导读:本文包含了棒状体蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,弓形虫,免疫,毒力,基因,信息学,生物。
棒状体蛋白论文文献综述
徐婷,王聪,罗庆礼,沈继龙[1]（2018）在《流行于我国的优势基因型弓形虫株毒力及其棒状体蛋白ROP5和ROP18蛋白序列差异分析》一文中研究指出目的分析流行于我国的优势基因型弓形虫株(WH3株和WH6株)毒力差异以及棒状体蛋白ROP5和ROP18蛋白序列差异,为研究其致病机制奠定基础。方法使用弓形虫WH3、WH6、RH和PRU虫株分别感染SPF级BALB/c小鼠和昆明鼠,观察小鼠存活时间和存活率,分析毒力强弱。同时PCR扩增4株弓形虫毒力相关效应分子棒状体蛋白ROP5和ROP18基因片段,核苷酸测序后将其转换为氨基酸序列,在蛋白水平上比较其序列差异。结果此4株弓形虫株中,WH3和RH株对BALB/c小鼠和昆明鼠均有较强的毒性,两种小鼠分别在感染后5~7 d和9~12 d均100%死亡;而WH6和PRU株对BALB/c小鼠和昆明鼠的毒性均较弱,两种小鼠在感染后45 d均100%存活,且在脑内检出包囊。棒状体蛋白家族毒力相关分子ROP5和ROP18的氨基酸序列分析发现,Chinese 1型虫株WH3和Wh6与PRU型虫株(Ⅱ型虫株)差异较小,而与毒力较强的RH型虫株(Ⅰ型虫株)差异较大。结论我国流行优势基因型弓形虫株的毒力相关分子ROP5和ROP18,与传统Ⅰ型、Ⅱ型弓形虫株存在差异,为我国弓形虫病的防治提供理论基础。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2018年11期）
蒋艺佳,肖雯雯,聂政,敖阳思琦,李慕晓[2]（2019）在《田鼠巴贝斯虫棒状体蛋白相关因子1基因的原核表达及其特性研究》一文中研究指出本研究以田鼠巴贝斯虫基因组DNA为模板,扩增棒状体蛋白相关因子1(rhoptry-associated protein interacting factor 1,简称RAPIF1)基因,全长为771 bp,编码256 aa,编码蛋白的分子质量为29 kDa。利用多种数据库与生物信息学分析软件,对田鼠巴贝斯虫RAPIF1进行生物信息学分析,预测其亲水性/疏水性、跨膜区、信号肽、翻译后修饰位点、B淋巴细胞抗原表位,结果预示RAPIF1具有良好的亲水性。将RAPIF1的ORF插入表达载体pET-28a进行原核表达,重组蛋白rRAPIF1大小为37 kDa。制备rRAPIF1的多克隆抗体,Western blot结果显示,RAPIF1存在于虫体中,且rRAPIF1具有良好的反应原性,可有效区分田鼠巴贝斯虫阳性血清和阴性血清。本研究结果表明,RAPIF1预期可作为田鼠巴贝斯虫检测和疫苗制备的候选分子。(本文来源于《中国动物传染病学报》期刊2019年02期）
徐婷[3]（2018）在《流行我国优势基因型弓形虫株毒力及其棒状体蛋白ROP5和ROP18蛋白序列差异研究》一文中研究指出目的分析流行我国优势基因Chinese 1弓形虫株WH3株和Wh6株,相关毒力因子ROP5和ROP18的蛋白序列差异,为研究其致病机制奠定基础。方法分别复苏将本室保存的WH3株和RH株弓形虫虫株,接种4-6w龄昆明小鼠,待其急性发病后,收集腹水并分别纯化WH3株和RH株速殖子;分别从本室饲养的保种昆明小鼠脑内分离出Wh6株和PRU株弓形虫包囊,接种4-6w龄昆明小鼠,待其急性发病后,收集腹水并分别纯化WH6株和PRU株速殖子。上述4个虫株1×10~3个速殖子分别感染40只SPF级BALB/c小鼠和40只昆明小鼠,观察其存活时间和存活率,分析毒力强弱。提取上述4株弓形虫的总RNA,反转录成cDNA,以此为模板,PCR扩增出弓形虫棒状体蛋白家族的毒力相关效应分子ROP5和ROP18的全长;将PCR扩增出产物测序,测序结果由核苷酸序列转换为氨基酸序列,分析比较其蛋白水平的遗传序列差异。结果本室保种4株弓形虫株中,Chinese 1基因型WH3株和I型虫株RH株对BALB/c小鼠和昆明小鼠均有较强的毒性,BALB/c小鼠在感染WH3株和RH株后5-7 d均100%死亡,而昆明小鼠存活时间均略长于BALB/c小鼠(χ2=17.75,p<0.0001,χ2=18.04,p<0.0001),但至感染第12d亦全部死亡;分别感染T.gondii WH6株和PRU株的BALB/c小鼠和昆明小鼠均未出现发病及死亡现象,两种小鼠在感染后45d均100%存活,且在脑内检出包囊。BALB/c小鼠和昆明小鼠在感染T.gondii Wh3株和RH株后,在同一品系小鼠内两虫株之间的毒力差异无统计学意义(χ2=0.4303,p=0.5118,χ2=1.511,p=0.2191)。PCR扩增ROP5和ROP18基因序列,均得到与预期结果大小一致的目的片段,测序并将核苷酸序列转换成氨基酸序列后比对发现,Chinese 1基因型WH3株和Wh6株与PRU株(II型虫株)差异较小,而与毒力较强的RH型虫株(I型虫株)差异较大。结论流行于我国的优势基因型Chinese 1型弓形虫WH3株毒力等同于I型虫株RH株,Wh6株毒力与II型虫株PRU株一致。Chinese 1基因型弓形虫株的毒力相关分子ROP 5和ROP18,与传统I型,II型弓形虫株存在差异。WH6株的两种分子与II型虫株(PRU株)同源性较高;WH3株与II型虫株(PRU株)差异较小,与强毒的I型虫株(RH株)的差异较大。Chinese 1基因型不同弓形虫株之间,毒力相关分子在遗传序列上的同源性差异与毒力差异存在不一致的现象,提示有更多的效应分子参与毒力作用。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2018-03-01）
马荣,孙慧,闫歌,魏庆宽[4]（2018）在《弓形虫棒状体蛋白及其核酸疫苗研究现状》一文中研究指出弓形虫病目前尚无理想的特效治疗药物和防治措施,研制安全便捷、保护力强的核酸疫苗是弓形虫病防治的有效策略。棒状体蛋白(Rhoptry protein,ROPs)是弓形虫在入侵宿主细胞过程中所分泌的一类蛋白,其在弓形虫入侵宿主细胞、纳虫空泡(Parsitophorous vacuole,PV)形成及胞内弓形虫的增殖调控等方面发挥着重要作用,是最具潜力的疫苗候选抗原分子之一。本文就ROPs家族重要成员特性、表达载体选择及其核酸疫苗在动物实验中的免疫原性,以及免疫保护作用等方面进行了概述。(本文来源于《中国血吸虫病防治杂志》期刊2018年01期）
刘荣荣,张晓磊,张进顺[5]（2017）在《刚地弓形虫棒状体蛋白18及其作为基因工程疫苗候选分子研究进展》一文中研究指出刚地弓形虫棒状体蛋白18(rhoptry protein18,ROP18)是由棒状体分泌的、属于棒状体蛋白2家族的一员,具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性,在虫体入侵和毒力的发挥方面起着重要作用。论文就ROP18蛋白的结构、毒力和作用机制及其作为基因疫苗候选分子的研究现状进行综述。(本文来源于《动物医学进展》期刊2017年12期）
高德俊,常爽,单秀梅,范巍巍,毛佐华[6]（2017）在《刚地弓形虫棒状体蛋白ROP16对小鼠脑神经细胞凋亡的影响》一文中研究指出目的构建带有Flag标签的刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)棒状体蛋白16(ROP16)的重组慢病毒表达质粒,并检测ROP16蛋白在神经细胞中的表达及其对小鼠脑神经细胞凋亡的影响。方法PCR扩增带Flag标签的ROP16基因,克隆至慢病毒载体,构建重组质粒p CDH-cop GFP-ROP16-Flag,转化至大肠埃希菌(Escherichia coli)DH5α感受态细胞,采用PCR、双酶切及测序验证。将重组质粒转染至人胚胎肾上皮细胞(293T细胞)中进行慢病毒包装,以p CDH-CMV-cop GFP空质粒对照组,荧光显微镜下观察绿色荧光表达情况,并计算慢病毒滴度。将包装后的慢病毒感染人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),采用蛋白质印迹(Western blotting)检测ROP16蛋白的表达情况。应用立体定位注射技术将慢病毒浓缩液注射至小鼠前额叶皮层M1区,2周后取小鼠脑组织,制备冰冻切片,TUNEL染色后,荧光显微镜下观察小鼠脑神经细胞凋亡情况。结果重组慢病毒表达质粒p CDH-cop GFP-ROP16-Flag经PCR和双酶切后均获得大小为2 200 bp的条带,与预期值相符;测序结果与刚地弓形虫RH株ROP16基因(Gen Bank登录号为GQ249093.1)序列比对完全一致。包装后的慢病毒在荧光显微镜下可见绿色荧光,滴度约为2E+8 TU/ml。Western blotting分析结果显示,在相对分子质量(Mr)120 000处有特异条带,重组慢病毒表达质粒能够在SH-SY5Y细胞内表达ROP16蛋白。感染慢病毒的小鼠脑组织冰冻切片经TUNEL染色后,荧光显微镜下可见实验组凋亡的细胞明显多于空质粒对照组。结论构建的慢病毒表达质粒p CDH-cop GFP-ROP16-Flag可在神经细胞内表达ROP16蛋白,并可导致小鼠脑神经细胞凋亡。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2017年06期）
刘荣荣,张进顺,张晓磊,刘楠,贾晓晖[7]（2017）在《刚地弓形虫棒状体蛋白10的生物信息学分析》一文中研究指出目的对刚地弓形虫棒状体蛋白10(TgROP10)进行生物信息学预测,分析其免疫原性。方法运用生物信息学在线分析程序ProtParam、SOSUI、ProtScale、TMHMM、SignalP-4.1、TargetP1.1Server、SOPMA、MotifScan、SWISS-MODEL、SYFPEITHI和Bcepred等并结合生物信息学软件DNASTAR和DNAMAN分析预测TgROP10的理化性质、可溶性、亲疏水性、跨膜结构域、信号肽、胞内定位、二级结构、蛋白翻译后修饰位点、叁级结构、柔韧性、表面可及性和B细胞、T细胞抗原表位等。结果 TgROP10蛋白由586个氨基酸组成,分子式为C2562H4045N739O964S9,分子质量单位(Mr)为60.912 21×103,理论等电点为4.19,吸光度值为0.476,半衰期为30h,不稳定系数为55.56,脂溶性指数为56.25,总平均亲水性系数为-0.699,属于亲水性蛋白;该蛋白无跨膜结构区域,信号肽切割位点在22-23位氨基酸之间,亚细胞定位预测可能是分泌蛋白;二级结构中α螺旋和β折叠分别占26.79%和13.31%,β转角和无规则卷曲分别占6.48%和53.41%,有6种翻译后修饰位点,15个B细胞抗原表位,3个CTL细胞抗原表位,12个Th细胞抗原表位,28个亲水性参数得分1.9的区域,15个柔韧性参数得分2.0的区域,27个表面可及性参数得分1.9的区域,3个暴露表面参数得分2.3的区域。结论生物信息学预测TgROP10含多个抗原表位,具有免疫原性,可作为弓形虫疫苗备选蛋白。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2017年09期）
程正阳,苏蕊,张贤,李叶林,朱万博[8]（2017）在《弓形虫棒状体蛋白ROP18的优化表达》一文中研究指出目的构建弓形虫棒状体蛋白ROP18原核表达载体,并通过密码子优化等方法优化其表达。方法运用RT-PCR扩增ROP18基因,将其克隆入pGEX-6P-1原核表达载体,构建pGEX-ROP18重组质粒;运用OptigeneTM密码子优化分析平台对弓形虫ROP18编码基因进行优化,合成优化后的全长基因(ROP18u)并将其克隆入pGEX-6P-1原核表达载体,构建pGEX-ROP18u重组质粒;以优化后的ROP18u基因为模板,PCR扩增去除N端信号肽和前功能区序列的截短ROP18片段(ROP18uc),将其克隆入pGEX-6P-1原核表达载体,构建pGEX-ROP18uc重组质粒。所有重组质粒经PCR、双酶切和测序鉴定正确后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达重组蛋白,并进行Western blot鉴定。结果 pGEX-ROP18、pGEX-ROP18u和pGEX-ROP18uc于30℃诱导培养4h-6h,分别检测到分子质量约为88ku和77ku的重组蛋白,该蛋白能被GST单克隆抗体和ROP18多克隆抗体识别。结论成功构建了pGEX-ROP18、pGEX-ROP18u和pGEX-ROP18uc原核表达载体,密码子优化未能显着提高ROP18重组蛋白的表达量,但提高了可溶性蛋白的含量。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2017年04期）
杨春利,蔡玉春,陈家旭[9]（2017）在《巴贝虫棒状体蛋白的研究进展》一文中研究指出巴贝虫是一类专性的细胞内寄生的顶复门原虫,是人和动物的重要病原。这类原虫具有相似的亚细胞结构并能分泌与入侵相关的保守蛋白,尤其是在入侵宿主细胞阶段分泌的棒状体相关蛋白被认为是保护寄生虫入侵和繁殖的关键分子,其在虫体入侵的纳虫空泡形成过程中发挥重要作用。随着基因组学和蛋白质组学技术的不断发展,其相关研究也越来越深入。因此,本文就目前研究较多的牛巴贝虫、羊巴贝虫、吉氏巴贝虫、双芽巴贝虫和东方巴贝虫等棒状体相关蛋白的研究现状进行了综述。(本文来源于《中国血吸虫病防治杂志》期刊2017年02期）
高德俊,范巍巍,单秀梅,常爽,姜楠[10]（2016）在《弓形虫棒状体蛋白ROP16与Lamin B1相互作用及功能研究》一文中研究指出目的弓形虫脑病是导致免疫功能缺陷病人重要死亡原因之一,弓形虫棒状体蛋白16(ROP16)可快速侵入宿主(人)细胞核内,本课题组前期鉴定出了与ROP16相互作用的人体核纤层蛋白Lami n B1。方法利用蛋白纯化技术纯化蛋白,进行pull-down实验,Lamin B1/HA截短体与ROP16/Flag共转染293T细胞进行免疫沉淀,Phos-tag技术检测磷酸化。划痕实验检测细胞的迁移能力,流式细胞术和CCK-8实验检测细胞凋亡增殖情况。结果实验证实ROP16与lamin B1结合,RROP16能够磷酸化核纤层蛋白Lamin B1且不影响LM NB1的表达量。Lamin B1Head部位T19被磷酸化。ROP16会影响细胞的迁移能力,ROP16促进SH-SY5Y细胞的凋亡,对增殖而无明显影响。ROP16与lamin B1结合后使神经元细胞核仁增多、核膜出现空泡、大量微管成簇排列。ROP16对诱导前SH-SY5Y细胞形态未见显着影响,纺锤体出现多极化现象。结论通过研究,我们证明ROP16可以与Lamin B1结合并促进SH-SY5Y细胞Lamin B1的磷酸化(T19),并且可以促进SH-SY5Y细胞的迁移。(本文来源于《中华医学会第十五次全国医学遗传学学术会议暨中国医师协会医学遗传医师分会第一届全国学术会议暨2016年浙江省医学遗传学年会论文汇编》期刊2016-11-05）
棒状体蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本研究以田鼠巴贝斯虫基因组DNA为模板,扩增棒状体蛋白相关因子1(rhoptry-associated protein interacting factor 1,简称RAPIF1)基因,全长为771 bp,编码256 aa,编码蛋白的分子质量为29 kDa。利用多种数据库与生物信息学分析软件,对田鼠巴贝斯虫RAPIF1进行生物信息学分析,预测其亲水性/疏水性、跨膜区、信号肽、翻译后修饰位点、B淋巴细胞抗原表位,结果预示RAPIF1具有良好的亲水性。将RAPIF1的ORF插入表达载体pET-28a进行原核表达,重组蛋白rRAPIF1大小为37 kDa。制备rRAPIF1的多克隆抗体,Western blot结果显示,RAPIF1存在于虫体中,且rRAPIF1具有良好的反应原性,可有效区分田鼠巴贝斯虫阳性血清和阴性血清。本研究结果表明,RAPIF1预期可作为田鼠巴贝斯虫检测和疫苗制备的候选分子。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
棒状体蛋白论文参考文献
[1].徐婷,王聪,罗庆礼,沈继龙.流行于我国的优势基因型弓形虫株毒力及其棒状体蛋白ROP5和ROP18蛋白序列差异分析[J].安徽医科大学学报.2018
[2].蒋艺佳,肖雯雯,聂政,敖阳思琦,李慕晓.田鼠巴贝斯虫棒状体蛋白相关因子1基因的原核表达及其特性研究[J].中国动物传染病学报.2019
[3].徐婷.流行我国优势基因型弓形虫株毒力及其棒状体蛋白ROP5和ROP18蛋白序列差异研究[D].安徽医科大学.2018
[4].马荣,孙慧,闫歌,魏庆宽.弓形虫棒状体蛋白及其核酸疫苗研究现状[J].中国血吸虫病防治杂志.2018
[5].刘荣荣,张晓磊,张进顺.刚地弓形虫棒状体蛋白18及其作为基因工程疫苗候选分子研究进展[J].动物医学进展.2017
[6].高德俊,常爽,单秀梅,范巍巍,毛佐华.刚地弓形虫棒状体蛋白ROP16对小鼠脑神经细胞凋亡的影响[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2017
[7].刘荣荣,张进顺,张晓磊,刘楠,贾晓晖.刚地弓形虫棒状体蛋白10的生物信息学分析[J].中国病原生物学杂志.2017
[8].程正阳,苏蕊,张贤,李叶林,朱万博.弓形虫棒状体蛋白ROP18的优化表达[J].中国病原生物学杂志.2017
[9].杨春利,蔡玉春,陈家旭.巴贝虫棒状体蛋白的研究进展[J].中国血吸虫病防治杂志.2017
[10].高德俊,范巍巍,单秀梅,常爽,姜楠.弓形虫棒状体蛋白ROP16与LaminB1相互作用及功能研究[C].中华医学会第十五次全国医学遗传学学术会议暨中国医师协会医学遗传医师分会第一届全国学术会议暨2016年浙江省医学遗传学年会论文汇编.2016
论文知识图
