解螺旋酶基因论文_金太成,李华,周波,杨丽萍

导读:本文包含了解螺旋酶基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:螺旋,棉铃虫,病毒,基因,沙打旺,拟南芥,杆状。

解螺旋酶基因论文文献综述

金太成,李华,周波,杨丽萍[1](2016)在《沙打旺DEAD-box RNA解螺旋酶基因的克隆与功能分析》一文中研究指出植物体内解螺旋酶对干旱、低温、高盐等非生物胁迫会产生应答。然而,很多具体的机制并不清楚。研究利用RACE实验方法从豆科牧草沙打旺(Astragalus adsurgens)中分离到一个DEAD-box解螺旋酶基因AH1,它与豌豆解螺旋酶基因PDH45及苜蓿解螺旋酶基因MH1具有高度同源性。外源基因洋葱(Allium cepa)表皮细胞瞬时表达实验证明AH1蛋白定位在细胞核内。Real-time PCR实验证明AH1基因表达对干旱及盐胁迫具有明显响应,对低温不敏感。Northern杂交试验表明AH1转基因拟南芥体内DREB转录因子基因At DREB 2A表达升高,生理实验表明AH1转基因拟南芥可溶糖等渗透调节物质含量显着累积且对干旱及盐胁迫耐受力增加。(本文来源于《分子植物育种》期刊2016年08期)

朱东姿[2](2012)在《AtDEAHb3基因编码DEAH-box RNA解螺旋酶参与拟南芥雌配子体的发育》一文中研究指出雌配子体的发育是植物有性生殖过程的重要阶段,是植物受精和种子形成的前提,直接影响到作物的产量和品质。研究雌配子体发育调控的分子机制,具有重要的理论意义和应用价值。RNA解旋酶参与基因转录、各种前体RNA的加工、成熟、转运、翻译起始及核糖体装配等诸多细胞学过程,在生物发育过程中发挥重要作用。拟南芥基因组中包含100多个RNA解旋酶基因,但目前只有少数基因的功能得到验证。相关研究发现,RNA解旋酶参与植物的多个生理过程,包括生长发育调控和逆境胁迫响应等。本研究中鉴定到一个拟南芥T-DNA插入突变体,杂合突变体植株自交后代中野生型植株数和杂合体的比例约为1:1,没有鉴定到纯合体。杂合突变体植株的角果中种子数是野生型的一半。将杂合突变体与野生型植株进行互交后,对后代基因型进行鉴定,结果发现,突变的基因不能通过雌配子传递。该突变体中的T-DNA插入到一个DEAH-BOX RNA解旋酶基因中,该基因编码的蛋白含有四个保守的结构域,DEAH、 HELICc、HA2和OB-fold。对拟南芥中DEAH-BOX家族进行聚类分析,并将该基因命名为AtDEAHb3。atdeahb3突变通过影响雌配子体发育过程中的有丝分裂进程,使雌配子体从FG2期开始出现发育延迟,导致同一雌蕊中不同雌配子体发育的同步性被破坏。野生型植株的成熟(flower stage12)雌蕊中,雌配子体处于FG6或FG7期;而杂合突变体植株相同时期的雌蕊中,约有50%的雌配子体处于FG2、FG3、FG4或者FG5期。对突变体进行延迟授粉实验发现,通过雌配子的传递效率上升,表明部分突变的雌配子体最终可以发育成熟并能完成受精。这些结果表明AtDEAHb3在拟南芥雌配子体的发育过程中起重要作用。qReal Time-PCR、GUS活性分析显示,AtDEAHb3在拟南芥分生组织、叶片、未成熟花药和胚珠中表达,表明AtDEAHb3可能参与植物多个器官的生长和发育过程。原位杂交结果表明,AtDEAHb3在整个雌配子体发育过程中均有表达,在成熟胚囊珠孔端杂交信号较强。利用35S::AtDEAHb3-GFP载体转化烟草叶片进行亚细胞定位研究,发现荧光信号分布在细胞质和细胞核中;在拟南芥中稳定表达pAtDEAHb3::AtDEAHb3-GUS融合蛋白,发现GUS信号集中在细胞质和细胞核中。AtDEAHb3与酵母Prp22p、人类DHX8同源,它们作为U5snRNP的组分,参与mRNA前体的剪接。酵母遗传互补实验发现,拟南芥AtDEAHb3能够互补酵母prp22突变体的热敏感表型,推测拟南芥AtDEAHb3参与植物mRNA前体的剪接。拟南芥GFA1在酵母中的同源蛋白Snu114p是剪接复合体U5snRNP的关键组分。利用拟南芥AtGenExpress Visualization Tool分析发现GFA1和AtDEAHb3的表达模式相似。酵母双杂交实验、BiFC实验和Pull-Down实验证实AtDEAHb3可以和GFA1相互作用。进一步通过AtDEAHb3的不同片段分别与GFAl进行酵母双杂交分析,结果发现AtDEAHb3通过其DEAH和HELICc domain之间的序列与GFA1(?)目互作用。这些结果提示,AtDEAHb3可能通过与拟南芥中U5snRNP复合体的互作,参与调节mRNA前体的剪接。AtDEAHb3-amiRNAi转基因拟南芥幼苗生长缓慢,对这一转基因植株中有丝分裂相关基因的表达进行分析,结果发现CYCB类基因表达下调幅度最大,推测AtDEAHb3通过调节CYCB类基因的表达参与对有丝分裂进程的调控。综上所述,在拟南芥雌配子体发育过程中,AtDEAHb3可能通过参与前体mRNA的剪接调节CYCB类基因的表达,进而通过影响细胞有丝分裂参与对雌配子体发育进程的调节。(本文来源于《山东农业大学》期刊2012-07-20)

金太成,杨丽萍,程焉平[3](2011)在《大豆解螺旋酶基因GH1的克隆与载体构建》一文中研究指出非生物胁迫(高盐、低温、干旱)严重限制植物的生长与发育。研究表明,高等植物中的DEAD-box RNA解螺旋酶广泛参与植物非生物胁迫应答,过表达解螺旋酶基因可明显改良转基因植株的抗逆能力。目前,大豆的RNA解螺旋酶基因序列也已发现,但其具体功能还不明晰,有待进一步研究确定。本实验以大豆为实验材料,根据Genbank发表的RNA解螺旋酶基因GH1的序列设计引物,通过RT-PCR的方法将其体外扩增并构建相应的表达载体,为下一步的研究奠定基础。(本文来源于《吉林农业科技学院学报》期刊2011年04期)

向阳飞,钱垂文,王一飞[4](2009)在《单纯疱疹病毒1型解螺旋酶-引物酶编码基因重组杆状病毒载体的构建与鉴定》一文中研究指出目的:分别构建含单纯疱疹病毒1型(HSV-1)解螺旋酶-引物酶编码基因UL5、UL52与UL8的重组杆状病毒载体。方法:PCR扩增UL5、UL52与UL8基因全长序列,分别克隆至转移载体pFastBac1,转化E.coliDH10Bac,通过转座作用制备分别带有3种目的基因的重组杆状病毒穿梭载体。结果:克隆的各目的基因序列与GenBank中收录序列一致,各目的基因正确重组至杆状病毒穿梭载体Bacmid。结论:成功构建分别插入HSV-1 UL5、UL52与UL8基因的重组杆状病毒载体,为在昆虫细胞内表达组装HSV-1解螺旋酶-引物酶以及建立靶向该酶复合体的药物筛选平台奠定基础。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2009年07期)

范凌云[5](2002)在《棉铃虫核多角体病毒解螺旋酶(helicase)基因的序列分析和含有HaSNPV同源重复区亚克隆的构建》一文中研究指出对棉铃虫单核衣壳核多角体病毒(Helicoverpa armigerd single-nucleocapsid nucleopolyhedrovirus,HaSNPV)基因组中EcoRI—N片段进行序列分析,获得了完整的解螺旋酶基因(hel),其开放阅读框大小为3762bp,编码一个分子量为146kDa的蛋白质。在hel起始密码子ATG上游50位有强晚期启动子转录起始信号ATAAG,在—112位和—189位存在两个TATA box,但未发现早期转录信号CAGT。其在终止密码子下游第12位有—PolyA终止信号AATAAA。HaSNPV解螺旋酶与其它5种杆状病毒解螺旋酶相比,有5个基元序列(Ⅰ、Ⅰa、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)保守,另外两个(Ⅴ和Ⅵ)完全不保守。同源性比较发现HaSNPV解螺旋酶的氨基酸序列与甜菜夜蛾核多角体病毒(Spodoptera exigue MNPV,SeMNPV)的解螺旋酶具有最高的同源性(66%),与Xestia c-nigrum颗粒体病毒(XcGV)解螺旋酶同源性最低(43%),HaSNPV解螺旋酶基因是第一个报道的单粒包埋核多角体病毒的解螺旋酶基因。 在HaSNPV基因组中存在5个同源重复区hr,它们可能对病毒的复制和转录调控等起重要作用。对HaSNPV的5个hr区域进行了亚克隆,为进一步的功能研究奠定了基础。(本文来源于《中国科学院研究生院(武汉病毒研究所)》期刊2002-06-25)

范凌云,胡志红,Just,M,Vlak[6](2001)在《棉铃虫单核衣壳核多角体病毒解螺旋酶基因的序列分析》一文中研究指出对棉铃虫单核衣壳核多角体病毒 (Helicoverpaarmigerasingle -nucleocapsidnucleopolyhedrovirus,HaSNPV)基因组中EcoRI N片段进行序列分析 ,获得了完整的解螺旋酶基因 (hel) ,其开放阅读框大小为 376 2bp ,编码一个分子量为 14 6kD的蛋白质。在hel起始密码子ATG上游 5 0位有强晚期启动子转录起始信号ATAAG ,在 112位和 189位存在两个TATAbox ,但未发现早期转录信号CAGT。其在终止密码子下游第 12位有一PolyA终止信号AATAAA。在其它真核或原核解螺旋酶中存在的 7个保守基元 (I、Ia、II、III、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ) ,只有 5个 (I、Ia、II、III、Ⅳ)在杆状病毒中保守同源性比较发现 ,HaSNPV解螺旋酶的氨基酸序列与甜菜夜蛾核多角体病毒 (SpodopteraexigueMNPV ,SeMNPV)的解螺旋酶具有最高的同源性 (6 6 % ) ,与Xestiac nigrum颗粒体病毒 (XcGV)解螺旋酶的同源性最低 (43% )。HaSNPV解螺旋酶基因是第一个报道的单粒包埋核多角体病毒的解螺旋酶基因(本文来源于《中国病毒学》期刊2001年04期)

解螺旋酶基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

雌配子体的发育是植物有性生殖过程的重要阶段,是植物受精和种子形成的前提,直接影响到作物的产量和品质。研究雌配子体发育调控的分子机制,具有重要的理论意义和应用价值。RNA解旋酶参与基因转录、各种前体RNA的加工、成熟、转运、翻译起始及核糖体装配等诸多细胞学过程,在生物发育过程中发挥重要作用。拟南芥基因组中包含100多个RNA解旋酶基因,但目前只有少数基因的功能得到验证。相关研究发现,RNA解旋酶参与植物的多个生理过程,包括生长发育调控和逆境胁迫响应等。本研究中鉴定到一个拟南芥T-DNA插入突变体,杂合突变体植株自交后代中野生型植株数和杂合体的比例约为1:1,没有鉴定到纯合体。杂合突变体植株的角果中种子数是野生型的一半。将杂合突变体与野生型植株进行互交后,对后代基因型进行鉴定,结果发现,突变的基因不能通过雌配子传递。该突变体中的T-DNA插入到一个DEAH-BOX RNA解旋酶基因中,该基因编码的蛋白含有四个保守的结构域,DEAH、 HELICc、HA2和OB-fold。对拟南芥中DEAH-BOX家族进行聚类分析,并将该基因命名为AtDEAHb3。atdeahb3突变通过影响雌配子体发育过程中的有丝分裂进程,使雌配子体从FG2期开始出现发育延迟,导致同一雌蕊中不同雌配子体发育的同步性被破坏。野生型植株的成熟(flower stage12)雌蕊中,雌配子体处于FG6或FG7期;而杂合突变体植株相同时期的雌蕊中,约有50%的雌配子体处于FG2、FG3、FG4或者FG5期。对突变体进行延迟授粉实验发现,通过雌配子的传递效率上升,表明部分突变的雌配子体最终可以发育成熟并能完成受精。这些结果表明AtDEAHb3在拟南芥雌配子体的发育过程中起重要作用。qReal Time-PCR、GUS活性分析显示,AtDEAHb3在拟南芥分生组织、叶片、未成熟花药和胚珠中表达,表明AtDEAHb3可能参与植物多个器官的生长和发育过程。原位杂交结果表明,AtDEAHb3在整个雌配子体发育过程中均有表达,在成熟胚囊珠孔端杂交信号较强。利用35S::AtDEAHb3-GFP载体转化烟草叶片进行亚细胞定位研究,发现荧光信号分布在细胞质和细胞核中;在拟南芥中稳定表达pAtDEAHb3::AtDEAHb3-GUS融合蛋白,发现GUS信号集中在细胞质和细胞核中。AtDEAHb3与酵母Prp22p、人类DHX8同源,它们作为U5snRNP的组分,参与mRNA前体的剪接。酵母遗传互补实验发现,拟南芥AtDEAHb3能够互补酵母prp22突变体的热敏感表型,推测拟南芥AtDEAHb3参与植物mRNA前体的剪接。拟南芥GFA1在酵母中的同源蛋白Snu114p是剪接复合体U5snRNP的关键组分。利用拟南芥AtGenExpress Visualization Tool分析发现GFA1和AtDEAHb3的表达模式相似。酵母双杂交实验、BiFC实验和Pull-Down实验证实AtDEAHb3可以和GFA1相互作用。进一步通过AtDEAHb3的不同片段分别与GFAl进行酵母双杂交分析,结果发现AtDEAHb3通过其DEAH和HELICc domain之间的序列与GFA1(?)目互作用。这些结果提示,AtDEAHb3可能通过与拟南芥中U5snRNP复合体的互作,参与调节mRNA前体的剪接。AtDEAHb3-amiRNAi转基因拟南芥幼苗生长缓慢,对这一转基因植株中有丝分裂相关基因的表达进行分析,结果发现CYCB类基因表达下调幅度最大,推测AtDEAHb3通过调节CYCB类基因的表达参与对有丝分裂进程的调控。综上所述,在拟南芥雌配子体发育过程中,AtDEAHb3可能通过参与前体mRNA的剪接调节CYCB类基因的表达,进而通过影响细胞有丝分裂参与对雌配子体发育进程的调节。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

解螺旋酶基因论文参考文献

[1].金太成,李华,周波,杨丽萍.沙打旺DEAD-boxRNA解螺旋酶基因的克隆与功能分析[J].分子植物育种.2016

[2].朱东姿.AtDEAHb3基因编码DEAH-boxRNA解螺旋酶参与拟南芥雌配子体的发育[D].山东农业大学.2012

[3].金太成,杨丽萍,程焉平.大豆解螺旋酶基因GH1的克隆与载体构建[J].吉林农业科技学院学报.2011

[4].向阳飞,钱垂文,王一飞.单纯疱疹病毒1型解螺旋酶-引物酶编码基因重组杆状病毒载体的构建与鉴定[J].中国卫生检验杂志.2009

[5].范凌云.棉铃虫核多角体病毒解螺旋酶(helicase)基因的序列分析和含有HaSNPV同源重复区亚克隆的构建[D].中国科学院研究生院(武汉病毒研究所).2002

[6].范凌云,胡志红,Just,M,Vlak.棉铃虫单核衣壳核多角体病毒解螺旋酶基因的序列分析[J].中国病毒学.2001

论文知识图

HaSNPV基因组的EcoR I酶切图谱及EcoR...的生物合成及功能嗜线虫致病杆菌工、H型菌毒力和型变相...HaSNPV基因组的EcoR I酶切图谱及EcoRI...的RT-PCR结果和OrfS拍侧的保守结构幼Fig.2-4...

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