米祖云刘桂成(解放军44医院核医学室贵州贵阳550002)
【中图分类号】R512.6+2【文献标识码】A【文章编号】1007-8231(2011)1-062-02
【摘要】目的探讨HBeAg导致假阳性原因的分析。方法用ELISA法检测42份离心与不离心标本的HBeAg。结果不离心标本的HBeAg单独阳性很高,离心标本无此情况。结论假阳性与不离心有关,因全血中红细胞内有许多与HBeAg有共同抗原颗粒物质及过氧化酶,在用ELISA法检测过程中出现非特异性结合,即与底物发生反应,而造成假阳性,洗板不清,可能也是造成假阳性原因之一。故要求在做两对半时,单独HBeAg阳性标本重进行离心,以提高测定结果的准确性。
【关键词】ELISAHBeAg假阳性
乙型肝炎病毒(HBV)感染是全球性的健康问题,根据美国疾病控制中心的报告,全球近20亿感染人群[1],因此,HBV的检测和筛查尤为重要。目前,HBV血清学检测方法很多,ELISA操作简单,易于推广,近几年来,在工作中遇到几例单独HBeAg阳性。结果,将标本重离心,冰箱保存,复查发现结果均为阴性。另外也有研究报道,抗-HBe同时阳性的特殊模式[2],以及溶血及脂血样品对ELISA检测的影响[3],根据上述这些现象,现报作如下探讨。
1材料与方法
1.1对象标本来自本院健康体检者42例,用枸橼酸抗凝混匀不离心和3000离心5min、10min,分别用上海科华试剂进行检测。
1.2试剂上海科华有限公司生产,批号:20070702,质控血清为上海科生物有限公司生产,批号:20070702。
1.3仪器与设备酶标仪为芬兰产MK3型,洗板机为芬兰产MK2型。
1.4方法严格按照试剂说明书操作。
1.5结果判断样品OD值/阴性对照值>2.1为阳性,否则为阴性。
2结果
见表1。
表142份枸橼酸抗凝标本离心与不离心检测结果
例数HBSAb阴性HBSAb阳性
标本
不离心42375
标本
离心42420
当标本不离心时,有假阳性发生,当标本离心时,没有假阳性发生。
3讨论
HBeAg存在于乙肝病毒颗粒的核心部分,HBeAg存在表明乙型肝炎处于复制状态,具有较强的传染性。HBeAg的共同抗原类的颗粒物质存在于全血中,在不离心情况下悬浮在血浆中,故在酶免检测过程中出现非特异性结合而造成假阳性。
全血中的红细胞成分中含有过氧化酶成分,产生辣根过氧化物酶样作用。在工作中,当离心不充分的血清,血浆标本加样于反应孔时,细胞成分粘附于酶标板而不能洗去,会产生酶促反应而显色,导致出现一些假阳性。
参考文献
[1]source:center.for.Disease.controL.and.prevention,http://www.cdc.Gor/ncidod/diseases/sLidese/hep-b./hep-b.pdf.
[2]王火生,韩红星,徐六妹等.HBVe系统双阳模式复核结果的分析[J].临床检验杂志,2001,19(6):381.
[3]单桂秋,苏建婷.溶血及脂血样品对ELISA检测HBsAg的影响[J].临床检验杂志,1999,17(2):102.