导读:本文包含了非纯培养物论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:非纯培养物,蛋白酶,基因克隆,降落PCR
非纯培养物论文文献综述
葛琴雅,唐成康,唐建华,范兆心,张义正[1]（2006）在《非纯培养物细菌蛋白酶DNA片段的克隆与表达(英文)》一文中研究指出为了构建更多的蛋白酶基因工程菌,以及进行蛋白酶基因的直接进化研究,从非纯培养细菌总DNA中扩增各种编码蛋白酶的DNA片段.根据MEROPS和GenBank数据库中的枯草杆菌类蛋白酶的编码区和成熟肽编码序列设计并合成了10条引物.富集培养胞外蛋白酶产生菌并提取了12个总DNA样品,分别用每对引物在降落PCR (TouchdownPCR, TD-PCR)条件下进行蛋白酶编码序列的扩增.选择了19个长800 ~1 200 bp的扩增片段测序,其结果为: 8个是蛋白酶DNA片段,它们应属于4种不同的蛋白酶基因序列;同一对引物扩增到的基因序列差异性可达到32%,说明只使用基于已知序列的PCR方法从混合菌中获得新蛋白酶基因是可行的.将克隆到的1个与碱性蛋白酶E (GenBank No.AJ539133)的编码区99%相似的蛋白酶DNA片段插入pTWIN1载体,在大肠杆菌ER2566中进行表达.结果表明,表达的成熟蛋白酶可分泌到培养基中,能在牛奶平板上产生水解圈,对大肠杆菌有致死作用.图5表3参14(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2006年04期）
葛琴雅[2]（2005）在《非纯培养物细菌蛋白酶DNA的克隆与表达》一文中研究指出蛋白酶在细胞的新陈代谢中起着重要的作用,并被人类广泛应用于洗涤剂、食品、医药、纺织、皮革、垃圾处理等领域,目前已有大量蛋白酶基因被克隆。本室在已有的研究中成功地克隆到溶栓蛋白酶、脱毛蛋白酶以及胶原蛋白酶等基因。为了构建更多的基因工程菌,同时也为了进行蛋白酶基因的直接进化研究,以便获得具有新特性的蛋白酶基因,因此开展了本论文的研究工作,期望能从非纯培养细菌中获得各种蛋白酶DNA片段。 根据蛋白酶数据库MEROPS已作的蛋白酶家族氨基酸联配图,从丝氨酸蛋白酶S8家族中选择具有代表性的枯草杆菌类蛋白酶,从GenBank中获取相应的DNA序列,设计并合成了10条引物。 从自然界先后采集了21份样品,使用脱脂牛奶平板富集所有的胞外蛋白酶产生菌,将它们混合培养并提取了12个总DNA。用6对引物在降落PCR(Touchdown PCR,TD-PCR)条件下对12个总DNA样品分别进行了蛋白酶编码序列的扩增,获得47个片段。选取19个800-1200bp长的扩增片段进行测序,测序结果及同源性分析显示:8个为蛋白酶DNA片段;3个能在数据库找到同源但非蛋白酶基因序列;其余8个在数据库中没有找到同源基因。 对8个蛋白酶片段编码序列的进一步分析发现,它们实际上是4种不同的蛋白酶DNA序列。其中有同1对引物扩增得到的DNA序列差异性达到32%,说(本文来源于《四川大学》期刊2005-05-01）
非纯培养物论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
蛋白酶在细胞的新陈代谢中起着重要的作用,并被人类广泛应用于洗涤剂、食品、医药、纺织、皮革、垃圾处理等领域,目前已有大量蛋白酶基因被克隆。本室在已有的研究中成功地克隆到溶栓蛋白酶、脱毛蛋白酶以及胶原蛋白酶等基因。为了构建更多的基因工程菌,同时也为了进行蛋白酶基因的直接进化研究,以便获得具有新特性的蛋白酶基因,因此开展了本论文的研究工作,期望能从非纯培养细菌中获得各种蛋白酶DNA片段。 根据蛋白酶数据库MEROPS已作的蛋白酶家族氨基酸联配图,从丝氨酸蛋白酶S8家族中选择具有代表性的枯草杆菌类蛋白酶,从GenBank中获取相应的DNA序列,设计并合成了10条引物。 从自然界先后采集了21份样品,使用脱脂牛奶平板富集所有的胞外蛋白酶产生菌,将它们混合培养并提取了12个总DNA。用6对引物在降落PCR(Touchdown PCR,TD-PCR)条件下对12个总DNA样品分别进行了蛋白酶编码序列的扩增,获得47个片段。选取19个800-1200bp长的扩增片段进行测序,测序结果及同源性分析显示:8个为蛋白酶DNA片段;3个能在数据库找到同源但非蛋白酶基因序列;其余8个在数据库中没有找到同源基因。 对8个蛋白酶片段编码序列的进一步分析发现,它们实际上是4种不同的蛋白酶DNA序列。其中有同1对引物扩增得到的DNA序列差异性达到32%,说
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
非纯培养物论文参考文献
[1].葛琴雅,唐成康,唐建华,范兆心,张义正.非纯培养物细菌蛋白酶DNA片段的克隆与表达(英文)[J].应用与环境生物学报.2006
[2].葛琴雅.非纯培养物细菌蛋白酶DNA的克隆与表达[D].四川大学.2005