导读:本文包含了蝎毒多肽论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:东亚钳蝎,长链多肽毒素,钠离子通道,电生理
蝎毒多肽论文文献综述
张晓婷,姜鸣,章旭日,杨亮,杨清湖[1]（2019）在《蝎毒多肽类钠通道调制剂的分离纯化与功能研究》一文中研究指出电压门控钠通道能够在兴奋性细胞内启动和传播动作电位。遗传学和行为学研究表明,Nav1.7,Nav1.8是治疗疼痛的候选靶点,Nav1.5与某些心肌方面的病症有很大的关系。神经性动物毒素能够靶向作用到一些离子通道,引起离子通道动力学以及门控特性的改变。目前临床上的通道抑制剂缺乏高效的亚型选择性,关于天然的通道拮抗剂的研究仍然颇具挑战。基于此,通过Sephadex G50层析技术以及高效液相Atlantis T3从东亚钳蝎粗毒中纯化出单一的活性多肽组分,用全细胞膜片钳技术分析活性多肽对钠通道的调控作用。主要研究内容及结果:(1)蝎粗毒通过Sephadex G50凝胶色谱与反相高效液相Atlantis T3柱先后分离共获得34个单体组分,经电喷雾离子化质谱(ESI-MS)技术鉴定出新型短链蝎毒多肽H-2-11-2与11-2-11-3,长链蝎毒多肽H-2-14-1,H-2-14-2和H-2-15-1;(2)选择长链蝎毒多肽H-2-14-1与H-2-15-1以不同浓度分别对Nav1.5、Nav1.7、Nav1.8进行作用。结果显示:H-2-14-1对Nav1.5和Nav1.7均能易化激活,通道的激活易化和失活延缓均有浓度依赖性。H-2-14-1对Nav1.8的激活电压没有明显的改变,H-2-14-1延缓Nav1.8的失活。H-2-15-1对Nav1.5和Nav1.7均能易化激活,延缓通道失活。激活电压与反转电位的改变量随着浓度的增加基本不变。H-2-15-1对Nav1.8的激活电压没有明显改变,仅能延缓失活。综上,蝎毒多肽H-2-14-1与H-2-15-1以不同的方式作用到钠通道上,均存在亚型选择性,其中H-2-14-1还对Nav1.5和Nav1.7存在明显的浓度依赖性关系,可以作为研究电压门控钠通道亚型选择性以及门控特性的潜在工具,探明其对钠通道的调控机制将为继续深入研究钠通道类调制剂提供重要参考,也将具有重要的理论的现实意义。(本文来源于《第十四届生物毒素毒理学术大会暨第一届生物毒素——从生存适应到转化医学专题学术会议会刊》期刊2019-08-16）
章旭日[2]（2019）在《新型蝎毒多肽类钠通道调制剂的分离纯化与细胞电生理功能初探》一文中研究指出东亚钳蝎在我国分布广泛,其中陕北黄土高原由于地理环境独特,造就了丰富的蝎资源。蝎子作为传统中药材,有着悠久的应用历史,但对其药效组分及药效机理仍知之甚少。现代研究表明,蝎子的药用价值主要在于含有大量神经毒素的蝎毒多肽,蝎毒多肽能够特异性作用于钠通道,影响通道的门控特性,而钠通道在生理和病理过程中发挥重要作用,所以,蝎毒多肽作为钠通道门控调节剂具有研究价值。基于此,本论文利用色谱分离纯化技术从蝎粗毒中获得系列单一活性多肽组分,再利用全细胞膜片钳技术记录检测不同活性多肽组分对钠通道的调控作用。主要研究内容及结果如下:(1)蝎毒多肽的分离纯化及分子量测定蝎粗毒通过Sephadex~(TM) G-50 Fine凝胶色谱柱等度洗脱,获得叁个色谱峰,分别命名为H-1、H-2和H-3。H-2经反相高效液相Atlantis T3柱梯度洗脱,获得28个色谱峰。其中H-2-10~H-2-15六个组分各自再经反相高效液相分析纯化后共获得14个单体组分。其中5个得率和纯度较高的单体组分,冷冻干燥后用电喷雾离子化质谱(ESI-MS)技术测定分别得到了分子量为3766 Da和3765 Da的H-2-11-2和H-2-11-3短链蝎毒多肽;以及分子量分别为7229.2 Da、7030 Da和7028.5 Da的H-2-14-1、H-2-14-2和H-2-15-1长链蝎毒多肽。选择长链蝎毒多肽H-2-14-1和H-2-15-1进行细胞钠通道功能调制鉴定实验。(2)H-2-14-1对Nav1.5、Nav1.7、Nav1.8的调控作用全细胞膜片钳模式下,分别记录100 nM、200 nM及500 nM H-2-14-1对Nav1.5、Nav1.7及Nav1.8在不同时间的激活电压、峰值电流以及失活电压。结果显示,叁个浓度下,H-2-14-1对Nav1.8激活没有影响,激活电压均为-50mV。100 nM的H-2-14-1对Nav1.8峰值电流影响较小,二者共浴5 min时峰值电流达到最大值-286pA,但H-2-14-1使Nav1.8失活电压减小,加快其失活。200 nM和500 nM具有相同作用,即对通道峰值电流影响较小,但Nav1.8失活电压增大,通道开放时间延长,延缓了通道失活。100 nM、200 nM和500 nM H-2-14-1对Nav1.5和Nav1.7调控作用相同,即激活电压减小而易化激活,通道开放时间延长,延缓其失活,通道峰值电流增大,但不同浓度H-2-14-1与通道共浴达最大峰值电流值的时间不同,叁种浓度H-2-14-1与Nav1.5共浴的最大峰值电流时间分别出现在12 min、5 min和9 min,Nav1.7则出现在7min、7 min和5 min。因此,H-2-14-1对Nav1.8和Nav1.5、Nav1.7具有不同的调控作用,具有钠通道亚型选择性,且有浓度依赖性。(3)H-2-15-1对Nav1.5、Nav1.7、Nav1.8的调控作用全细胞膜片钳模式下,分别记录100 nM、200 nM及500 nM H-2-15-1对Nav1.5、Nav1.7及Nav1.8在不同时间的激活电压、电流以及失活电压。结果显示,叁个浓度的H-2-15-1均可降低Nav1.7和Nav1.5的激活电压而易化激活,但100 nM H-2-15-1缩短了Nav1.7开放时间,加快失活,对其峰值电流影响较小,二者共浴7min后达最大峰值电流,而200 nM和500 nMH-2-15-1则是延长Nav1.7开放时间,延缓其失活,峰值电流增大,二者共浴9min和5min时达最大峰值电流。叁个浓度的H-2-15-1均延长了Nav1.5和Nav1.8开放的时间,延缓通道失活,增大通道峰值电流,但不同浓度H-2-15-1与Nav1.5和Nav1.8共浴达最大峰值电流值的时间不同,与Nav1.5共浴的最大峰值电流时间出现在7 min、7 min和5min,与Nav1.8则出现在9 min、9 min和7 min。但H-2-15-1对Nav1.8的激活没有影响。因此,H-2-15-1对Nav1.7的调控,具有钠通道亚型选择性,及浓度依赖性。综上,蝎毒多肽H-2-14-1和H-2-15-1对钠通道亚型具有不同选择性和浓度依赖性,因此H-2-14-1和H-2-15-1可作为研究钠通道不同亚型调制机理的潜在工具,探明其对钠通道的调控机制将为继续深入研究钠通道类调制剂提供重要参考,也将具有重要的理论和现实价值。(本文来源于《延安大学》期刊2019-06-01）
郝征,曾丽蓉,张伟锋,杨向东,王兴丽[3]（2019）在《蝎毒多肽干预K562/BALB/c-nu小鼠Hedgehog通路传导的机制研究》一文中研究指出目的探究蝎毒多肽干预K562/BALB/c-nu白血病荷瘤小鼠Hedgehog通路信号传导的机制,从基因、蛋白水平解析蝎毒多肽抑制慢性粒细胞白血病发展的分子机制和作用靶点。方法将K562/BALB/c-nu白血病荷瘤小鼠分为对照组、模型组、伊马替尼(50 mg/kg)组和蝎毒多肽高、中、低剂量(0.3、0.6、1.2 mg/kg)组,药物干预14 d后,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测小鼠瘤组织Hedgehog信号通路上游因子Shh、Ptch、Smo m RNA表达水平,Western blotting法检测Shh、Ptch、Smo蛋白表达水平,ELISA法检测小鼠瘤组织Hedgehog信号通路下游因子Gli1蛋白表达水平。结果与模型组比较,蝎毒多肽干预组小鼠瘤组织Shh m RNA和蛋白表达水平均升高;蝎毒多肽低、中剂量组小鼠瘤组织Ptch、Smo m RNA及蛋白表达水平均降低;伊马替尼组各上游因子与模型组比较差异不显着;蝎毒多肽低、中剂量组小鼠瘤组织Gli1蛋白表达水平降低,蝎毒多肽高剂量组、伊马替尼组Gli1蛋白表达水平无显着差异。结论蝎毒多肽能够抑制Hedgehog信号通路上游因子Ptch、Smo以及下游因子Gli1的表达,而伊马替尼对Hedgehog信号通路无明显抑制作用。(本文来源于《中草药》期刊2019年07期）
张伟锋,杨文华,杨向东,王兴丽[4]（2018）在《蝎毒多肽对慢性粒细胞白血病细胞中Shh和Gli1表达的影响》一文中研究指出目的探讨蝎毒多肽对慢性粒细胞白血病细胞株K562中Shh和Gli1表达的影响及其机制。方法体外培养K562细胞,分为蝎毒多肽10、20、40mg/L组(A1、A2、A3组)、伊马替尼2g/L组(B组)以及生理盐水组(C组)。采用CCK-8法检测K562细胞增殖活性,RT-PCR法检测BCR/ABL、Shh、Gli1的mRNA表达,Western blot法检测P210~(BCR/ABL)、Shh、Gli1的蛋白表达。结果与C组相比,A2、A3、B组细胞增殖活性下降,Shh、Gli1的mRNA和蛋白表达以及BCR/ABL mRNA、P210~(BCR/ABL)蛋白的表达均降低(P<0.05)。A2、A3组细胞增殖活性以及Shh、Gli1的mRNA和蛋白表达水平与B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论蝎毒多肽可以减少K562细胞增殖以及BCR/ABL mRNA和P210~(BCR/ABL)蛋白的表达,并通过抑制Shh和Gli1的表达阻断Hedgehog通路的激活,进而抑制慢性粒细胞白血病的进展。(本文来源于《江苏医药》期刊2018年07期）
张伟锋,杨文华[5]（2018）在《蝎毒多肽对慢性粒细胞白血病细胞Hh通路下游活化因子Gli1表达的影响》一文中研究指出目的探讨蝎毒多肽对慢性粒细胞白血病细胞Hedgehog通路(Hh通路)下游活化因子Gli1表达的影响。方法将慢性粒细胞白血病细胞K562接种于24孔板,随机分为蝎毒多肽1、2、3组和伊马替尼组、空白对照组。蝎毒多肽1、2、3组分别加入10、20、40μg/m L的蝎毒多肽20μL,伊马替尼组加入2 mg/m L的伊马替尼20μL,空白对照组加入生理盐水20μL,继续培养48 h。采用实时荧光定量PCR法检测各组Gli1 mRNA相对表达量,Western blotting法检测各组Gli1蛋白相对表达量。结果蝎毒多肽1、2、3组和伊马替尼组、空白对照组Gli1 mRNA相对表达量分别为1.983±0.091、1.355±0.093、1.279±0.105、1.302±0.074、2.745±0.188;Gli1蛋白相对表达量分别为0.902±0.057、0.722±0.074、0.693±0.097、0.701±0.067、0.981±0.063。蝎毒多肽1组Gli1 mRNA和蛋白相对表达量与空白对照组比较P均>0.05;蝎毒多肽2、3组及伊马替尼组Gli1 mRNA和蛋白相对表达量明显低于蝎毒多肽1组及空白对照组(P均<0.05);蝎毒多肽2、3组及伊马替尼组Gli1 mRNA和蛋白相对表达量比较P均>0.05。结论 20~40μg/m L的蝎毒多肽可明显抑制慢性粒细胞白血病细胞Gli1基因表达。(本文来源于《山东医药》期刊2018年20期）
张伟锋,杨文华[6]（2018）在《蝎毒多肽干预CML K562细胞Hedgehog通路上游活化因子的分子机制研究》一文中研究指出目的观察蝎毒多肽提取物(PESV)对K562细胞Hedgehog通路上游活化因子的影响并探讨分子调节机制。方法体外培养K562细胞,接种于24孔培养板,治疗组分别加入低、中及高浓度(10、20及40 mg/L)PESV 20μL,阳性对照加入2 g/L的甲磺酸伊马替尼(GLEEVEC)20μL(GLEEVEC组),阴性对照组加入生理盐水20μL,共培养48 h,应用Real-time PCR及Western blot法检测K562细胞BCR/ABL基因m RNA及融合蛋白P210bcr/abl表达的变化,并检测Hedgehog通路上游活化因子Shh、Smo、Ptch m RNA及蛋白的表达。结果与阴性对照组比较,PESV各剂量组对K562细胞BCR/ABL融合基因m RNA及P210bcr/abl蛋白的表达均有不同程度的抑制作用(P<0.05);与阴性对照组比较,中、高剂量组Shh、Smo、Ptch基因m RNA及蛋白在K562细胞中的表达水平均降低(P<0.05);与GLEEVEC组比较,中、高剂量组Shh、Smo、Ptch基因相对表达水平差异均无统计学意义,但低剂量组均升高(P<0.05)。结论 PESV可以抑制K562细胞BCR/ABL融合基因及P210bcr/abl蛋白的表达,并通过抑制Hedgehog通路上游活化因子的表达阻断该通路的激活,进而抑制慢性粒细胞白血病的进展。(本文来源于《天津医药》期刊2018年04期）
杨向东,王兴丽,杨文华,赵磊,颜田赅[7]（2016）在《蝎毒多肽逆转白血病干细胞多药耐药作用的研究》一文中研究指出该实验采用BALB/c小鼠多药耐药(MDR)白血病模型,观察蝎毒多肽(PESV)对小鼠瘤体MDR白血病干细胞(LSC)P-gp(P-gp)蛋白上游信号的影响,研究PESV逆转白血病干细胞(LSC)多药耐药的效果及机制;同时通过流式细胞术,RT-PCR,Western blot,Elisa法分别检测P-gp,MDR1 mRNA,PI3-K,NF-κB表达,并通过组织病理学方法检测小鼠肝脏、脾脏等。结果显示,正常对照组小鼠无明显变化,其余6组小鼠均出现弓背、消瘦等表现,肝脏肿大,肝内均出现炎症坏死;PESV下调小鼠瘤块中LSC细胞膜P-gp,PI3K蛋白表达下调;胞浆中MDR1 mRNA表达在PESV低剂量组显着下降,在中、高剂量组出现不同程度的升高;PESV显着降低LSC细胞核内NF-κB因子水平。PESV具有明显下调P-gp上游信号PI3K/NF-κB/MDR1的作用,在一定程度上增强了LSC对化疗药物阿霉素(ADM)的敏感度,从而阐述了PESV逆转LSC多药耐药的可能机制之一,为PESV联合抗肿瘤作用的进一步研究提供了基础。(本文来源于《中国中药杂志》期刊2016年24期）
韩琛,张钰,王恒孝[8]（2016）在《蝎毒多肽提取物对肝癌中VEGF及自然杀伤细胞活性的影响》一文中研究指出背景:研究表明肝癌患者机体内NK细胞活性及绝对数量降低,同时肿瘤浸润NK细胞呈现为VEGF表达阳性。本课题组研究证明蝎毒多肽提取物(polypeptide extract from scorpion venom,PESV)可抑制肿瘤细胞VEGF的表达,同时对肝脏NK细胞的活化具有明显的刺激作用。目的:观察PESV对肝癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)以及自然杀伤细胞(NK)细胞活性的调节作用机制,为进一步探讨PESV调节机体天然免疫、抗肿瘤活性提供新策略。材料方法:流式细胞术检测各药物干预组对人肝癌细胞株HepG2细胞表面m MICA的表达;LDH细胞毒性检测法检测NK细胞的杀伤作用;构建H22肝癌原位移植瘤小鼠模型,分组给药后观察肝肿瘤组织变化及其荷瘤生存期;采用流式细胞术检测小鼠肝脏、脾脏中CD3-NK1.1+细胞及其表面NKG2D的表达;实时定量PCR法检测肝脏肿瘤组织中VEGF、穿孔素、颗粒酶B mRNA表达。结果:1.PESV显着提高HepG2细胞表面m MICA的表达,增强NK细胞的杀伤活性(P<0.05);2.PESV大剂量组显着抑制移植瘤小鼠瘤组织的生长,抑瘤率为30.77%,能显着延长荷瘤小鼠生存时间(P<0.05);3.PESV提高荷瘤小鼠肝脏及脾脏NK细胞浸润,促进其表面活化性受体NKG2D的表达(P<0.05);4.与荷瘤对照组比较,PESV大剂量组肿瘤组织中穿孔素和颗粒酶B的mRNA表达量增加,VEGF mRNA表达降低(P<0.05)。结论:细胞是机体天然免疫系统中重要成员之一,具有抗感染、抗肿瘤的活性,被认为是机体的"第一道防线"。NK细胞发挥其杀伤活性主要依赖其表面的活化性受体识别并结合靶细胞表面的配体并活化、产生释放细胞毒性颗粒,对靶细胞实施杀伤。在肝癌发生过程中,由于肿瘤微环境及肿瘤细胞自身分泌大量的VEGF等抑制性细胞因子,NK细胞数量降低,杀伤肿瘤细胞活性被显着抑制,提高NK细胞杀伤活性被认为是抗肿瘤免疫疗法的重要方面。PESV具有多种抗肿瘤活性机制,本研究表明PESV通过降低肿瘤中VEGF的基因表达,提高肿瘤组织中NK细胞的频数,通过活化MICA-NKG2D途径促使NK细胞发挥更强杀伤肿瘤活性,从而有效抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,为一步研究抗肿瘤天然免疫及PESV临床抗肿瘤研究提供实验依据。(本文来源于《第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编》期刊2016-11-04）
杨向东,史哲新,闫理想,刘宝山,陈化禹[9]（2016）在《从白血病干细胞水平研究蝎毒多肽提取物逆转多药耐药机制》一文中研究指出目的探讨蝎毒多肽(peptide extract from scorpion venom,PESV)对白血病干细胞(leukemic stem cell,LSC)在体内多药耐药(multidrug resistance,MDR)的影响。方法培养K562/A02细胞,在对数生长期收集并经免疫磁珠法分选出K562/A02干细胞备用;40只BABL/c裸鼠,取5只注射K562/A02干细胞形成皮下瘤块备用;采用随机数字表法将35只裸鼠分为正常对照组、模型组、耐阿霉素(Adriamycin,ADM)组、PESV组和ADM+PESV高、中、低剂量组,每组5只。正常对照组不作处理,其余各组包埋瘤块组织,造模后模型组给予1 m L生理盐水腹腔注射,每天1次;ADM组腹腔注射ADM 0.05 mg,隔天1次;PESV组腹腔注射PESV 2μg,每天1次;ADM+PESV高、中、低剂量组腹腔注射ADM 0.05 mg,隔天1次,同时给予PESV(5、2、1μg)腹腔注射,每天1次。给药14天。流式细胞术检测P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp);RT-PCR检测乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)、多药耐药基因1(multidrug resistance 1,MDR1)m RNA表达;免疫组化法检测乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1);Western blot法检测磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)蛋白表达;ELISA检测核转录因子NF-κB含量。结果 K562/A02细胞经免疫磁珠分选前后的CD34+CD38-细胞比率分别为31.5%、92.8%,耐药率(IC50)分别为(60.33±10.68)μg/m L、(58.33±9.72)μg/m L,造模裸鼠成瘤率为100%。与模型组比较,ADM组各项检测指标比较,差异无统计学意义(P>0.05);PESV组BCRP、MDR1 m RNA和NF-κB因子水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);ADM+PESV高、中、低剂量组P-gp值降低,PI3K蛋白表达下调(P<0.05),ADM+PESV高、中剂量组BCRP m RNA表达降低,MDR1 m RNA表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05);ADM+PESV高剂量组PI3K蛋白表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。分别与ADM组和PESV组比较,ADM+PESV高剂量组P-gp、BCRP m RNA、MDR1 m RNA、PI3K和NF-κB水平明显均下调,差异有统计学意义(P<0.05)。各组ALDH1阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 PESV联合ADM具有下调白血病K562/A02干细胞P-gp、BCRP、MDR1、PI3K、NF-κB的表达水平,可以增强白血病K562/A02干细胞在体内对ADM的敏感度,具有逆转其多药耐药作用。(本文来源于《中国中西医结合杂志》期刊2016年07期）
林振吕,郑光威,张琳,郑建涛,陈辉[10]（2016）在《蝎毒多肽对胃癌SGC-7901细胞侵袭转移的作用》一文中研究指出目的研究蝎毒多肽对胃癌SGC-7901细胞侵袭转移的作用。方法设立空白组和5个不同质量浓度(蝎毒多肽5,10,20,40,80μg·m L~(-1))实验组。以噻唑蓝法检测蝎毒多肽对细胞活性和增殖的影响,以划痕实验和Transwell实验观察其对细胞侵袭及转移能力的影响,以免疫印迹法检测其对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。结果与空白组相比,蝎毒多肽可以明显抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,且呈现时间-浓度依赖性(P<0.05)。2个不同质量浓度(10,20μg·m L~(-1))蝎毒多肽侵袭细胞的数量分别为(35.8±5.53),(19.3±2.13),与空白组(48.3±7.34)比较差异有统计学意义(P<0.05),表明其可抑制细胞的侵袭能力。2个浓度实验组的迁移抑制率分别为(14.7±1.23)%,(28.5±3.35)%,实验组较空白组明显降低(P<0.05)。2个不同质量浓度(10,20μg·L~(-1))蝎毒多肽作用于胃癌SGC-7901细胞12 h后,与空白组比较均可抑制细胞MMP-9和MMP-2的表达。结论蝎毒多肽通过抑制MMP-2及MMP-9的表达从而抑制胃癌SGC-7901细胞的侵袭转移。(本文来源于《中国临床药理学杂志》期刊2016年13期）
蝎毒多肽论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
东亚钳蝎在我国分布广泛,其中陕北黄土高原由于地理环境独特,造就了丰富的蝎资源。蝎子作为传统中药材,有着悠久的应用历史,但对其药效组分及药效机理仍知之甚少。现代研究表明,蝎子的药用价值主要在于含有大量神经毒素的蝎毒多肽,蝎毒多肽能够特异性作用于钠通道,影响通道的门控特性,而钠通道在生理和病理过程中发挥重要作用,所以,蝎毒多肽作为钠通道门控调节剂具有研究价值。基于此,本论文利用色谱分离纯化技术从蝎粗毒中获得系列单一活性多肽组分,再利用全细胞膜片钳技术记录检测不同活性多肽组分对钠通道的调控作用。主要研究内容及结果如下:(1)蝎毒多肽的分离纯化及分子量测定蝎粗毒通过Sephadex~(TM) G-50 Fine凝胶色谱柱等度洗脱,获得叁个色谱峰,分别命名为H-1、H-2和H-3。H-2经反相高效液相Atlantis T3柱梯度洗脱,获得28个色谱峰。其中H-2-10~H-2-15六个组分各自再经反相高效液相分析纯化后共获得14个单体组分。其中5个得率和纯度较高的单体组分,冷冻干燥后用电喷雾离子化质谱(ESI-MS)技术测定分别得到了分子量为3766 Da和3765 Da的H-2-11-2和H-2-11-3短链蝎毒多肽;以及分子量分别为7229.2 Da、7030 Da和7028.5 Da的H-2-14-1、H-2-14-2和H-2-15-1长链蝎毒多肽。选择长链蝎毒多肽H-2-14-1和H-2-15-1进行细胞钠通道功能调制鉴定实验。(2)H-2-14-1对Nav1.5、Nav1.7、Nav1.8的调控作用全细胞膜片钳模式下,分别记录100 nM、200 nM及500 nM H-2-14-1对Nav1.5、Nav1.7及Nav1.8在不同时间的激活电压、峰值电流以及失活电压。结果显示,叁个浓度下,H-2-14-1对Nav1.8激活没有影响,激活电压均为-50mV。100 nM的H-2-14-1对Nav1.8峰值电流影响较小,二者共浴5 min时峰值电流达到最大值-286pA,但H-2-14-1使Nav1.8失活电压减小,加快其失活。200 nM和500 nM具有相同作用,即对通道峰值电流影响较小,但Nav1.8失活电压增大,通道开放时间延长,延缓了通道失活。100 nM、200 nM和500 nM H-2-14-1对Nav1.5和Nav1.7调控作用相同,即激活电压减小而易化激活,通道开放时间延长,延缓其失活,通道峰值电流增大,但不同浓度H-2-14-1与通道共浴达最大峰值电流值的时间不同,叁种浓度H-2-14-1与Nav1.5共浴的最大峰值电流时间分别出现在12 min、5 min和9 min,Nav1.7则出现在7min、7 min和5 min。因此,H-2-14-1对Nav1.8和Nav1.5、Nav1.7具有不同的调控作用,具有钠通道亚型选择性,且有浓度依赖性。(3)H-2-15-1对Nav1.5、Nav1.7、Nav1.8的调控作用全细胞膜片钳模式下,分别记录100 nM、200 nM及500 nM H-2-15-1对Nav1.5、Nav1.7及Nav1.8在不同时间的激活电压、电流以及失活电压。结果显示,叁个浓度的H-2-15-1均可降低Nav1.7和Nav1.5的激活电压而易化激活,但100 nM H-2-15-1缩短了Nav1.7开放时间,加快失活,对其峰值电流影响较小,二者共浴7min后达最大峰值电流,而200 nM和500 nMH-2-15-1则是延长Nav1.7开放时间,延缓其失活,峰值电流增大,二者共浴9min和5min时达最大峰值电流。叁个浓度的H-2-15-1均延长了Nav1.5和Nav1.8开放的时间,延缓通道失活,增大通道峰值电流,但不同浓度H-2-15-1与Nav1.5和Nav1.8共浴达最大峰值电流值的时间不同,与Nav1.5共浴的最大峰值电流时间出现在7 min、7 min和5min,与Nav1.8则出现在9 min、9 min和7 min。但H-2-15-1对Nav1.8的激活没有影响。因此,H-2-15-1对Nav1.7的调控,具有钠通道亚型选择性,及浓度依赖性。综上,蝎毒多肽H-2-14-1和H-2-15-1对钠通道亚型具有不同选择性和浓度依赖性,因此H-2-14-1和H-2-15-1可作为研究钠通道不同亚型调制机理的潜在工具,探明其对钠通道的调控机制将为继续深入研究钠通道类调制剂提供重要参考,也将具有重要的理论和现实价值。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
蝎毒多肽论文参考文献
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