真核基因表达论文_施剑,李艳明,方向东

导读:本文包含了真核基因表达论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:基因,诱导,蛋白质,顺式,细胞,表观,结构。

真核基因表达论文文献综述

施剑,李艳明,方向东[1](2017)在《长链非编码RNA通过细胞核高级结构调控真核基因表达及其临床意义》一文中研究指出长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类转录本长度超过200nt、不编码蛋白质的RNA。近年来,随着染色质构象捕获及转录组测序等技术的发展,lncRNA与染色质构象间的关系越来越受到重视。多项研究表明,lncRNA在基因调控网络中具有重要的作用,可通过影响细胞核高级结构的动态变化来调控真核基因的表达。因其广泛的基因调控功能及在肿瘤发生过程中的重要作用,lncRNA被认为是未来肿瘤临床诊断和预后判定的新型标志物之一。本文旨在介绍lncRNA改变细胞核高级结构从而调控关键基因表达的分子机制,并详细介绍lncRNA在肿瘤治疗中的临床意义。(本文来源于《遗传》期刊2017年03期)

张伟,付云,李翠萍,渡部终五[2](2014)在《红鳍东方鲀PPARγ真核基因表达载体构建及亚细胞定位研究》一文中研究指出[目的]旨在克隆红鳍东方鲀PPARγ基因的cDNA,并通过构建真核表达载体pCMV-3Tag-4A-PPARγ,分析myc-PPARγ融合蛋白在大鼠L6细胞的表达及亚细胞定位。[方法]利用RT-PCR技术克隆红鳍东方鲀PPARγ基因的cDNA,构建pCMV-3Tag-4A-PPARγ重组质粒,转染至大鼠L6细胞,共聚焦显微镜下观察myc-PPARγ的亚细胞定位。[结果]红鳍东方鲀PPARγ基因cDNA ORF全长1557 bp,共编码518个氨基酸,pCMV-3Tag-4A-PPARγ融合蛋白在大鼠L6细胞核中表达,为深入探讨鱼类PPARγ生物学功能奠定了基础。(本文来源于《现代农业科技》期刊2014年18期)

叶玲玲,刘红,李世崇,王启伟,蓝叁春[3](2014)在《一种新型的生物素诱导的真核基因表达调控系统的建立》一文中研究指出为建立一种适用于生物制药工业和基因治疗领域的基因表达调控系统,构建枯草芽胞杆菌生物素连接酶(BS-BirA)与转录激活结构域的融合蛋白,以其表达载体为调控载体;在弱化的CMV启动子上游连接BS-BirA特异的操纵子序列,获得响应载体,从而得到响应于生物素的真核基因表达调控系统BS-Biotin-On。以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因对该系统进行考察,结果表明,与现有的类似调控系统相比,该系统具有良好的诱导率;可通过调节培养体系中生物素的浓度,实现对目的基因表达水平快速、较高效的调节。上述结果表明,BS-Biotin-On系统可能为外源基因的调控表达提供新的选择。(本文来源于《生物工程学报》期刊2014年08期)

李晓霞,袁军,陈建苏[4](2013)在《真核基因重组Sox2及其在小鼠角膜基质细胞中的表达》一文中研究指出目的基因重组构建具有穿膜活性的核转录因子Sox2真核表达系统,将其转染至小鼠角膜基质细胞,检测其在小鼠角膜基质细胞中的表达。方法利用重迭延伸PCR法重组目的基因Sox2-PTD构建质粒,测序检测重组DNA序列是否克隆正确。确定正确序列后将其转染至小鼠角膜基质细胞。倒置显微镜下观察细胞生长情况,转染后约10d免疫荧光化学鉴定其表达。结果成功构建质粒PCDNA3.1-Sox2-PTD;4个转录因子测序结果显示:Sox2基因测序结果与基因模板序列100%一致;成功转染至小鼠角膜基质细胞中;荧光显微镜下观察可见,Sox2-PTD在细胞浆和细胞核内均有表达,主要分布在细胞核内。结论成功构建核转录因子的真核表达系统,可转染至小鼠角膜基质细胞并引起细胞形态和表型的变化,为真核重组外源蛋白诱导角膜基质细胞转化为多能干细胞奠定基础。(本文来源于《眼科新进展》期刊2013年06期)

聂玉敏,刘宏德,孙啸[5](2013)在《调控真核基因表达的非编码序列》一文中研究指出真核基因的表达是一个涉及从DNA转录到mRNA转录后加工和翻译后蛋白质修饰的复杂过程,真核生物的复杂性必然要求更为复杂和精确的表达调控机制,这也是真核基因组中有大量非编码序列存在的主要原因。在这些非编码序列中,顺式作用元件可以与反式作用因子相互作用于转录水平调控基因的表达,重复序列主要影响染色质的结构,内含子和非翻译区主要在转录后水平上调控基因的表达,而非编码RNA则调控基因表达的各个层次。文章就这些调控基因表达的非编码序列及它们的调控机制作简要的综述。(本文来源于《生物物理学报》期刊2013年04期)

亓合媛,张昭军,李雅娟,方向东[6](2011)在《染色质构象调控真核基因的表达》一文中研究指出真核基因的表达受到各种顺式调控元件、反式作用因子、染色质DNA以及组蛋白表观遗传修饰等多因素、多层次的调控。染色质叁维空间结构的变化在调控真核基因表达方面也发挥了至关重要的作用。染色质构象的变化一方面可以使增强子等调控元件与靶基因相互靠近,从而促进基因表达;同时也可能通过形成空间位阻结构阻碍调控元件作用于靶基因,抑制基因表达。虽然染色质结构变化调控真核基因表达的机制仍缺乏较为精确的分子模型,但在组蛋白修饰、核小体定位、染色体领域以及染色质间相互作用等表观遗传学研究中,已经发现有诸多证据支持染色质构象在真核基因表达调控中的重要地位。文章主要综述了染色质结构及其构象的变化等对真核基因表达调控的影响。(本文来源于《遗传》期刊2011年12期)

段小君[7](2011)在《真核基因的原核表达及分析》一文中研究指出利用原核细胞表达真核生物的蛋白质,是分子生物学研究的一个重要领域,也是获取大量纯化蛋白质、用于深入研究其性质及功能的有效途径之一。大肠杆菌表达系统完善,已被广泛用于外源基因的过量表达。本研究以大肠杆菌为表达体系,将12个来源不同的基因或融合基因,分别构建到不同细菌表达载体,转入细菌后,经IPTG诱导过量表达这些蛋白质,通过亲和层析纯化后用于分析鉴定。主要结果如下:1.通过PCR扩增目的基因几丁质酶(Chi)、禾谷镰刀菌特异单链抗体E1和E9叁个基因,以及几丁质酶和抗菌肽(MsrAl)分别与这两个抗体形成的Chie1、Chie9、MsrA1e1和MsrA1e9四个融合基因;霍乱毒素B亚基(CTB)分别与热休克多肽p277形成的单体、二聚体和叁聚体共叁个融合蛋白(CTB-p277、CTB-2p277和CTB-3p277);受赤霉菌毒素诱导的小麦基因AN和UN;将这12个基因的DNA酶切后,分别克隆到原核表达载体pET-22b,其中AN和UN基因构建到pGEX-6p-1载体。2.将上述载体转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导外源蛋白表达,优化表达条件。结果表明,培养细菌至浓度为OD600=0.6时,加入终浓度为1 mmol/L的异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,不同蛋白的最佳诱导表达温度和时间如下:几丁质酶、抗体E1和E9、CTB-p277、CTB-2p277、CTB-3p277、AN和UN在28℃诱导6h的效果最好;而Chie1和Chie9融合蛋白37℃诱导6 h的表达量最高,MsrA1e1和MsrA1e9融合蛋白仅需在37℃诱导表达2 h。3.原核表达的12个外源蛋白经SDS-PAGE电泳和Western Blot分析,其分子量大小与预期完全一致。尽管这些蛋白在细菌中诱导表达的产物主要为包涵体,但利用8mol/L尿素缓冲液溶解蛋白包涵体,再经亲和层析柱纯化后,获得了大量可溶性蛋白;对部分蛋白的功能分析表明,它们具有抑制赤霉病菌的活性。这些研究结果为进一步研究这些蛋白的特性和功能打下了基础。(本文来源于《华中农业大学》期刊2011-06-01)

卢银平,郭涛,祝建芳,刘朝,董继华[8](2009)在《通用表达型T载体的构建与真核基因的快速克隆表达》一文中研究指出目的:为简化PCR产物真核表达载体构建步骤,构建真核表达型T载体,并对其特性及表达效率进行分析。方法:限制性内切酶EcoRV酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与dTTP70℃退火,构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)和中国旱獭α干扰素基因(cwIFNA5)分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体,转化感受态细菌,挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果:外源基因EGFP和cwIFNA5克隆进该载体后可以进行高效表达,基因转染72h后,荧光显微镜观察到EGFP基因转染细胞荧光阳性率在80%以上,荧光强度高;病毒保护试验表明cwIFNA5转染细胞培养上清干扰素效价高达1:640。结论:本研究构建的表达型T载体可用于基因的克隆之外,还可以直接用于基因的高效表达作蛋白质功能分析。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2009年22期)

王悦冰,郎志宏,黄大昉[9](2008)在《内含子对真核基因表达调控的影响》一文中研究指出大多数真核基因都含有非编码的间隔序列——内含子,根据剪接机制的不同,可将内含子分为3类:真核mRNA内含子、自我剪接内含子和真核tRNA内含子。在多数情况下,真核mRNA内含子的存在可以提高基因的表达水平,因为其剪接过程会影响mRNA新陈代谢的多个阶段,包括转录、RNA编辑、pre-mRNA的加工、mRNA的出核运输、翻译和无义衰变等。真核mRNA内含子在真核生物基因表达调控中起着重要的作用,是转基因研究中提高外源基因表达的重要元件之一。就真核mRNA内含子的特性、剪接机制及其对真核基因表达调控的影响作一概述。(本文来源于《生物技术通报》期刊2008年04期)

施蕴渝,吴季辉[10](2006)在《与真核基因表达调控相关的系列蛋白质的溶液结构及其功能意义》一文中研究指出真核基因表达调控是生物学中的重大前沿问题,细胞的分化,肿瘤发生都与真核基因表达调控密切相关。真核基因表达调控发生在各种水平,包括转录因子与DNA的相互作用,mRNA剪切,染色体重塑,翻译起始,延伸,翻译后修饰等。近年来MicroRNA的发现,表明MicroRNA在真核基因表达调控中起重要作用。(本文来源于《第十次中国生物物理学术大会论文摘要集》期刊2006-05-01)

真核基因表达论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

[目的]旨在克隆红鳍东方鲀PPARγ基因的cDNA,并通过构建真核表达载体pCMV-3Tag-4A-PPARγ,分析myc-PPARγ融合蛋白在大鼠L6细胞的表达及亚细胞定位。[方法]利用RT-PCR技术克隆红鳍东方鲀PPARγ基因的cDNA,构建pCMV-3Tag-4A-PPARγ重组质粒,转染至大鼠L6细胞,共聚焦显微镜下观察myc-PPARγ的亚细胞定位。[结果]红鳍东方鲀PPARγ基因cDNA ORF全长1557 bp,共编码518个氨基酸,pCMV-3Tag-4A-PPARγ融合蛋白在大鼠L6细胞核中表达,为深入探讨鱼类PPARγ生物学功能奠定了基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

真核基因表达论文参考文献

[1].施剑,李艳明,方向东.长链非编码RNA通过细胞核高级结构调控真核基因表达及其临床意义[J].遗传.2017

[2].张伟,付云,李翠萍,渡部终五.红鳍东方鲀PPARγ真核基因表达载体构建及亚细胞定位研究[J].现代农业科技.2014

[3].叶玲玲,刘红,李世崇,王启伟,蓝叁春.一种新型的生物素诱导的真核基因表达调控系统的建立[J].生物工程学报.2014

[4].李晓霞,袁军,陈建苏.真核基因重组Sox2及其在小鼠角膜基质细胞中的表达[J].眼科新进展.2013

[5].聂玉敏,刘宏德,孙啸.调控真核基因表达的非编码序列[J].生物物理学报.2013

[6].亓合媛,张昭军,李雅娟,方向东.染色质构象调控真核基因的表达[J].遗传.2011

[7].段小君.真核基因的原核表达及分析[D].华中农业大学.2011

[8].卢银平,郭涛,祝建芳,刘朝,董继华.通用表达型T载体的构建与真核基因的快速克隆表达[J].实用医学杂志.2009

[9].王悦冰,郎志宏,黄大昉.内含子对真核基因表达调控的影响[J].生物技术通报.2008

[10].施蕴渝,吴季辉.与真核基因表达调控相关的系列蛋白质的溶液结构及其功能意义[C].第十次中国生物物理学术大会论文摘要集.2006

论文知识图

目的片段及酶切产物的琼脂糖凝胶电泳小鼠ES1,CES1,TGH基因的染色体定位...间接免疫荧光法检测目的蛋白在CHO细胞...抑制素真核表达质粒pEIGsl与pEIGsLvp...重组质粒pCI-neo-F的鉴定α诱导CCL2基因启动子的转录活性

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真核基因表达论文_施剑,李艳明,方向东
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