Caveolin-1在EMCV感染宿主细胞中的作用

论文摘要

脑心肌炎病毒（EMCV）是一种重要的人畜共患病病原,但其致病机制目前尚不明确,小窝蛋白-1（Caveolin-1）可介导多种病毒感染宿主细胞。为了探究Caveolin-1在EMCV感染宿主细胞中的作用,该实验检测了EMCV感染不同时间段He La细胞中Caveolin-1的表达量,对He La细胞和HEK-293细胞中Caveolin-1进行瞬时过表达实验、瞬时沉默实验和Caveolin-1依赖型内吞途径抑制实验,然后观察EMCV对He La细胞和HEK-293细胞的感染情况。结果发现, HeLa细胞中Caveolin-1表达量会随病毒感染时间的增加而升高;在Caveolin-1瞬时过表达实验结果中,病毒滴度、病毒拷贝数、病毒蛋白检测结果均显示,上调Caveolin-1促进EMCV感染宿主细胞, Caveolin-1瞬时沉默实验和Caveolin-1依赖型内吞途径抑制实验的结果则显示,下调Caveolin-1或抑制Caveolin-1依赖型内吞途径可抑制EMCV感染宿主细胞。上述现象提示, EMCV可通过Caveolin-1依赖型内吞途径感染宿主细胞。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 细胞及毒株
•   1.2 主要仪器与试剂
•   1.3 EMCV感染不同时间段Caveolin-1表达水平检测
•   1.4 Caveolin-1瞬时过表达后EMCV攻毒
•     1.4.1 Caveolin-1真核表达载体构建
•     1.4.2 Caveolin-1瞬时过表达
•     1.4.3 Caveolin-1瞬时过表达后接毒
•   1.5 Caveolin-1瞬时沉默后EMCV攻毒
•     1.5.1 Caveolin-1瞬时沉默
•     1.5.2 Caveolin-1瞬时沉默后接毒
•   1.6 特异性抑制实验
•     1.6.1 特异性抑制剂浓度筛选
•     1.6.2 特异性抑制剂作用后接毒
•   1.7 Caveolin-1在HEK-293细胞中作用的探究
•   1.8 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 EMCV感染不同时间段Caveolin-1表达水平检测结果
•   2.2 Caveolin-1过表达对EMCV感染的影响
•     2.2.1 Caveolin-1真核表达载体构建结果
•     2.2.2 HeLa细胞中Caveolin-1过表达效果检测
•     2.2.3 Caveolin-1过表达后EMCV攻毒实验
•   2.3 Caveolin-1瞬时沉默对EMCV感染的影响
•     2.3.1 HeLa细胞中Caveolin-1瞬时沉默结果检测
•     2.3.2 Caveolin-1瞬时沉默后EMCV攻毒实验
•   2.4 Caveolin-1内吞途径特异性抑制剂对EMCV感染的影响
•     2.4.1 Nystatin适宜浓度筛选
•     2.4.2 Nystatin对EMCV感染的影响
•   2.5 Caveolin-1对EMCV感染HEK-293细胞的作用
•     2.5.1 上调和下调Caveolin-1对EMCV感染HEK-293的影响
•     2.5.2 Nystatin对EMCV感染的影响
• 3 分析与讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘杨,赵克学,许淑娟,刘翊忠,李琼毅

关键词: 小窝蛋白,脑心肌炎病毒,人宫颈癌细胞,人胚肾细胞

来源: 中国细胞生物学学报 2019年12期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学,基础医学

单位: 西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室,西北民族大学生命科学与工程学院

基金: 国家自然科学基金(批准号:31702234,31460665),中央专项研究生科研创新项目(批准号:Yxm2018146),教育部“创新团队发展计划”(批准号:IRT_17R88)资助的课题~~

分类号: R373

页码: 2253-2262

总页数: 10

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