导读:本文包含了增殖细胞性抗原论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:抗原,细胞,细胞核,蛋白,白介素,内质网,分子。
增殖细胞性抗原论文文献综述
栗彦飞,王栎雯,周开焕,宁建铭,文海名[1]（2019）在《siRNA干扰肝癌相关抗原Cdc25C表达对Hepa1-6肝癌细胞增殖和迁移的影响及机制研究》一文中研究指出目的:探讨小干扰RNA(siRNA)抑制肝癌相关抗原细胞分裂周期蛋白25(Cdc25C)表达对小鼠肝癌细胞Hepa1-6增殖和迁移的作用及其机制。方法:将细胞分为空白对照组(未转染)、阴性对照组(转染阴性siRNA)及3个实验组(转染siRNA-Cdc25C-1组、转染siRNA-Cdc25C-2组、转染siRNA-Cdc25C-3组)。转染8 h后,通过荧光显微镜观察转染效率,并采用Western blotting法检测各组Cdc25C蛋白的表达,筛选出最有效的siRNA序列;用荧光定量PCR(qPCR)法检测内质网应激反应(ERS)相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、X-盒结合蛋白(XBP-1)、C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达,CCK-8法和Transwell实验检测Hepa1-6细胞增殖和迁移能力。结果:成功构建Cdc25C低表达的Hepa1-6细胞株,转染siRNA-Cdc25C-1组的转染效率最高且Cdc25C蛋白表达水平最低。与阴性对照组比较,转染siRNA-Cdc25C-1组Hepa1-6细胞的迁移率明显降低,细胞增殖抑制率及GRP78、XBP-1、CHOP基因相对表达量明显升高(P<0.05)。空白对照组与阴性对照组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:Cdc25C基因低表达能抑制肝癌细胞增殖和迁移,其机制可能与ERS有关。(本文来源于《广西医科大学学报》期刊2019年05期）
方越洋[2]（2019）在《组蛋白去乙酰化酶4通过促进增殖细胞核抗原的表达调控骨肉瘤细胞增殖的实验研究》一文中研究指出目的骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)是最常见的骨原发性恶性肿瘤之一,主要好发于儿童和青少年。骨肉瘤的发病率居中,但其最明显的生物学特征高度侵袭性和高肺转移倾向,导致存活率较低且局部复发率高。目前,骨肉瘤患者的主要临床治疗方法仍以手术和放化疗为主。然而,传统治疗方法的效果很有限,尤其是对于那些具有高度侵袭性和肺转移的患者。研究表明组蛋白去乙酰化酶4(histone deacetylase 4,HDAC4)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在一些肿瘤中表达增高。然而,HDAC4和PCNA在骨肉瘤中的具体作用尚不清楚。本研究旨在研究人骨肉瘤中HDAC4和PCNA的表达情况及其与细胞增殖、侵袭和凋亡之间的关系。方法选取我院2016年到2018年骨肉瘤及骨软骨瘤患者的手术切除标本,共47例。其中骨肉瘤样本共24例,男14例,女10例,年龄在9-26岁,平均年龄15.38±4.98岁;骨软骨瘤标本共23例,男15例,女8例,年龄在12-30岁,平均年龄18.10±4.98岁。所有患者的诊断均有临床症状体征、影像学及病理叁个方面证据的支持。首先,依次检测人骨肉瘤和骨软骨瘤组织中HDAC4和PCNA的mRNA及蛋白质的水平。再将人骨肉瘤细胞株MG-63和U2-OS均培养于DMEM培养液中。最后,使用蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)、实时荧光定量PCR(Quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)及免疫组化分别检测在两种骨肉瘤细胞系中上调HDAC4对PCNA表达产生的影响,以及MTT法、Transwell侵袭实验以及流式细胞术分别检测上调HDAC4后骨肉瘤细胞增殖、侵袭和凋亡的变化。结果结果显示人骨肉瘤患者临床标本中HDAC4和PCNA的表达量均明显高于骨软骨瘤患者临床标本。过表达HDAC4后,PCNA的蛋白水平明显升高,而PCNA的mRNA水平无明显变化。另一方面在过表达HDAC4后,MTT法、Transwell侵袭实验以及流式细胞术的结果分别显示骨肉瘤细胞的增殖和侵袭明显增强,而细胞凋亡明显减少。结论HDAC4可通过促进PCNA蛋白的表达来促进骨肉瘤细胞的增殖和侵袭,并抑制凋亡。因此,我们推断HDAC4可能是骨肉瘤治疗的潜在靶点。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2019-02-01）
李小红,魏浩翰,李晟磊,郭丽丽[3]（2019）在《Yes相关蛋白和程序性细胞死亡因子4及细胞增殖核抗原Ki-67与皮肤鳞状细胞癌的相关性》一文中研究指出目的探讨皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)组织Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)、程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)与细胞增殖核抗原Ki-67表达变化及意义。方法取12例曝光部位皮肤鳞癌、12例非曝光部位皮肤鳞癌患者手术切除鳞癌组织,12例行整形手术患者手术切除正常皮肤组织,采用免疫组织化学法检测YAP、PDCD4与Ki-67表达情况,Spearman相关分析皮肤鳞癌组织中YAP、PDCD4和Ki-67表达的相关性。结果曝光部位皮肤鳞癌、非曝光部位皮肤鳞癌、正常皮肤组织YAP表达强度比较差异无统计学意义(P>0.05);曝光部位皮肤鳞癌PDCD4强阳性表达率(25.0%)低于非曝光部位皮肤鳞癌(66.7%)和正常皮肤(75.0%)(P<0.05),非曝光部位皮肤鳞癌组织与正常皮肤比较差异无统计学意义(P>0.05);曝光部位皮肤鳞癌、非曝光部位皮肤鳞癌组织中Ki-67强阳性表达率(100.0%、100.0%)均高于正常皮肤(66.7%)(P<0.05);皮肤鳞癌组织YAP、PDCD4和Ki-67表达强度无线性相关(P>0.05)。结论 PDCD4与曝光部位皮肤鳞癌的发生、发展可能有一定相关性,Ki-67可反映皮肤鳞癌细胞增殖活性,YAP可能与皮肤鳞癌发生、发展无关。(本文来源于《中华实用诊断与治疗杂志》期刊2019年01期）
冯富,刘艳君,刘桂欢,张华,朱漫漫[4]（2018）在《IL-15对异基因抗原刺激下人CD8~+T细胞增殖分化影响的初步研究》一文中研究指出目的:探讨IL-15对异基因抗原刺激下人CD8~+T细胞增殖分化的影响。方法:在IL-15存在的条件下,将从健康志愿者外周血中新鲜分离的CD8~+T细胞与HLA-A,-B,-DR完全错配的异体抗原提呈细胞(APCs)进行混合淋巴细胞培养(MLRs)。经9 d培养后,对诱导后产生的CD28~-CD8~+和CD28~+CD8~+T细胞亚群进行细胞毒功能测定和表型检测,并对CD8~+T细胞增殖分化过程中CD28分子的动态变化规律进行监测。结果:在IL-15诱导及异基因抗原刺激下,CD8~+T细胞增殖分化后产生的CD28+CD8~+T细胞具有细胞毒作用,与外周血新鲜分离的类似细胞相比,其高表达了Fas L、颗粒霉素-B和穿孔素;而CD28~-CD8~+抑制性T细胞不具有细胞毒作用,与外周血新鲜分离的类似细胞相比,低表达了Fas L、颗粒霉素-B和穿孔素。在异基因抗原提呈细胞刺激下,IL-15可诱导CD8~+T细胞增殖分化过程中CD28~-/CD28+细胞数比例升高(从0. 24到1. 01),并可诱导CD28+T细胞上的CD28分子丢失。结论:IL-15通过调节CD28分子的表达影响异基因抗原对CD8~+T细胞的增殖分化。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2018年11期）
韩成贤,郝静,李兆民,王珂,雷艳[5]（2018）在《泻肝补肾汤对实验性前列腺增生大鼠前列腺重量与上皮细胞高度及组织细胞核增殖抗原表达影响》一文中研究指出目的:分析泻肝补肾汤对良性前列腺增生(BPH)大鼠前列腺重量与上皮细胞高度及组织细胞核增殖抗原表达影响。方法:选取由本院实验动物中心提供的SPF级Wistar雄性大鼠30只,随机数字表法将大鼠分成叁组,观察组(10只)、模型组(10只)和正常组(10只),模型组与观察组大鼠制备BPH模型,成功造模后观察组大鼠每天灌胃1ml/100g泻肝补肾汤,模型组和正常组灌胃等剂量生理盐水,连续灌胃30天,末次给药后检测各组大鼠体重、前列腺湿重及前列腺指数状况,腺体上皮细胞高度在光镜下检测,PCNA表达采用免疫组化检测。结果:模型组大鼠前列腺重量及前列腺指数较正常组显着升高,观察组大鼠前列腺重量及前列腺指数较模型组显着降低,差异均有统计学意义(P<0. 05);模型组大鼠上皮细胞高度及PCNA阳性率较正常组显着升高,观察组大鼠上皮细胞高度及PCNA阳性率较模型组显着降低,差异均有统计学意义(P<0. 05)。结论:泻肝补肾汤可降低BPH大鼠前列腺重量与上皮细胞高度,调节组织内PCNA表达对前列腺增生起抑制作用。(本文来源于《四川中医》期刊2018年11期）
吴凌娟,张磊,蔺广义,沈磊[6]（2018）在《制备人工抗原提呈细胞促进NK细胞增殖和抗肿瘤效应的研究》一文中研究指出目的制备双表达CD86和4-1BBL的人工抗原提呈细胞,建立在体外大量的扩增具有较高杀伤活性的人NK细胞的有效方法。方法将表达CD86和4-1BBL的慢病毒感染K562细胞,制备成人工抗原提呈细胞(a APC),与人外周血单个核细胞(PBMC)共培养,使NK细胞在体外大量扩增。结果在培养d15天时,细胞数量达到2. 7×1010个,CD3-CD56+细胞纯度达到99. 4%,细胞体外杀伤活性为96. 27±1. 27%;在小鼠肺癌模型中,治疗组比对照组肿瘤体积明显减小。结论成功制备了有效扩增NK细胞的人工抗原提呈细胞(a APC),建立了在体外高效扩增具有较高杀伤活性的NK细胞的有效方法,为肿瘤和慢性感染性疾病的过继细胞免疫治疗奠定了基础。(本文来源于《标记免疫分析与临床》期刊2018年10期）
程文栋,张娜[7]（2018）在《癌胚抗原相关黏附分子1对人支气管上皮细胞增殖、迁移及炎症因子的影响》一文中研究指出目的检测癌胚抗原相关黏附分子1(CEACAM1)对HBE细胞的增殖、迁移以及炎症因子的产生等方面的作用,探讨CEACAM1表达对支气管上皮细胞功能的影响。方法通过Real-timePCR方法检测IFN-γ作用下HBE细胞分泌白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)等因子的情况,筛选出IFN-γ上调的炎症因子。利用siRNA干扰CEACAM1,观察上述因子表达情况,并通过细胞划痕实验观察HBE细胞迁移情况,通过CCK-8实验观察HBE细胞增殖的情况。结果 IFN-γ作用于HBE细胞24小时后进行Real-timePCR检测,发现IL-6及IL-8显着上调,TGF-β及VEGF无显着变化,MCP-1不表达。siRNA干扰CEACAM1后,与相同浓度IFN-γ刺激的阴性对照组相比,IL-6及IL-8表达水平显着下降。siRNA干扰CEACAM1表达后,与阴性对照组相比,HBE细胞划痕愈合变慢,增殖速率减慢。结论IFN-γ通过CEACAM1上调HBE细胞IL-6及IL-8的表达,CEACAM1促进HBE细胞的迁移及细胞增殖。(本文来源于《西部医学》期刊2018年09期）
李锐,李晓丽[8]（2018）在《甲状腺癌患者癌组织中CD34、增殖细胞核抗原和内皮细胞特异分子-1的表达及意义》一文中研究指出目的探讨CD34、增殖细胞核抗原(PCNA)和内皮细胞特异分子(ESM)-1在甲状腺癌组织中的表达水平及其与甲状腺癌临床分期、病理分型、有无淋巴结转移的关系。方法选取甲状腺癌组织81例、甲状腺癌旁正常组织28例作为研究对象。采用酶联免疫、实时荧光定量PCR和免疫组织化学方法,检测癌组织和癌旁正常组织样本中CD34、PCNA、ESM-1的蛋白含量、mRNA水平及蛋白阳性表达强度;通过检测CD34、PCNA、ESM-1在甲状腺癌组织中的阳性表达率,分析叁种基因与甲状腺癌临床病理特征的关系。结果 (1)与甲状腺癌旁正常组织比较,CD34、PCNA、ESM-1在甲状腺癌组织中的蛋白含量、mRNA水平及蛋白阳性表达强度均明显增强,差异均有统计学意义(P<0.05);(2)CD34、PCNA、ESM-1在甲状腺癌组织中的阳性表达率随甲状腺癌临床分期逐级递增,随病理分级高、中、低分化依次递增,随无、有淋巴结转移依次递增。结论甲状腺癌组织中CD34、PCNA、ESM-1基因表达水平呈明显上调趋势,说明叁者可能与甲状腺癌的发生、发展、侵袭、转移密切相关。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2018年16期）
麦麦提依明·托合提,帕热哈提江·依孜木,阿布都克尤木·阿布都吉力力,董军,吴永刚[9]（2018）在《人前梯度蛋白2在垂体腺瘤中的表达及其与细胞内增殖抗原Ki-67和基质金属蛋白酶9及血管内皮生长因子的相关性》一文中研究指出目的研究人前梯度蛋白2(AGR2)在垂体腺瘤组织中的表达及其与细胞内增殖抗原Ki-67、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)的相关性。方法收集2013年5月至2015年7月在新疆维吾尔自治区人民医院神经外科经手术切除的垂体腺瘤新鲜标本117例。行免疫组织化学染色观察AGR2在垂体腺瘤细胞中的表达,采用Pearson相关分析AGR2表达与Ki67、MMP-9、VEGF的相关性。结果 AGR2在垂体腺瘤不同分泌类型中的表达阳性率差异无统计学意义(x~2=6.537,P>0.05)。在117例垂体腺瘤组织标本中,AGR2表达阳性60例,AGR2在非侵袭性垂体腺瘤组织中的表达明显高于在侵袭性垂体腺瘤中的表达[30.8%(36/47)比20.5%(24/70)],差异有统计学意义(P<0.01);AGR2表达与Ki-67、MMP-9、VEGF表达呈负相关(r=-0.252、-0.883、-0.921,均P<0.05)。结论 AGR2在侵袭性垂体腺瘤和非侵袭性垂体腺瘤组织中含量有明显差异。AGR2表达量与Ki-67、MMP-9、VEGF表达量呈负相关,AGR2不仅可以作为研究垂体腺瘤侵袭性的一个靶标,还可以作为垂体腺瘤诊断、靶向治疗以及预后判断的一个重要的潜在指标。(本文来源于《中国医药》期刊2018年08期）
王睿升[10]（2018）在《AcMNPV及宿主细胞Sf9中增殖细胞核抗原PCNA的功能研究》一文中研究指出增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)起初在患有系统性红斑狼疮患者的血清中发现,之后在其他物种(如哺乳动物,果蝇等)中也发现了它的存在。由于PCNA蛋白结构在进化上的保守性,使得病毒和原核细胞中也具有类似PCNA的DNA聚合酶辅助因子。在不同进化水平的生物中,它们具有相同的二级结构单位—?螺旋和?折迭,和相似的叁级结构(一个可以在DNA链上滑动的环形滑动夹)。哺乳动物的PCNA以同源叁聚体的形式存在于细胞核,是DNA合成不可或缺的因子,它的表达水平与细胞周期的变化同步。在杆状病毒苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa california multiple nuclear polyhedrosis virus,AcMNPV)中鉴定有与编码增殖细胞核抗原蛋白序列同源的基因pcna,又称AcOrf-49,全长771 bp,但是在DNA复制中的作用还不明确。在杆状病毒的长期进化过程中,其基因组中的某些基因会发生高频率的缺失和获得。其中,AcMNPV的pcna基因(Ac-pcna)就是由其宿主Sf9(Spodoptera frugiperda 9)的pcna基因(Sf-pcna)演变获得而来。为了进一步明确Ac-pcna和Sf-pcna在AcMNPV侵染宿主细胞Sf9以及感染甜菜夜蛾过程中的作用机制,我们开展了Ac/Sf-PCNA的功能研究,并在此基础上,探讨了Ac/Sf-PCNA对外源基因表达的影响。本研究分为叁部分内容:第一部分:过表达Ac/Sf-PCNA的重组杆状病毒的构建以及Ac/Sf-PCNA在宿主细胞的表达分析。我们首先利用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒重组表达系统构建了过表达Ac/Sf-PCNA的重组病毒:AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP。分别用5 MOI(multiplicity of infection)的重组病毒AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP侵染Sf9细胞,荧光显微镜观察发现,细胞的荧光强度随感染时间的延长不断增加,并且可以产生荧光的细胞数目也在不断增加。Western blot结果也表明,随着感染时间的延长Ac/Sf-PCNA-EGFP的表达量逐渐增加,在感染72 h后达到峰值。而Ac-PCNA-EGFP在核内的聚集比Sf-PCNA-EGFP早12 h,在12 h即可检测到。第二部分:增殖细胞核抗原Ac/Sf-PCNA的功能分析。采用GenBank和PDB数据库检索Ac/Sf-PCNA的功能域,采用DNAMAN软件将二者的氨基酸序列进行差异比对。比对分析显示Ac-PCNA与Sf-PCNA具有43.73%的氨基酸序列同源性,但是这两个蛋白的C端和N端是高度保守的。首先,用5 MOI的野生病毒AcMNPV和重组病毒AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP侵染Sf9细胞1-3天,绝对定量qPCR检测Ac/Sf-PCNA对病毒以及宿主细胞Sf9基因组DNA复制的影响。结果显示AcMNPV介导的Ac-PCNA和Sf-PCNA的过表达可以刺激AcMNPV基因组在宿主细胞Sf9中的复制。同时,AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP对Sf9基因组在感染过程中的复制也具有显着的刺激作用。之后,蚀斑实验检测,分别用5 MOI的野生病毒AcMNPV-EGFP和重组病毒AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP感染12-96 h的Sf9细胞的上清液中的子代病毒粒子数量。结果表明,AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP可提高子代病毒产量,且AcMNPV-Sf-pcna-EGFP对子代病毒增殖的促进作用强于AcMNPV-Ac-pcna-EGFP。在AcMNPV-Ac-pcna-EGFP和AcMNPV-Sf-pcna-EGFP感染72 h的细胞中,生成芽生型病毒粒子(budded virus,BV)的量分别是AcMNPV-EGFP感染细胞的14.53和19.83倍。随后以AcMNPV-Ac-pcna-EGFP为代表,用5 MOI的AcMNPV-EGFP和AcMNPV-Ac-pcna-EGFP分别侵染Sf9细胞12-48 h,RT-PCR结果显示在病毒感染的前24 h,AcMNPV-Ac-pcna-EGFP处理组中ie2基因的转录水平显着升高,在病毒感染24 h后,AcMNPV-Ac-pcna-EGFP处理组中ie2基因的转录水平缓慢下降。而在病毒感染的12 h,AcMNPV-Ac-pcna-EGFP处理组中38K、vp39基因的转录水平达到最大值。这就表明Ac-PCNA能显着提高极早期基因ie2的转录水平,并能进一步提高晚期基因如38K和vp39的转录水平。最后,虫试实验中分别用20μL,1×10~7pfu/mL的AcMNPV-EGFP和AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP连续饲喂二龄期甜菜夜蛾幼虫五天。幼虫的重量、致死率、化蛹率及羽化率结果表明,饲喂AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP的幼虫生长迟缓,并且死亡率远高于饲喂AcMNPV-EGFP的幼虫,而化蛹率及羽化率都明显低于野生病毒处理组。在AcMNPV-Ac-pcna-EGFP和AcMNPV-Sf-pcna-EGFP处理组中,幼虫的平均致死率分别是83.33%和91.67%,是AcMNPV-EGFP处理组的1.43和1.57倍;化蛹率分别是16.67%和8.33%,是AcMNPV-EGFP处理组的0.40和0.20倍;羽化率分别是6.67%和3.33%,是AcMNPV-EGFP处理组的0.33和0.17倍。这些结果表明,过表达Ac/Sf-PCNA的重组病毒具有更强的杀虫效应,即具有较高的抗虫活性,且重组病毒AcMNPV-Sf-pcna-EGFP比AcMNPV-Ac-pcna-EGFP具有更高的抗虫活性。第叁部分:AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP对宿主细胞SfP53蛋白的表达、葡萄糖代谢及外源蛋白表达的影响。前两部分实验已经对两个重要的DNA聚合酶推进因子—Ac/Sf-PCNA在分子、细胞和虫体水平的功能作了初步分析,杆状病毒侵染昆虫会调节宿主的凋亡途径以及代谢通路,以利于自身的复制。本章中,我们着重分析了重组杆状病毒AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP如何影响凋亡蛋白SfP53的表达以及葡萄糖代谢并进一步影响外源蛋白Renilla Luciferase的表达。首先,分别用5 MOI的AcMNPV-EGFP和AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP侵染Sf9细胞12-72 h,Western blot检测分析宿主凋亡蛋白SfP53的表达。与野生病毒相比,重组病毒AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP整体上延迟了宿主细胞SfP53的表达。在明确了宿主细胞SfP53的表达规律后,同样分别用5 MOI的AcMNPV-EGFP和AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP侵染Sf9细胞,Western blot检测SfP53在核内的聚集情况,表明SfP53在核内的聚集情况与SfP53总蛋白的变化趋势相近。然后,用0.25 MOI的AcMNPV-EGFP和AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP分别与0.25 MOI的AcMNPV-renilla luciferase-RFP共侵染Sf9细胞1-72 h,检测宿主细胞内葡萄糖的含量。在感染后4 h,AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP处理组中细胞内葡萄糖浓度明显高于AcMNPV-EGFP处理组,分别是AcMNPV-EGFP处理组的1.28和1.39倍。在随后的时间段内,葡萄糖浓度呈先下降后上升的趋势。进一步分析,我们又发现AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP处理组葡萄糖浓度回升的时间点比AcMNPV-EGFP处理组提早24-36 h,并且AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP处理组的最低葡萄糖浓度的数值要高于AcMNPV-EGFP处理组,分别是AcMNPV-EGFP处理组的1.20和1.37倍。最后用不同感染复数的AcMNPV-EGFP、AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP分别与0.25 MOI的AcMNPV-renilla luciferase-RFP共侵染Sf9细胞72 h,检测外源蛋白Renilla Luciferase的表达情况,结果显示AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP处理组中Renilla Luciferase的表达随感染复数的增加缓慢减弱,而AcMNPV-EGFP处理组中Renilla Luciferase的表达显着减弱,表明AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP可以弱化由病毒感染导致的外源蛋白的下调表达。用0.25 MOI的AcMNPV-EGFP、AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP分别与0.25 MOI的AcMNPV-renilla luciferase-RFP共侵染Sf9细胞12-72 h,检测外源蛋白Renilla Luciferase的表达情况,结果显示AcMNPV-Ac-pcna-EGFP处理组和AcMNPV-Sf-pcna-EGFP处理组中Renilla Luciferase的表达分别在侵染后的48和24 h检测到,分别比AcMNPV-EGFP处理组提早了12和36 h,表明AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP可以辅助外源蛋白提早表达。所以,AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP通过延缓宿主细胞凋亡蛋白SfP53的表达进程进而延缓细胞的凋亡为病毒的复制争取更多时间,同时刺激宿主细胞对葡萄糖的利用为病毒自身的复制提供能量,进而有利于外源基因的表达。本研究分别在DNA、细胞和虫体水平上分析了AcMNPV侵染宿主过程中与病毒和宿主DNA复制有关的Ac/Sf-PCNA蛋白的功能,明确了它们对促进病毒和宿主DNA复制功能的重要性,获得了两株高抗虫效率的病毒杀虫剂AcMNPV-Ac/Sf-pcna-EGFP,并进一步完善了重组病毒通过延迟凋亡蛋白SfP53的表达以及刺激对葡萄糖的利用,进而利于外源基因表达的机制。本研究证实了Ac/Sf-PCNA的功能,为Ac/Sf-PCNA的应用提供了实验依据,为利用AcMNPV科学防治鳞翅目害虫奠定了理论基础。(本文来源于《山西大学》期刊2018-06-01）
增殖细胞性抗原论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)是最常见的骨原发性恶性肿瘤之一,主要好发于儿童和青少年。骨肉瘤的发病率居中,但其最明显的生物学特征高度侵袭性和高肺转移倾向,导致存活率较低且局部复发率高。目前,骨肉瘤患者的主要临床治疗方法仍以手术和放化疗为主。然而,传统治疗方法的效果很有限,尤其是对于那些具有高度侵袭性和肺转移的患者。研究表明组蛋白去乙酰化酶4(histone deacetylase 4,HDAC4)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在一些肿瘤中表达增高。然而,HDAC4和PCNA在骨肉瘤中的具体作用尚不清楚。本研究旨在研究人骨肉瘤中HDAC4和PCNA的表达情况及其与细胞增殖、侵袭和凋亡之间的关系。方法选取我院2016年到2018年骨肉瘤及骨软骨瘤患者的手术切除标本,共47例。其中骨肉瘤样本共24例,男14例,女10例,年龄在9-26岁,平均年龄15.38±4.98岁;骨软骨瘤标本共23例,男15例,女8例,年龄在12-30岁,平均年龄18.10±4.98岁。所有患者的诊断均有临床症状体征、影像学及病理叁个方面证据的支持。首先,依次检测人骨肉瘤和骨软骨瘤组织中HDAC4和PCNA的mRNA及蛋白质的水平。再将人骨肉瘤细胞株MG-63和U2-OS均培养于DMEM培养液中。最后,使用蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)、实时荧光定量PCR(Quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)及免疫组化分别检测在两种骨肉瘤细胞系中上调HDAC4对PCNA表达产生的影响,以及MTT法、Transwell侵袭实验以及流式细胞术分别检测上调HDAC4后骨肉瘤细胞增殖、侵袭和凋亡的变化。结果结果显示人骨肉瘤患者临床标本中HDAC4和PCNA的表达量均明显高于骨软骨瘤患者临床标本。过表达HDAC4后,PCNA的蛋白水平明显升高,而PCNA的mRNA水平无明显变化。另一方面在过表达HDAC4后,MTT法、Transwell侵袭实验以及流式细胞术的结果分别显示骨肉瘤细胞的增殖和侵袭明显增强,而细胞凋亡明显减少。结论HDAC4可通过促进PCNA蛋白的表达来促进骨肉瘤细胞的增殖和侵袭,并抑制凋亡。因此,我们推断HDAC4可能是骨肉瘤治疗的潜在靶点。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
增殖细胞性抗原论文参考文献
[1].栗彦飞,王栎雯,周开焕,宁建铭,文海名.siRNA干扰肝癌相关抗原Cdc25C表达对Hepa1-6肝癌细胞增殖和迁移的影响及机制研究[J].广西医科大学学报.2019
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