石蒜凝集素论文_何俊平,陈发棣,陈素梅,房伟民,缪恒彬

导读:本文包含了石蒜凝集素论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:石蒜,黄花,凝集素,荧光,光谱,化学,活性。

石蒜凝集素论文文献综述

何俊平,陈发棣,陈素梅,房伟民,缪恒彬[1](2009)在《石蒜凝集素基因转化切花菊及抗蚜性鉴定》一文中研究指出以切花菊‘神马’叶片为外植体,采用根癌农杆菌介导法将长筒石蒜凝集素基因LLA导入菊花。结果表明,‘神马’叶片对潮霉素(Hyg)十分敏感,叶盘再生筛选以8~10 mg.L-1为宜,生根筛选以18 mg.L-1为宜;羧苄青霉素抑菌浓度早期以500 mg.L-1为宜,后期以250~300 mg.L-1为宜。Hyg抗性再生植株经PCR、RT-PCR检测初步证实外源基因已转入7个转化株系的植物基因组DNA中并发生转录。转基因植株幼苗人工接种蚜虫实验表明,不同转化株系的抗蚜性差异较大,蚜口密度抑制率为12.2%~76.8%不等,平均蚜口密度抑制率为41.8%。(本文来源于《西北植物学报》期刊2009年11期)

孔杨,彭沥,陈胜,田勤,鲍锦库[2](2008)在《温度、酸碱度和变性剂对黄花石蒜凝集素活性和构象的影响》一文中研究指出采用荧光光谱研究了不同温度、pH和变性剂对黄花石蒜凝集素(Lycoris aureaagglu-tinin,简称LAA)凝血活性和分子构象的变化关系,结果表明:LAA具有较强的温度和酸碱度的耐受性,经过3种变性剂的处理都能使LAA分子构象发生不同程度的变化并导致活性的丧失,浓度为6 mol/L的盐酸胍和脲,20 mmol/L的SDS可以使LAA完全丧失凝血活性,荧光光谱的变化表明了这种变性过程具有阶段性.(本文来源于《四川大学学报(自然科学版)》期刊2008年06期)

刘金枝,田勤,徐小超,李建,鲍锦库[3](2008)在《氨基酸修饰及荧光光谱分析研究黄花石蒜凝集素生物学活性与构象的关系》一文中研究指出本文通过对黄花石蒜凝集素(Lycoris aurea Agglutinin,LAA)进行特殊氨基酸的化学修饰,显示一个LAA分子一共有8个色氨酸分子,其中有3个位于分子表面或近表面,Trp、Tyr和Ser/Thr不是LAA凝集活性所必需的氨基酸,而Asp/Glu的羧基和凝血活性密切相关,对其修饰后导致凝血活性丧失50%。通过荧光淬灭的方法对LAA分子中色氨酸所处微环境进行了研究。结果显示中性淬灭剂丙烯酰胺对LAA分子中色氨酸的淬灭作用最强可以淬灭100%的色氨酸荧光,其次是离子型淬灭剂碘化钾,能淬灭62.9%的色氨酸荧光,而氯化铯对LAA色氨酸的淬灭最弱,几乎不能淬灭LAA的荧光。(本文来源于《天然产物研究与开发》期刊2008年04期)

刘继伟,刘震,吴传芳,安洁,徐宇[4](2006)在《黄花石蒜甘露糖结合凝集素的结构与性质研究》一文中研究指出黄花石蒜凝集素(Lycoris aurea agglutinin,LAA)是从石蒜科植物黄花石蒜球茎中分离纯化得到的由四个12KD相同亚基组成具有抗艾滋病毒(HIV)活性的单子叶甘露糖结合凝集素。(本文来源于《第十次中国生物物理学术大会论文摘要集》期刊2006-05-01)

荣艳珍[5](2005)在《黄花石蒜凝集素的纯化及性质研究》一文中研究指出黄花石蒜球茎经匀浆、浸取、硫酸铵分级沉淀、阴离子交换柱(DEAE-Sepharose)和Sephacryl S-200分子筛层析得到经SDS-PAGE检测为单一蛋白带的黄花石蒜凝集素(Lycoris chinensis agglutinin,LCA)纯品。经SephacrylS-200凝胶过滤和SDS-PAGE测得其表观分子量为48KD,亚基分子量为12KD,表明LCA是由四个相同亚基组成的蛋白。LCA只凝集兔血细胞,其凝集兔血细胞效价为0.95ug/ml,但是对鸡血及人A、B、AB、O型血均不凝集。其凝血活性部分依赖于金属离子Ca~(2+)、Mg~(2+)。糖抑制实验结果表明,甘露聚糖是LCA的专一性抑制糖,其次是甘露糖。 295nm激发时,天然LCA的最大荧光发射峰在337.2nm处,比游离Trp的最大荧光发射峰348nm蓝移了10.8nm,说明Trp周围的极性较弱,并未完全暴露于周围溶剂中。280nm激发时,其最大荧光发射峰也在337.2nm处,荧光强度增加,说明LCA的内源荧光发生了从Tyr到Trp的能量转移。 研究了不同温度、pH和变性剂对LCA凝血活性和荧光光谱的变化,当温度达80℃以上时,活性开始下降,100℃处理20分钟,LCA仍保留60%活性;pH为4—12对活性的影响不大,pH为2时,完全丧失活性;温度的升高和pH的改变对荧光光谱影响不大。表明LCA对热,酸碱具有较强的耐受性。 用荧光光谱法研究了叁种变性剂脲、盐酸胍、SDS在不同浓度下构象的变化和凝血活性的变化情况。盐酸胍变性时,LCA荧光最大发射波长和荧光强度随盐酸胍浓度的增大而逐渐增大,其后随盐酸胍浓度的逐渐增大反而逐渐减小。(本文来源于《四川大学》期刊2005-04-30)

常丽青[6](2005)在《单子叶石蒜科植物黄花石蒜甘露糖结合凝集素基因的克隆及序列分析;风雨花凝集素基因转化烟草及其在转基因烟草中的表达》一文中研究指出黄花石蒜凝集素(Lycoris chinensis Agglutinin, LCA)是来源于石蒜科的具有多重生物学活性的甘露糖结合蛋白,属于单子叶甘露糖结合凝集素。这类凝集素由于具有独特的糖结合特异性、逆转录病毒抑制活性和保护农作物免受昆虫和线虫攻击而引起人们浓厚的兴趣。本文采用同源克隆的方法,通过对黄花石蒜球茎RNA的提取,反转录成cDNA,从Genbank上比较已登录的石蒜科凝集素的序列,找出其保守序列,并结合软件设计了简并引物,进行3’RACE末端快速扩增,得到了3’端的部分序列(序列号为AY690318),序列长为516bp,然后根据已得到的序列设计特异性引物,应用在cDNA的3’端随机添加若干PolyA的方法,在cDNA模板3’端加上PolyA,再以此为模板进行PCR,从而克隆得到了黄花石蒜5’端的部分序列(序列号为AY763111),序列长为411bp,将3’与5’序列合并,就能获得cDNA全长序列(序列号为AY763112)。 以获得的全长cDNA序列和推导出的氨基酸序列与石蒜科其他植物凝集素在Genbank中的Blast上进行比较,可知黄花石蒜的全长cDNA序列由683个核苷酸组成,开放阅读框长486bp,编码162个氨基酸,起始密码子位于第37-39bp,终止密码子位于在523-525bp处,在起始密码子上游有一个由36个碱基组成的5’非编码区:在终止密码子下游有一个由141个碱基组成的3’非编码区,包括两个加poly(A)信号和一段真核生物mRNA所特有的poly(A)序列。通过序列的测定,发现LCA基因均编码前体蛋白:含有信号肽序列、成熟蛋白序列和C-末端剪切序列。该成熟蛋白由109个氨基酸组成,分子量为12.1KD。(本文来源于《四川大学》期刊2005-04-30)

常丽青,吴传芳,吕鸿周,刘超,顾莹[7](2005)在《红花石蒜球茎凝集素的纯化及部分性质》一文中研究指出石蒜科植物红花石蒜(Lycorisradiata)球茎经生理盐水浸取、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose和SephacrylS-100分子筛层析得到石蒜凝集素(L. radiataagglutinin, LRA).经SDS-PAGE检测为单一蛋白带,亚基相对分子量Mr为12×103,SephacrylS-100凝胶过滤测定Mr约为45×103,表明LRA是由4个相同亚基组成的蛋白.LRA能凝集兔红细胞和大肠杆菌,最低凝集浓度分别为0. 95μg/mL和1. 9μg/mL;LRA还能凝集啤酒酵母细胞.糖抑制实验显示,甘露聚糖和甲状腺球蛋白能有效抑制LRA的凝血活性.促淋巴细胞有丝分裂试验结果表明,LRA对外周血淋巴细胞具有很强的促有丝分裂能力;同时,LRA能有效地降低II型人类单纯疱疹病毒(HSV-II)对Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)的感染,ρ(IC50 ) =5~10μg/mL之间,并且在500μg/mL时对正常Vero细胞无细胞毒性. 图1表6参15(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2005年02期)

赵秀云[8](2003)在《天南星凝集素和石蒜凝集素基因的克隆及抗虫研究》一文中研究指出利用基因工程培育抗病虫作物是抗性育种重要的现代化手段。研究表明一些植物凝集素对多种害虫尤其是对同翅目类害虫有较强的抗性。为了更多的对植物凝集素基因进行研究,以天南星和石蒜为材料,利用RACE-PCR克隆技术,成功克隆出了它们的凝集素基因。通过相关的生物信息学分析,发现这两个基因的核苷酸序列及其推导出的氨基酸序列与石蒜科、兰科以及天南星科其它植物的凝集素基因有很高的同源性,为甘露糖特异结合的凝集素基因。为了研究天南星凝集素AHA的功能,构建了AHA的原核表达体系。将编码天南星凝集素成熟蛋白的基因序列构建到了原核表达载体pQE-30中,通过转化大肠杆菌M15菌株,在IPTG的诱导下表达出了目的蛋白,并对目的蛋白进行了纯化。将纯化的蛋白加入到人工饲养液中饲喂蚜虫,发现纯化的天南星凝集素蛋白有抗虫活性,能抑制蚜虫的生存和繁殖。为了研究天南星凝集素基因在利用基因工程技术培育抗虫转基因植物中的潜在应用价值,构建了含天南星凝集素基因(aha)的植物表达载体pBI121-AHA,利用冻融法将载体导入根癌农杆菌菌株EHA105中。采用农杆菌介导的烟草叶盘转化法,将aha转入烟草中,在诱导生根移栽后对烟草植株进行了一系列的分子检测。并对部分PCR阳性植株进行了Southern blot和Northern blot杂交检测。Southern blot杂交结果显示天南星凝集素基因已经整合到了烟草的基因组中,Northern blot结果表明转基因烟草成功表达了天南星凝集素基因。对表达AHA的转基因植株的抗虫(蚜虫)分析表明,转基因植株对蚜虫具有明显抗性,能有效抑制蚜虫的生存和繁殖。通过研究,证实了天南星凝集素对同翅目类的害虫如蚜虫具有抗性。植物凝集素基因是一类有广阔应用价值的抗虫基因。研究结果表明通过转植物凝集素基因的途径得到抗虫性的一些植物品种是可行的。(本文来源于《复旦大学》期刊2003-04-25)

吴传芳[9](2003)在《1.石蒜凝集素的纯化、性质及构象研究 2.单子叶石蒜科植物朱顶红和风雨花甘露糖结合凝集素基因的克隆及序列分析》一文中研究指出本文对石蒜凝集素的研究主要包括纯化、性质、活性以及结构几个方面。石蒜(Lycoris radiaca)球茎经匀浆、浸取、硫酸铵分级沉淀得到粗品,将粗品过阳离子交换柱(CM-Sepharose)、阴离子交换柱(DEAE-Sepharose)和SephacrylS-100分子筛层析得到凝集素纯品。经SDS-PAGE检测为单一蛋白带,亚基分子量为12KD,SephacrylS-100凝胶过滤测得其表观分子量为45KD,表明LRA是由四个相同亚基组成的蛋白。LRA能凝集兔血细胞和大肠杆菌,其凝集兔血细胞和大肠杆菌细胞的效价分别为0.95 ug/mL和1.9ug/mL,对外周血淋巴细胞具有很强的促有丝分裂能力;糖抑制实验结果表明,甘露聚糖和甲状腺球蛋白能抑制LRA的凝血活性;对酵母细胞的凝集实验表明,LRA能凝集啤酒酵母细胞;在抗病毒活性方面,LRA能有效地降低Ⅱ型人类单纯疱疹病毒(HSV-Ⅱ)对Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)的感染,在500ug/mL时对正常Vero细胞无细胞毒性,IC_(50)=5~10ug/mL之间;在抗爱滋病病毒实验中,LRA能有效降低HIV-1和HIV-2对HT-4和CEM细胞的感染,LRA对HIV-1的半抑制浓度EC_(50)分别为0.43ug/mL和0.79ug/mL,对HIV-2的EC_(50)分别为0.60ug/mL和0.59ug/mL,而LRA对HT-4和CEM的半数细胞毒性浓度为71ug/mL,表明LRA是一种有效的抗病毒蛋白。 LRA的远紫外圆二色谱显示222nm处的单一负峰,208nm和238nm处的肩,此时的LRA分子是一种特异性的高β-折叠蛋白质。LRA的荧光光谱研究表明在激发光波长为280nm时,其最大荧光发射峰在338nm处,荧光光谱未见有酪氨酸(Tyr)残基的发射峰,表明Tyr残基的荧光基本上通过能量转移到TrP上,使荧光强度增强,在激发光谱为295nm时,其最大荧光发射峰338nm,比游离TrP的最大荧光发射峰(348lun)蓝移了近10nln,说明TrP周围的极性较弱,处于疏水的微环境。研究不同温度、PH和基团特异性化学修饰后LRA凝血活性和促淋巴细胞有丝分裂的变化、圆二色谱和荧光光谱的变化,当温度达80℃以上时,活性开始下降,到100℃时活性有60%保留:当pH为2时,活性保留50%,pH为4一12对活性的影响不大;用NBS修饰TrP后,T即的旦一叫睬基的破坏使活性完全丧失,表明TrP对凝血活性是至关重要的,Arg、Tyr、Glu、Asp被修饰后,LRA的凝血活性并未受到大的影响,但Tyr修饰后LRA的促有丝分裂活性降低.用DEPC对组氨酸的p一咪哇基进行特异化学修饰后,其凝血活性有明显的下降,表明p一咪哇基是凝血活性的必需基团。而圆二色谱的研究表明结构的变化先于活性的变化,先是结构开始变化,但活性中心结构并未破坏,接着结构的进一步变化使活性逐步丧失,表明LRA具有较强的抗变性能力。研究了不同温度、pH和特异化学修饰后LRA的荧光光谱变化,发现温度的升高和PH的改变对荧光光谱影响不大,Tyr的修饰使荧光强度降低;丙烯酞胺、KI和氯化艳均能够使LRA的荧光淬灭,丙烯酞胺能淬灭93.6%色氨酸残基的荧光:用NEM做修饰剂测定LRA的可反应疏基数和总琉基数,发现LRA中不含琉基,用比色法测定LRA中TrP的含量为5.3%,用NBS修饰时,测得每分子LRA中含有12.4个TrP残基,即每个亚基约含3个TrP残基。(本文来源于《四川大学》期刊2003-04-20)

唐克轩,孙小芬,姚剑虹,庞永珍,费炯[10](2003)在《石蒜科和天南星科植物凝集素基因的克隆及抗虫性研究》一文中研究指出蚜虫等刺吸式口器类害虫严重危害我国农作物生产,如何有效防治蚜虫等害虫已成为我国农业生产上的重大问题之一。实践证明,利用抗性品种防治虫害是最经济、有效和安全的手段。通过常规育种方法培育抗性品种所需的时间较长,而采用生物技术叶将抗虫基因定向导入作物品种,在较短时间内即能提高品种抗虫性,并且不改变原有品种优良性状。生物技术作为对其他育种方法的补充,应用于品种改良是十分必要和有益的。最近的研究发现,石蒜科(Amaryllidaceae)植物雪化莲(Galanthus nivalis)凝集素(Galanthusnivalis agglutinin,GNA)和天南星科(Araceae)植物半夏(Pinellia ternata)凝集素(Pinellia ternataagglutinin,PTA)等对蚜虫具有较强的抗性(Hilder等,1995;黄大肪等,1997;潘映红等,1998),鉴于石蒜科植物凝集素之间和天南星科植物凝集素之间存在较高的保守性,我们开展了从石蒜科植(本文来源于《中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编》期刊2003-04-01)

石蒜凝集素论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

采用荧光光谱研究了不同温度、pH和变性剂对黄花石蒜凝集素(Lycoris aureaagglu-tinin,简称LAA)凝血活性和分子构象的变化关系,结果表明:LAA具有较强的温度和酸碱度的耐受性,经过3种变性剂的处理都能使LAA分子构象发生不同程度的变化并导致活性的丧失,浓度为6 mol/L的盐酸胍和脲,20 mmol/L的SDS可以使LAA完全丧失凝血活性,荧光光谱的变化表明了这种变性过程具有阶段性.

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

石蒜凝集素论文参考文献

[1].何俊平,陈发棣,陈素梅,房伟民,缪恒彬.石蒜凝集素基因转化切花菊及抗蚜性鉴定[J].西北植物学报.2009

[2].孔杨,彭沥,陈胜,田勤,鲍锦库.温度、酸碱度和变性剂对黄花石蒜凝集素活性和构象的影响[J].四川大学学报(自然科学版).2008

[3].刘金枝,田勤,徐小超,李建,鲍锦库.氨基酸修饰及荧光光谱分析研究黄花石蒜凝集素生物学活性与构象的关系[J].天然产物研究与开发.2008

[4].刘继伟,刘震,吴传芳,安洁,徐宇.黄花石蒜甘露糖结合凝集素的结构与性质研究[C].第十次中国生物物理学术大会论文摘要集.2006

[5].荣艳珍.黄花石蒜凝集素的纯化及性质研究[D].四川大学.2005

[6].常丽青.单子叶石蒜科植物黄花石蒜甘露糖结合凝集素基因的克隆及序列分析;风雨花凝集素基因转化烟草及其在转基因烟草中的表达[D].四川大学.2005

[7].常丽青,吴传芳,吕鸿周,刘超,顾莹.红花石蒜球茎凝集素的纯化及部分性质[J].应用与环境生物学报.2005

[8].赵秀云.天南星凝集素和石蒜凝集素基因的克隆及抗虫研究[D].复旦大学.2003

[9].吴传芳.1.石蒜凝集素的纯化、性质及构象研究 2.单子叶石蒜科植物朱顶红和风雨花甘露糖结合凝集素基因的克隆及序列分析[D].四川大学.2003

[10].唐克轩,孙小芬,姚剑虹,庞永珍,费炯.石蒜科和天南星科植物凝集素基因的克隆及抗虫性研究[C].中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编.2003

论文知识图

碘化钾对石蒜凝集素荧光淬灭图版Ⅰ PlateⅠ一12黄精凝集紊F19.4一12日(PCUI)成熟蛋...一11玉帘凝集素(ZCA)成熟蛋白序列与其它...一11.zG^蛋白二级结构预测’RAcE冥式PcR产物l%

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