论文摘要
利用慢病毒表达系统将TPL2（COT和MAP3K8）质粒稳定整合在乳仓鼠肾细胞（baby Hamster Syrian kidney）BHK21细胞基因组染色体上,建立稳定表达TPL2的BHK21/TPL2细胞系。构建TPL2质粒,通过基因合成将TPL2基因和慢病毒载体Lv-PCDH连接,得到重组慢病毒载体Lv-TPL2。通过嘌呤霉素筛选得到的阳性细胞株BHK21/TPL2即为稳定表达TPL2蛋白的BHK21细胞株。运用间接免疫荧光、激光扫描共聚焦显微技术、实时荧光定量PCR和普通PCR等技术分别验证TPL2基因组整合、转录、反应活性以及FMDV、SVV在BHK21/TPL2细胞株上的增殖效果。结果,TPL2基因被稳定整合在BHK21细胞基因组染色体上,建立的细胞系连续传代不丢失。接种病毒后致细胞病变严重,相对于正常的BHK21/PCDH细胞,整合有TPL2的BHK21细胞对FMDV、SVV的易感性显著增强。上述结果为FMDV疫苗的研制和生产提供了更佳的功能细胞系。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 郝军红,闫鸣昊,张大俊,张学刚,申超超,徐国伟,李国丽,张克山,郑海学,刘湘涛
关键词: 基因,细胞系,口蹄疫病毒,病毒,慢病毒表达系统
来源: 中国兽医科学 2019年12期
年度: 2019
分类: 农业科技,基础科学
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室
基金: 国家自然科学基金项目(31572542),国家科技支撑计划项目(2015BAD12B04)
分类号: S852.65
DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0215
页码: 1527-1534
总页数: 8
文件大小: 1820K
下载量: 155
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