安柏晶牟书才(黑龙江仁合堂药业有限责任公司黑龙江牡丹江157011）
【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）44-0194-02
【摘要】目的建立反相高效液相色谱法测定桂枝茯苓颗粒中丹皮酚含量测定。方法采用超场提取法制备供试品溶液，以C18柱作为色谱柱，乙腈-水-冰醋酸（35：65：2）为流动相；检测波长：274nm。样品平均加样回收率为98.79%（n=6）,RSD值为1.20%,重复性试验RSD值丹皮酚为1.21%(n=6)。结论方法简便，准确，重复性好，可作排毒清脂片的含量测定方法。
【关键词】桂枝茯苓颗粒高效液相色谱法含量测定
1仪器、试药与样品
1.1仪器：安捷伦1200高效液相色谱仪、紫外检测器。
1.2试药：丹皮酚（批号：0708-9704）由中国药品生物制品检定所提供；乙腈、冰醋酸均为（色谱纯），甲醇为（分析纯），水（纯净水）。
1.3样品：自制三批。
2方法与结果
2.1样品的制备取本品适量，研细，精密称取0.4g，精密加100ml甲醇，称定重量，超声提取30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，即得。
2.2阴性样品溶液的制备按质量标准处方比例同法制备不含牡丹皮的阴性样品溶液。
2.3对照品溶液的制备精密称取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成每1ml含丹皮酚15μg的溶液，即得。
2.4检测波长的选择取上述对照溶液，用紫外可见分光光度计在波长190-500nm处扫描，结果，丹皮酚在274nm处有吸收峰，故检测波长为274nm。
2.5色谱条件色谱柱：C18柱(岛津VP-ODSC18150×4.6mm)，流动相：乙腈-水-冰醋酸（35：65：2）为流动相；流速：1.0ml/min，柱温：25℃；检测波长：274nm。
2.6线性关系考察精密称取大黄素对照品10.06mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取1μl、2μl、4μl、8μl、16μl，分别置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，分别进样10μl，测定，以峰面积积分A对大黄素进样量C(μg)进行回归分析，得回归方程：C=5.131×10-8A+2.976×10-3r=1.000。表明大黄素进样量在0.014～0.224μg范围内线性关系良好。
2.7精密度试验分别取大丹酚对照品溶液（15.0924μg/ml），重复进样5次，记录峰面积，RSD分别为：0.19%，表明精密度较好。
2.8重复性试验按供试品溶液的制备方法，对同一批样品分别制备6份供试品溶液，依法测定，计算丹皮酚的含量及相对标准偏差，RSD分别为：1.08%、1.44%
2.9稳定性实验取同一批号样品溶液，分别在放置0、4、8、12h后，依法操作，测定峰面积A，RSD分别为1.76%，表明稳定性较好。
2.10加样回收率实验取批号20100601样品5袋，研细，取0.2g，精密称定，共计5份，分别精密加入1.164mg/ml的丹皮酚对照品溶液0.5ml,按“含量测定”项下试验，测定加标样品中丹皮酚含量，计算，得出6次平均回收率为98.79%，表明方法回收率较好。
2.11样品测定按正文含量测定方法依法测定本品，以峰面积按外标一点法计算样品中丹皮酚的含量，结果每袋丹皮酚的含量平均为8.64（mg/袋），RSD为1.25%，含量较可靠稳定。
3讨论与小结
根据2010年版中国药典一部牡丹皮药材项下的要求（分别采用紫外分光光度法和HPLC法），牡丹皮药材含丹皮酚不得少于1.2%。本品每袋含牡丹皮药材0.72g，理论最低丹皮酚含量为不得低于8.64mg/袋，乙醇提取丹皮酚浸出率为85%，浓缩中丹皮酚收得率控制在90%，颗粒干燥工艺丹皮酚的收得率控制在90%,因此成品中丹皮酚含量限应确定为：8.64mg/袋×85%×90%×90%=5.95mg/袋，因此将丹皮酚含量限定为不得低于6mg/袋。占理论药材最低含量的69.4%。
参考文献
[1]国家药典委员会编.中华人民共和国药典,2010.