贵阳中医学院第一附属医院肛肠科贵州贵阳550002
摘要：目的：通过致痛模型，观察蜂珍膏的镇痛作用。方法：采用小鼠光照甩尾法，观察药物的镇痛作用；结果：蜂珍膏能显著提高小鼠对热刺激的痛阈值。结论：蜂珍膏具有较好的镇痛作用。
关键词：蜂珍膏；镇痛；甩尾法
肛门伤口疼痛是临床上比较棘手的问题，现代医学治疗伤口疼痛主要用口服或注射止痛药、镇静药、麻醉药等[1]，给药方法较复杂，且不能保证伤口处的药物浓度。通过中药外用，能使药物直接作用于局部，从而迅速持久地减轻疼痛。目前很多学者致力于这方面的研究，蜂珍膏是贵州省肛肠病医院经过多年的临床实践总结出的外用药膏。本方由蜂胶，灵芝等药物组成，共奏消肿止痛，生肌敛口，清热解毒之功效。本药膏为水溶性制剂，具有均匀、细腻、软滑、稠度适宜、性质稳定、无刺激性、易于涂布及组织细胞吸收等特点。
1材料与方法
1.1实验动物：昆明种小鼠45只（由贵阳医学院动物中心提供），体重20±2g，雌雄各半。
1.2实验用药：蜂珍膏（贵阳中医学院第一附属医院药剂科配制）、痔疮膏（国药准字Z42021920）、医用凡士林、生理盐水。
1.3实验器材：YLS-12A鼠尾光照测痛仪，小鼠固定器。
1.4方法与步骤
小鼠分为3组，每组15只，分别用蜂珍膏、痔疮膏、医用凡士林涂在鼠尾部（前中1/3处，约1cm宽）。将小鼠放入鼠固定器内，露出鼠尾然后紧固。待动物安静后，将尾部摆放在测痛仪光电控制探头中间的出光孔上，测定指示灯出现慢闪动，按“开始”键或踏下脚踏开关，计时开始，当鼠尾受热刺激疼痛摆动时，光源自动关闭，停止计时，锁定数据（痛阈值）并记录给药前后小鼠痛阈的变化。
2结果
注：N=15，基础痛阈及百分率用±s表示，P＜0.05
蜂珍膏组和痔疮膏组比较，P基础痛阈=0.074﹤0.05，P5分钟=0.013，P10分钟=0.037，P20分钟=0.049，P30分钟=0.038，P40分钟=0.048，均﹤0.05
蜂珍膏组和凡士林组比较，P基础痛阈=0.540﹥0.05，P5分钟=0.006，P10分钟=0.047，P20分钟=0.036，P30分钟=0.016，P40分钟=0.019，均﹤0.05
用药后痛觉反应时间（均值）-用药前痛觉反应时间（均值）
痛阈提高百分率（%）=×100%
用药前痛觉反应时间（均值）
统计结果用两均数比较，采用t检验。由上表可以看出，在用药后5分钟、10分钟各组均能提高小鼠痛阈。
3讨论
3.1实验原理
鼠尾光照甩尾镇痛方法是通过固定强度的光束，持续照射到鼠尾产生集热效应，使鼠尾局部温度升高从而产生疼痛。当灼热产生的疼痛超过动物能忍受的痛阈时，动物会以甩尾来回避疼痛，以甩尾作为判断痛阈改变的指标，是镇痛药物筛选的物理性致痛方法之一。[2]
3.2结论
甩尾法给药后5分钟痛阈均有提高，从数值看，给药后10分钟痛阈提高达到峰值，之后逐渐下降，胶灵膏组提高幅度最大。在小鼠光照甩尾法实验中，蜂珍膏能明显提高小鼠的痛阈值，并较痔疮膏提高的幅度大。在此实验中，凡士林也能使小鼠痛阈有所提高，可能是因为凡士林是油性物质，故在鼠尾表面起到隔热作用。
蜂珍膏由蜂胶、灵芝、珍珠粉、三七粉、黄柏、芒硝、香附、冰片组成。蜂胶、灵芝为君药，均能生肌、止痛。臣以三七粉活血化瘀、消肿止痛，黄柏清热燥湿、泻火解毒，加上珍珠粉生肌敛口。再佐以芒硝清热消肿止痛，香附理气止痛，冰片清热解毒、防腐生肌。全方共奏消肿止痛，生肌敛口，清热解毒之功效。
现代药理学研究认为蜂胶的主要成分是黄酮类化合物，它主要具有镇痛[3]、促进组织细胞再生、抗病毒[4]、广谱抗菌、抗炎、增强免疫功能等作用。灵芝的主要成分是有机锗和高分子多糖体，有机锗具有止痛作用，能刺激人体内啡肽产生止痛效果。灵芝改善血液循环、增强血红蛋白载氧能力，使组织、细胞获得较多氧和营养的作用[5]。动物的急性及亚急性试验均表明，灵芝的毒性极低[6]。冰片含有右旋龙脑，局部应用对感觉神经有轻微刺激，有一定的止痛及温和的防腐作用。较高浓度（0.5%）对大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌及部分致病性皮肤真菌等有抑制作用。三七粉含有三七皂甙、槲皮素、槲皮甙、β-谷甾醇。有抗炎及镇痛、镇静作用。黄柏含小檗碱、黄柏碱等多种生物碱。其对痢疾杆菌、结核杆菌、伤寒杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌等多种致病细菌均有抑制作用。[7]
4体会与展望
在鼠尾光照甩尾法实验中，鼠尾部涂以各种药物后，应该在数分钟后将其擦掉，如果直接测痛阈，药物可能会起到一定的隔热作用而影响实验结果。测痛阈时应待鼠尾安静放置于测痛仪上后再进行测量，以排除因小鼠躁动而甩尾的错误值。
研究蜂珍膏的镇痛作用还有很多方法，如镇痛的另一经典方法热板法，还有化学性致痛模型等。在今后的工作中，我们会从更多方面进行研究，力求更加全面的了解蜂珍膏的作用机制，为其推广应用奠定良好的理论基础。
参考文献：
[1]肛肠病术后疼痛机理及治疗现状[J].辽宁中医学院学报，2003，11（4），384-385.
[2]叶春玲，钟玲.药理学实验教程[M].暨南大学出版社，2007，78.
[3]张波，王东风，王爽．蜂胶总黄舅镇痛作用及机翻研究[J]．中国药房，2005，16（19）：1458.
[4]景士杰.蜂胶的药理作用[J].黑龙江医药，2005（11）：15.
[5]陈国良.灵芝及食用菌的保健功能[J].国际农产品贸易，2004（90）：38—43.
[6]刘美琴，李建中，孔繁祚.灵芝多糖的研究进展[J].微生物学报，1998，25（3）：173—175.]
[7]雷载权.中药学[M].上海科学技术出版社，1995，272.188.62.