EcN共价PSMA/PELA载药微球的制备及其靶向肿瘤低氧环境的初步研究

论文摘要

目的将Escherichia coli Nissle 1917（EcN）与聚苯乙烯马来酸酐（poly styrene-co-maleic anhydride, PSMA）/聚DL-乳酸-聚乙二醇共聚物[(poly （DL-Lactic acid） and poly ethyleneglycol block copolymer, PELA]聚合物载药微粒共价结合,研究其靶向肿瘤低氧环境的效果。方法溶剂挥发法制备不同混合比例（质量比为7∶3和5∶5）的PSMA和PELA携载阿霉素（Dox）的PSMA/PELA微粒;通过EDC和NHS催化反应使得EcN表面的氨基和PSMA/PELA载药微粒表面的酸酐发生共价结合,平板计数法表征接枝后EcN的生长活性;利用HepG2细胞体外构建3D肿瘤模型,研究EcN共价PSMA/PELA载药微粒在肿瘤低氧区域的渗透效果;小鼠肝癌细胞H22建立皮下肿瘤模型,体内验证其靶向肿瘤低氧区域的效果。结果成功制备载Dox的PSMA/PELA微粒(DMP7/3和DMP5/5),两种微粒球形规则,粒径700～800 nm;DMP7/3和DMP5/5载药量分别为（4.27±0.19）%和（3.94±0.11）%,包裹效率分别为（85.4±2.6）%和（78.8±3.5）%,载药量和包裹效率差异无统计学意义;CLSM结果显示,EcN成功接枝在DMP7/3表面,且接枝后的细菌具有生长活力;体外渗透实验研究表明,与EcN未共价接枝的DMP比较,EcN修饰的聚合物载药微粒(EcN@DMP7/3)可较多地渗透至肿瘤内部;体内分布实验证实,静脉给药4 h和24 h后,EcN@DMP7/3治疗组肿瘤组织内Dox浓度分别是DMP7/3治疗组浓度的3倍和6倍（P<0.01）。结论通过EDC和NHS催化反应方法可使EcN表面的氨基和PSMA/PELA载药微粒表面的酸酐发生共价反应,且反应后的EcN依然维持其生长活性,能有效驱动PSMA/PELA载药微粒靶向肿瘤内部低氧区域。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验材料
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 PSMA/PELA空白和载药微粒的制备
•     1.2.2 载药微粒的表征
•     1.2.3 Dox标准曲线的建立及载药量和包裹效率测定
•     1.2.4 Dox释放行为研究
•     1.2.5 EcN共价PSMA/PELA载药微粒的制备和表征
•     1.2.6 接枝后EcN生长情况测定
•     1.2.7 体外渗透实验
•     1.2.8 体内分布实验
•       1.2.8.1 肿瘤模型的建立
•       1.2.8.2 实验分组及处理
•   1.3 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 粒径结果分析
•   2.2 载药量和包裹效率的测定
•   2.3 载药微粒形貌表征
•   2.4 Dox的标准曲线和释放行为
•   2.5 CLSM表征接枝效果
•   2.6 EcN生长曲线测定
•   2.7 体外渗透实验结果
•   2.8 体内分布实验结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 罗晓明,毛皓月,杨铃,韩彬,苏春丽,宋海星

关键词: 细菌,主动靶向,缺氧区域,渗透性

来源: 第三军医大学学报 2019年10期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 有机化工,药学

单位: 成都医学院:公共卫生学院预防医学教研室,成都医学院:生物技术学院实验教学中心

基金: 国家自然科学基金青年科学基金(81501581),四川省科技厅重点研发项目(2017GZ0426)~~

分类号: R943

DOI: 10.16016/j.1000-5404.201811194

页码: 947-954

总页数: 8

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