2,T2*,并测量脑肿胀比率与红细胞溶解率。再次,将SD大鼠分为两组,一组注射50μl浓缩红细胞,另一组注射50μl溶解红细胞。在4小时进行核磁扫描T2,T2*以及R2*mapping,并测量脑肿胀比率与红细胞溶解率。此外,切片进行HE染色,Fluoro-Jade C染色。免疫组化染色与Western-blot检测Albumin蛋白水平。使用Matlab软件分析R2*mapping图像进行铁定量。最后,将SD大鼠分为两组一组注射100μl自体血加载体,另一组注射100μl自体血加5个单位肝素。在4小时同样进行T2,T2*以及R2*mapping。并进行HE染色,Fluoro-Jade C染色。结果:我们的实验结果证明脑出血后4小时已经发生中线移位。从T2*影像结果得出,红细胞溶解在4小时已经开始发生。此外,我们使用大鼠脑直接注射溶解红细胞与浓缩红细胞,观察在T2,T2*及R2*mapping上影像学变化。结果发现溶解红细胞组在T2*上损伤区显示为高信号区域,浓缩红细胞在损伤区为低信号区域。溶解红细胞组在4小时加重了脑肿胀程度。相比于浓缩红细胞组,溶解红细胞组引起的血脑屏障破坏更加严重。最后,我们研究肝素在脑出血后早期红细胞溶解中的作用。结果表明肝素可以减少早期红细胞溶解,并减少脑肿胀及神经元变性。结论:脑出血后红细胞的溶解会引起大脑肿胀,神经元变性以及血脑屏障的破坏。肝素可以减少早期的红细胞溶解,并且可以减轻脑肿胀及神经元变性。第二部分:脑出血后CD163与Haptoglobin(Hp)清除血红蛋白的机制研究背景:脑出血是一种在年长人群发生的致死性疾病,大量的红细胞在脑出血后进入脑组织细胞外间隙中。红细胞的降解产物包括血红蛋白,血红素以及铁,引起了验证的氧化与兴奋性毒性作用并且最终导致大脑损伤。血红蛋白来源于血红细胞溶解是脑出血后的主要损伤因素,血红蛋白的毒性与氧自由基的形成与一氧化氮的清除具有密切关系。脑出血后的铁超载可以造成大脑水肿以及大脑萎缩。前面的研究证明血红蛋白在脑出血后表达在神经元与胶质细胞中。然而,降解血红蛋白的保护机制仍然不清除。CD163属于富含半胱氨酸的清除受体超家族,它在血红蛋白的清除中发挥重要作用。同时CD163也是发挥抗炎作用小胶质细胞的标记物之一,它能够调节巨噬细胞中血红素氧化酶的激活。Hp是一种含量颇丰的血浆糖蛋白,能够与血红蛋白结合。Hp在内源性血红蛋白清除系统中具有重要作用,主要依赖于其对游离血红蛋白的解毒作用。Hp与血红蛋白构成的复合体与CD163有很高的亲和力。此外,研究发现Hp主要在大脑中主要由少突胶质细胞合成与分泌。方法:本实验主要分为四部分。第一部分,使用自体血注射脑出血模型检测CD163与Hp在第一天,第叁天与第7天的表达变化。第二部分,使用Fe Cl2注射SD大鼠研究铁超载在大脑中的作用。第叁部分,使用米诺环素研究其对铁毒性与脑出血后CD163与Hp的作用。第四部分,我们使用原代小胶质细胞研究CD163吞噬血红蛋白的清除作用。结果:我们发现CD163与Hp在脑出血第一天开始表达在皮层区神经元与基底节区小胶质细胞并且在第7天达到表达高峰。CD163主要表达在皮层神经元细胞与基底节区小胶质细胞上。Hp主要表达在基底节白质束区少突胶质细胞上。铁能够激活CD163与Hp在皮层区与基底节区的表达。米诺环素能够减少铁与脑出血引起的CD163与Hp表达。CD163抗体能够阻止小胶质吞噬血红蛋白的能力。结论:CD163与Hp在脑出血后一天表达升高并且在第7天达到表达高峰。铁能够增加CD163与Hp的表达,米诺环素治疗可以减少铁与脑出血后的CD163与Hp表达。CD163抗体可以拮抗小胶质细胞吞噬血红蛋白的能力。第叁部分:RNF146对脑出血后谷氨酸兴奋性毒性诱导自噬的作用与机制研究背景:谷氨酸是一种中枢神经系统的内源性兴奋性神经递质。谷氨酸兴奋性毒性是造成卒中,创伤性脑损伤,神经系统退行性疾病等疾病后神经细胞死亡的主要因素之一。自噬参与降解受损或损毁的细胞器,异常蛋白质以及其他细胞质组分的主要代谢过程,是谷氨酸兴奋性毒性后的重要细胞代谢活动。RNF146是一种PAR依赖的E3连接酶,也是一种重要的调节分子,可以调控PARP1介导的细胞死亡。此外,RNF146还能够酶正性调控Wnt信号通路,这是因为RNF146参与了端锚聚合降解axin的过程。然而,目前还没有相关研究证明该通路在谷氨酸兴奋性毒性中的作用。RNF146在谷氨酸兴奋性毒性的作用及自噬及其下游分子通路仍然不清楚。方法:我们的目的是检测RNF146在谷氨酸兴奋性损伤后如何调控自噬。首先,使用RNF146过表达慢病毒与干涉慢病毒转染类神经元细胞HT22细胞系,并对这些细胞进行MTT实验与LDH细胞毒性实验。其次,我们观察自噬在谷氨酸兴奋性毒性损伤中的作用,使用了药理学试剂调控自噬观察HT22细胞的损伤程度。此外,我们还研究了RNF146与Wnt信号通路的相关性,使用Wnt拮抗剂干扰Wnt/β-catenin信号通路的转导过程。同时,为了研究Wnt信号通路在谷氨酸损伤后如何调控自噬,我们使用了Wnt信号的激动剂Foxy5,一种Wnt5a多肽类似物以及拮抗剂,JW74与IWP2。最后,我们还使用了Wnt/β-catenin信号通路抑制剂JW74去研究RNF146对自噬的负性调控作用。结果:本研究中,我们发现了上调RNF146能够减少谷氨酸兴奋性毒性引起的细胞损伤。RNF146能够抑制谷氨酸兴奋性毒性或者雷帕霉素引起的过度自噬,保护神经元不受到损伤。此外,我们还发现在谷氨酸兴奋性毒性中Wnt/β-catenin能够负性调控自噬。过表达RNF146能够通过抑制β-catenin降解复合体促进Wnt/β-catenin信号通路。结论:以上结果证明RNF146是一种神经保护分子,能够在谷氨酸兴奋性毒性损伤保护神经元不受到损伤。这种神经保护作用很有可能是依赖于调控Wnt/β-catenin信号通路抑制自噬。(本文来源于《第四军医大学》期刊2017-05-01）
耿兴华,李建东,刘圣君[3]（2016）在《促红细胞生成素对横纹肌溶解大鼠急性肾损伤时内质网应激相关蛋白的影响》一文中研究指出目的探讨促红细胞生成素(EPO)能否通过减轻内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达以及减轻横纹肌溶解致急性肾损伤。方法将SD大鼠随机分为4组:对照组(control,n=6)、单纯EPO组(EPO,n=18)、急性肾损伤组(AKI,n=18)和EPO干预组(AKI+EPO,n=18),EPO组、AKI组和AKI+EPO组又分为3个亚组,即1,6和24 h组(均为n=6)。在各自的时间点留取标本,检测血中尿素氮、肌酐和肌红蛋白水平;HE染色法观察肾脏病理;免疫组化观察GRP78和CHOP蛋白表达,实时荧光定量PCR检测GRP78和CHOP mRNA的表达。结果与对照组比较,AKI和AKI+EPO组大鼠尿素氮、肌酐和肌红蛋白水平升高,GRP78和CHOP蛋白及mRNA表达水平均显着上调(P<0.05);AKI组肾脏结构出现损伤;与AKI组比较,AKI+EPO组6和24 h血肌酐水平,GRP78、CHOP蛋白和mRNA表达水平较同期均下降(P<0.05)。结论 EPO可以通过影响横纹肌溶解致大鼠急性肾损伤时内质网应激相关蛋白的表达,发挥肾脏保护作用,其机制可能与调节未折迭蛋白反应有关。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2016年09期）
耿兴华[4]（2016）在《促红细胞生成素对横纹肌溶解致大鼠急性肾损伤时内质网应激相关蛋白的影响》一文中研究指出目的:地震,降脂药物,高强度军事训练等使机体出现横纹肌溶解,继而出现大批横纹肌溶解患者,而急性肾损伤是横纹肌溶解的主要并发症。横纹肌溶解致急性肾损伤中,机体的肾小管上皮细胞发生凋亡,主要原因是由于横纹肌溶解,大量肌红蛋白释放到血液中,阻塞机体肾小管,压迫肾小管上皮细胞,细胞缺血缺氧,甚至凋亡。已有研究表明,急性肾损伤的主要方式是通过诱导肾小管上皮细胞凋亡而产生的。内质网通路是近些年来新发现的一种细胞凋亡的途径,在内质网通路中,内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)是其重要组成部分。当机体受到刺激时,内质网稳态遭到破坏,机体在ERS会使机体发生未折迭蛋白反应(unfolded protein response,UPR),保护受损的细胞。葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)是UPR的网络中心蛋白,在UPR的激活过程中起关键作用。而肾小管上皮细胞的凋亡的作用靶点在于持续的内质网应激激活了凋亡信号通路,而CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)的激活也其中发挥着关键性作用。已有研究表明,促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)在缺血—再灌注损伤、横纹肌溶解、顺铂诱导的急性肾损伤的模型中,可以减轻肾小管上皮细胞凋亡,加速肾脏功能恢复。但目前尚无研究表明在横纹肌溶解急性肾损伤的模型中,EPO对肾脏的保护作用机制与调节内质网应激时未折迭蛋白反应的网络中心蛋白grp78和抑制chop相关凋亡途径有关。本研究通过建立甘油诱导横纹肌溶解致急性肾损伤的模型,探讨了epo发挥横纹肌溶解肾损伤的保护机制是否与减轻内质网应激相关。方法:将sd大鼠随机分为4组:对照组(control,n=6),单纯epo组(epo,n=18),急性肾损伤组(aki,n=18)和epo治疗组(aki+epo,n=18),epo组,aki组和aki+epo组又根据甘油的注射分为3个亚组即1,6和24h组(均为n=6)。在各自的时间点留取标本,用半自动生化分析仪检测血中尿素氮、肌酐水平;用elisa法检测血中肌红蛋白;he染色法观察肾脏病理;免疫组化观察grp78和chop蛋白表达。结果:(1)aki组大鼠尿素氮、肌酐和肌红蛋白水平自1h后开始逐渐升高,24h后达到高峰,较对照组均有所升高(p<0.05,p<0.01);aki+epo6h组尿素氮水平较aki组同期有显着下降(p<0.05),aki+epo组6h和24h肌酐水平与aki同期相比有所下降(p<0.05);(2)在光学显微镜下,观察he染色切片发现对照组大鼠肾组织结构完好;随着甘油作用时间的延长,肾脏的损伤越来越严重,损伤位置集中在肾小管,aki+epo各组较同期aki组有所减轻。(3)免疫组化分析显示:与对照组比较,aki组grp78蛋白表达在肾损伤早期即出现表达(p<0.05),在24h时表达最多;除aki+epo1h组外,aki+epo6h和aki+epo24h均较同期aki各组grp78表达减少(p<0.05)。与对照组比较,除aki1h组外,aki组6h及24h均较同期对照组chop表达显着增加(P<0.01);与AKI组比较,除AKI+EPO1h组外,AKI+EPO组6h及24h均较同期AKI组CHOP表达减少(P<0.05)。结论:EPO可以通过影响横纹肌溶解致大鼠急性肾损伤时内质网应激相关蛋白的表达,发挥肾脏保护作用。(本文来源于《河北北方学院》期刊2016-03-01）
王锋,柴璐,范亚平,杨斌,俞燕[5]（2013）在《促红细胞生成素衍生肽对横纹肌溶解大鼠急性肾损伤的肾脏保护作用》一文中研究指出目的:探讨促红细胞生成素衍生肽(HBSP)能否减轻横纹肌溶解所致急性肾损伤(AKI)大鼠肾损害程度及其机制。方法:将SD大鼠随机分成对照组、AKI组和HBSP干预组(造AKI模型同时静脉注射HBSP);采用大鼠双侧后腿注射甘油建立横纹肌溶解所致AKI动物模型。常规生化方法检测血肌酐、血尿素氮、血肌酸激酶的水平及TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡。结果:与AKI组相比,HBSP干预组血肌酐、尿素氮以及大鼠肾组织tunel阳性细胞占总细胞数百分比均降低(P<0.05)。结论:HBSP对横纹肌溶解所致AKI具有明显保护作用,其机制与抑制细胞凋亡有关。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2013年19期）
郁红菊,毛锦雯,吴丽菊,杨艳[6]（2013）在《高龄纯红细胞再生障碍性贫血合并横纹肌溶解症患者的护理》一文中研究指出目的纯红细胞再生障碍性贫血(pure red cell aplasia,PRCA)是较少见的疾病,其发病机制与免疫因素有关,应用环孢菌素A(cyclosporin A,CsA)治疗有效。高龄患者常合并其他器官病变,CsA与他汀类药物合并应用增加他汀类药物发生不良反应的风险。文中探讨高龄PRCA患者应用CsA后发生横纹肌溶解症(rhabdomyolysis,RM)的护理。方法对1例高龄PRCA患者应用CsA后出现RM进行针对性心理护理、用药护理、疼痛及基础护理。结果正确的护理措施有效地缓解了患者的病情,降低了血清肌酐水平。结论对高龄特殊疾病特殊患者有针对性地采取正确完善的护理措施对治疗效果至关重要。(本文来源于《医学研究生学报》期刊2013年01期）
张爱华,肖中华,王小芳[7]（2012）在《红细胞溶解液部分生化指标结果及其影响》一文中研究指出在日常生化检验工作中,一些物理或化学的因素都可能引起标本的溶血,如抽血负压过大、水浴温度过高、冰冻、离心速度过快、振荡过强或血液接触到表面活性剂、药物的毒副作用等。无论何种原因导致的溶血,必会导致红细胞内的成分游离并进入血清,造成分析误差。为了解标本溶血对检测结果的影响,本研究收集2011年10月至2012年2月期间,在我院进行健康体检者的标本(本文来源于《实验与检验医学》期刊2012年04期）
韩国锋,顾勇,程劲,王巍巍,张金元[8]（2008）在《促红细胞生成素对横纹肌溶解大鼠急性肾衰竭的肾脏保护作用》一文中研究指出目的:观察促红细胞生成素(EPO)能否减轻横纹肌溶解引起的急性肾衰竭(ARF)大鼠肾损伤程度并探讨机制。方法:重200g左右SD大鼠48只,禁水14h后分4组,正常对照组:两后腿肌肉注射生理盐水10ml/kg;ARF组:两后腿肌肉内注射50%甘油(10ml/kg);EPO立即干预组:肌肉注射50%甘油的同时腹腔注射EPO2000μg/kg,12h后重复1次;EPO延迟干预组:在肌肉注射甘油6h后注射EPO2000μg/kg,12h重复1次。观察各组尿量、肾功能和肾组织病理变化。结果:与ARF组相比,EPO立即干预组和延迟干预组血尿素氮、血肌酐浓度均明显降低,ATN评分下降(P<0.05)。肌肉注射甘油的3组大鼠24h肾组织中均存在明显的小管细胞凋亡,EPO干预组凋亡情况减轻;肌肉注射甘油的大鼠肾组织抗凋亡因子Bcl-XL的蛋白质表达比正常对照组增加,EPO立即干预和延迟干预组增加更加明显。结论:立即注射和延迟6h注射EPO均可减轻甘油诱导的横纹肌溶解性大鼠急性肾损伤。(本文来源于《中国中西医结合肾病杂志》期刊2008年11期）
吴垠,谷丽,谷杰泉,梁淼[9]（2006）在《溶解氧对虹鳟呼吸机能及红细胞特性的影响》一文中研究指出目的:初步研究溶解氧对虹鳟呼吸机能及红细胞特性的影响。方法:设四组溶氧水平,测定呼吸频率、血液中PO2、PCO2和pH值,并以RBC、Hb、脆性、膜粘滞性及丙二醛含量等指标观察溶氧对红细胞的影响。结果:溶解氧升高使鱼呼吸频率降低,血液PO2升高(P<0.05);高溶氧导致红细胞数、丙二醛含量降低。红细胞膜粘滞系数在试验第10d时,高氧组明显高于其它组,但30d时各溶氧组差异不显着。结论:在一定范围内溶解氧升高可以改善机体组织氧含量,提高呼吸功能,红细胞对溶氧变化有其生理适应性。(本文来源于《中国应用生理学杂志》期刊2006年04期）
李慧,娄季宇,李建章,杨霄鹏[10]（2005）在《溶解红细胞对大鼠脑出血后脑水肿的影响》一文中研究指出目的:研究溶解红细胞对脑出血后脑水肿的影响。方法:运用立体定向技术分A、B、C3组制作大鼠脑出血模型,向大鼠基底节分别注入50μl生理盐水、自体全血、溶解红细胞。观察各组大鼠脑组织病理改变、脑含水量和伊文斯兰含量的变化以及血红素环解加氧酶(HO1)阳性细胞表达及细胞凋亡程度变化。结果:A、B、C3组脑含水量(%),伊文斯兰含量(μg/g),HΟ1染色阳性细胞数,凋亡染色阳性细胞数均依次增高,3组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。B、C组均可见脑细胞高度水肿,细胞间隙明显增大,C组最明显,B组次之。结论:溶解红细胞能造成脑损伤,脑出血后脑水肿的形成与溶解红细胞具有密切关系。(本文来源于《郑州大学学报(医学版)》期刊2005年06期）
溶解红细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究背景脑出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)是一种常见的神经系统疾病,具有很高的发病率与死亡率。它在每年新发的卒中病例中大约占有10%-15%的比例,这个比例随着人口平均寿命的增加而增长。在过去几十年里,ICH总的发病率与死亡率没有显着下降,其30天的死亡率约为30%-50%,并且只有20%的病人能在6个月后恢复自理能力。脑出血后大量的红细胞进入脑实质中,这些红细胞在早期就开始溶解并释放出血红蛋白。血红蛋白在损伤部位降解,最终的降解产物包括铁、胆绿素、一氧化碳等,其中铁能够引起一系列下游分子反应,如引起谷氨酸释放,氧化应激反应等。这些应激性反应,引起脑出血后早期的脑水肿、血脑屏障破坏以及神经元变性等大脑损伤。脑出血后引起的一系列继发性分子病理事件是造成进一步损伤的主要机制,尤其是谷氨酸损伤引起的钙离子浓度升高以及氧化应激反应。RNF146是一种泛素化E3连接酶,研究认为它在脑缺血后具有神经保护作用。但是,RNF146在谷氨酸损伤中的具体保护机制并不清楚。脑出血后若能及时清除血红蛋白减少其代谢产物的生成,能够极大减少神经系统损害以及谷氨酸过量释放等继发性改变,同时使用RNF146治疗可以减少其下游分子事件引起的继发性损害。该研究结果提示:(1)脑出血后4小时就可以发生红细胞溶解。(2)血红蛋白代谢产物铁可以引起血红蛋白清除受体(CD163)与Haptoglobin的升高。(3)谷氨酸损伤可以引起神经细胞发生自噬。(4)RNF146可以通过调控谷氨酸诱导的自噬发挥神经保护作用。本研究主要分为以下叁个方面:第一部分:脑出血后早期红细胞溶解的作用与机制研究背景:脑出血后血液从破裂血管中大量进入脑实质中引起脑损伤。大量研究认为血液中的红细胞是导致脑损伤的重要因素。一般认为红细胞进入脑实质后在出血后一天左右开始溶解,溶解后释放出大量的血红蛋白引起脑肿胀与神经元死亡等。因此,红细胞的溶解程度与脑损伤程度密切相关。肝素是一种抗凝剂,能够减少血液的凝固。但是如何测定脑出血后红细胞溶解程度仍没有方法。肝素能否减慢红细胞的溶解仍不可知。方法:我们的实验分为叁部分:首先,将SD大鼠分为两组,一组注射100μl盐水,另外一组注射100μl自体血。在4小时进行核磁扫描T2,T2*,并测量脑肿胀比率与红细胞溶解率。再次,将SD大鼠分为两组,一组注射50μl浓缩红细胞,另一组注射50μl溶解红细胞。在4小时进行核磁扫描T2,T2*以及R2*mapping,并测量脑肿胀比率与红细胞溶解率。此外,切片进行HE染色,Fluoro-Jade C染色。免疫组化染色与Western-blot检测Albumin蛋白水平。使用Matlab软件分析R2*mapping图像进行铁定量。最后,将SD大鼠分为两组一组注射100μl自体血加载体,另一组注射100μl自体血加5个单位肝素。在4小时同样进行T2,T2*以及R2*mapping。并进行HE染色,Fluoro-Jade C染色。结果:我们的实验结果证明脑出血后4小时已经发生中线移位。从T2*影像结果得出,红细胞溶解在4小时已经开始发生。此外,我们使用大鼠脑直接注射溶解红细胞与浓缩红细胞,观察在T2,T2*及R2*mapping上影像学变化。结果发现溶解红细胞组在T2*上损伤区显示为高信号区域,浓缩红细胞在损伤区为低信号区域。溶解红细胞组在4小时加重了脑肿胀程度。相比于浓缩红细胞组,溶解红细胞组引起的血脑屏障破坏更加严重。最后,我们研究肝素在脑出血后早期红细胞溶解中的作用。结果表明肝素可以减少早期红细胞溶解,并减少脑肿胀及神经元变性。结论:脑出血后红细胞的溶解会引起大脑肿胀,神经元变性以及血脑屏障的破坏。肝素可以减少早期的红细胞溶解,并且可以减轻脑肿胀及神经元变性。第二部分:脑出血后CD163与Haptoglobin(Hp)清除血红蛋白的机制研究背景:脑出血是一种在年长人群发生的致死性疾病,大量的红细胞在脑出血后进入脑组织细胞外间隙中。红细胞的降解产物包括血红蛋白,血红素以及铁,引起了验证的氧化与兴奋性毒性作用并且最终导致大脑损伤。血红蛋白来源于血红细胞溶解是脑出血后的主要损伤因素,血红蛋白的毒性与氧自由基的形成与一氧化氮的清除具有密切关系。脑出血后的铁超载可以造成大脑水肿以及大脑萎缩。前面的研究证明血红蛋白在脑出血后表达在神经元与胶质细胞中。然而,降解血红蛋白的保护机制仍然不清除。CD163属于富含半胱氨酸的清除受体超家族,它在血红蛋白的清除中发挥重要作用。同时CD163也是发挥抗炎作用小胶质细胞的标记物之一,它能够调节巨噬细胞中血红素氧化酶的激活。Hp是一种含量颇丰的血浆糖蛋白,能够与血红蛋白结合。Hp在内源性血红蛋白清除系统中具有重要作用,主要依赖于其对游离血红蛋白的解毒作用。Hp与血红蛋白构成的复合体与CD163有很高的亲和力。此外,研究发现Hp主要在大脑中主要由少突胶质细胞合成与分泌。方法:本实验主要分为四部分。第一部分,使用自体血注射脑出血模型检测CD163与Hp在第一天,第叁天与第7天的表达变化。第二部分,使用Fe Cl2注射SD大鼠研究铁超载在大脑中的作用。第叁部分,使用米诺环素研究其对铁毒性与脑出血后CD163与Hp的作用。第四部分,我们使用原代小胶质细胞研究CD163吞噬血红蛋白的清除作用。结果:我们发现CD163与Hp在脑出血第一天开始表达在皮层区神经元与基底节区小胶质细胞并且在第7天达到表达高峰。CD163主要表达在皮层神经元细胞与基底节区小胶质细胞上。Hp主要表达在基底节白质束区少突胶质细胞上。铁能够激活CD163与Hp在皮层区与基底节区的表达。米诺环素能够减少铁与脑出血引起的CD163与Hp表达。CD163抗体能够阻止小胶质吞噬血红蛋白的能力。结论:CD163与Hp在脑出血后一天表达升高并且在第7天达到表达高峰。铁能够增加CD163与Hp的表达,米诺环素治疗可以减少铁与脑出血后的CD163与Hp表达。CD163抗体可以拮抗小胶质细胞吞噬血红蛋白的能力。第叁部分:RNF146对脑出血后谷氨酸兴奋性毒性诱导自噬的作用与机制研究背景:谷氨酸是一种中枢神经系统的内源性兴奋性神经递质。谷氨酸兴奋性毒性是造成卒中,创伤性脑损伤,神经系统退行性疾病等疾病后神经细胞死亡的主要因素之一。自噬参与降解受损或损毁的细胞器,异常蛋白质以及其他细胞质组分的主要代谢过程,是谷氨酸兴奋性毒性后的重要细胞代谢活动。RNF146是一种PAR依赖的E3连接酶,也是一种重要的调节分子,可以调控PARP1介导的细胞死亡。此外,RNF146还能够酶正性调控Wnt信号通路,这是因为RNF146参与了端锚聚合降解axin的过程。然而,目前还没有相关研究证明该通路在谷氨酸兴奋性毒性中的作用。RNF146在谷氨酸兴奋性毒性的作用及自噬及其下游分子通路仍然不清楚。方法:我们的目的是检测RNF146在谷氨酸兴奋性损伤后如何调控自噬。首先,使用RNF146过表达慢病毒与干涉慢病毒转染类神经元细胞HT22细胞系,并对这些细胞进行MTT实验与LDH细胞毒性实验。其次,我们观察自噬在谷氨酸兴奋性毒性损伤中的作用,使用了药理学试剂调控自噬观察HT22细胞的损伤程度。此外,我们还研究了RNF146与Wnt信号通路的相关性,使用Wnt拮抗剂干扰Wnt/β-catenin信号通路的转导过程。同时,为了研究Wnt信号通路在谷氨酸损伤后如何调控自噬,我们使用了Wnt信号的激动剂Foxy5,一种Wnt5a多肽类似物以及拮抗剂,JW74与IWP2。最后,我们还使用了Wnt/β-catenin信号通路抑制剂JW74去研究RNF146对自噬的负性调控作用。结果:本研究中,我们发现了上调RNF146能够减少谷氨酸兴奋性毒性引起的细胞损伤。RNF146能够抑制谷氨酸兴奋性毒性或者雷帕霉素引起的过度自噬,保护神经元不受到损伤。此外,我们还发现在谷氨酸兴奋性毒性中Wnt/β-catenin能够负性调控自噬。过表达RNF146能够通过抑制β-catenin降解复合体促进Wnt/β-catenin信号通路。结论:以上结果证明RNF146是一种神经保护分子,能够在谷氨酸兴奋性毒性损伤保护神经元不受到损伤。这种神经保护作用很有可能是依赖于调控Wnt/β-catenin信号通路抑制自噬。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
溶解红细胞论文参考文献
[1].义玉思.钩体溶血素溶解红细胞释放的亚铁血红素对巨噬细胞炎症因子表达的影响[D].浙江大学.2018
[2].杨悦凡.脑出血后的红细胞溶解清除与谷氨酸毒性中RNF146作用的研究[D].第四军医大学.2017
[3].耿兴华,李建东,刘圣君.促红细胞生成素对横纹肌溶解大鼠急性肾损伤时内质网应激相关蛋白的影响[J].基础医学与临床.2016
[4].耿兴华.促红细胞生成素对横纹肌溶解致大鼠急性肾损伤时内质网应激相关蛋白的影响[D].河北北方学院.2016
[5].王锋,柴璐,范亚平,杨斌,俞燕.促红细胞生成素衍生肽对横纹肌溶解大鼠急性肾损伤的肾脏保护作用[J].实用医学杂志.2013
[6].郁红菊,毛锦雯,吴丽菊,杨艳.高龄纯红细胞再生障碍性贫血合并横纹肌溶解症患者的护理[J].医学研究生学报.2013
[7].张爱华,肖中华,王小芳.红细胞溶解液部分生化指标结果及其影响[J].实验与检验医学.2012
[8].韩国锋,顾勇,程劲,王巍巍,张金元.促红细胞生成素对横纹肌溶解大鼠急性肾衰竭的肾脏保护作用[J].中国中西医结合肾病杂志.2008
[9].吴垠,谷丽,谷杰泉,梁淼.溶解氧对虹鳟呼吸机能及红细胞特性的影响[J].中国应用生理学杂志.2006
[10].李慧,娄季宇,李建章,杨霄鹏.溶解红细胞对大鼠脑出血后脑水肿的影响[J].郑州大学学报(医学版).2005
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