氨甲酰氨基酸水解酶论文_张伟

导读:本文包含了氨甲酰氨基酸水解酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:氨基酸,质粒,水解酶,苯丙氨酸,海因,大肠杆菌,麦芽糖。

氨甲酰氨基酸水解酶论文文献综述

张伟[1](2008)在《利用天然乙内酰脲酶启动子在大肠杆菌中诱导N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶的可溶性表达》一文中研究指出将来源于放射土壤杆菌(A.radiobacter)TH572的编码N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶的基因克隆至质粒pET30a上,并转化大肠杆菌BL21(DE3),结果蛋白质大部分以包涵体形式表达。本试验采用天然的乙内酰脲酶启动子(P_(Hase),长度为(本文来源于《中国医药工业杂志》期刊2008年09期)

钮利喜,石亚伟,袁静明[2](2004)在《N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶的融合表达、纯化和酶活性》一文中研究指出将菌株SS-ori的N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶基因(DCase)插入到pMAL-c2X载体中,构建表达产物为麦芽糖结合蛋白(MBP)与DCase融合的重组子。该重组子在E.coliBL21中的表达产物为融合蛋白MBP-DCase(76.4ka),光密度扫描表明,其表达量约占菌体超声后离心上清总蛋白的19%。经Amy-lose亲和纯化和Superose12凝胶排阻层析后达到了电泳纯。根据pMAL-c2X的背景,用FactorXa剪切后,可得约41.7ka的MBP和34.7ka的DCase。酶活性检测表明当用N-氨甲酰-DL-缬氨酸做为底物,A600=10时,每升菌体每小时可产生D-缬氨酸0.78g。(本文来源于《中国抗生素杂志》期刊2004年01期)

袁静明,钮利喜,石亚伟[3](2003)在《N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶(D-Carbamoylase)的融合表达,纯化和酶活性》一文中研究指出非天然氨基酸—D型氨基酸及其衍生物是合成抗菌和抗病毒药物、人工甜味剂、激素、杀虫剂等的重要中间物,特别是作为半合成抗生素侧链原料的D-氨基酸,更受到科技界与产业界的关注。D-氨基酸及其衍生物的生物转化一般要经历两个反应历程:首先是在海因酶催化下,将5'-替代海因转化成相应氨甲酰氨基酸,后者再在N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶(DCase)或化学试剂的作用下,生成相应的光学活性氨基酸。由于天然菌株产生的DCase稳定性差,(本文来源于《第四届中国酶工程学术交流讨论会论文集》期刊2003-10-12)

郝淑凤,张惟材,李迎丽,袁红杰,黄留玉[4](2003)在《节杆菌BT801N-氨甲酰氨基酸水解酶基因的克隆与表达》一文中研究指出通过PCR从质粒pUC18 16 9中扩增得到N 氨甲酰氨基酸水解酶基因 (hyuC) ,置于原核表达载体pQE6 0的T5启动子下游构成表达质粒pQE6 0 hyuC ,并在大肠杆菌M15中实现了该基因的高表达。SDS PAGE检测表达产物 ,在相对分子量 44kD处有一表达带 ,经薄层扫描分析目的蛋白占全菌蛋白的 40 % ,主要以可溶性形式存在。酶活性分析结果表明 ,工程菌M15 pQE6 0 hyuC的N 氨甲酰氨基酸水解酶的比活分别比原始菌株ArthrobacterBT80 1和亚克隆DH5α pUC18 16 9提高了 5 2倍和 72倍。在节杆菌BT80 1和大肠杆菌DH5α pUC18 16 9的反应体系中加入等量菌体的工程菌M15 pQE6 0 hyuC ,可使乙内酰脲酶总比活分别提高 8 1倍和 3 0倍。(本文来源于《生物工程学报》期刊2003年02期)

袁静明,石亚伟,杨秀清,赵莉霞,范俊虎[5](2001)在《N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶基因克隆及DNA全序列分析》一文中研究指出β-内酰胺类抗生素是全世界最广泛使用的抗菌药物,其中半合成青霉素和半合成头孢霉素,诸如阿莫西林、欧意等产品尤为青睐.D-型氨基酸中的D-苯甘氨酸和D-对羟基苯甘氨酸(D-HPG)是这些半合成抗生素生产中重要的侧链原料.另外,D-型氨基酸除了应用在医药领域外,还是甜味剂、拟除虫菊脂、多肽激素等诸多产品的重要中间物D-型氨基酸及其衍生物的转化,一般经历两个反应历程,首先是在海因酶的作用下,生成相应的光学活性氨基酸,但是天然菌株生物转化生产HPG,存在着一些制约因素,故国外已开展工程菌生物转化的研究.(本文来源于《中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集》期刊2001-09-01)

氨甲酰氨基酸水解酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

将菌株SS-ori的N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶基因(DCase)插入到pMAL-c2X载体中,构建表达产物为麦芽糖结合蛋白(MBP)与DCase融合的重组子。该重组子在E.coliBL21中的表达产物为融合蛋白MBP-DCase(76.4ka),光密度扫描表明,其表达量约占菌体超声后离心上清总蛋白的19%。经Amy-lose亲和纯化和Superose12凝胶排阻层析后达到了电泳纯。根据pMAL-c2X的背景,用FactorXa剪切后,可得约41.7ka的MBP和34.7ka的DCase。酶活性检测表明当用N-氨甲酰-DL-缬氨酸做为底物,A600=10时,每升菌体每小时可产生D-缬氨酸0.78g。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

氨甲酰氨基酸水解酶论文参考文献

[1].张伟.利用天然乙内酰脲酶启动子在大肠杆菌中诱导N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶的可溶性表达[J].中国医药工业杂志.2008

[2].钮利喜,石亚伟,袁静明.N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶的融合表达、纯化和酶活性[J].中国抗生素杂志.2004

[3].袁静明,钮利喜,石亚伟.N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶(D-Carbamoylase)的融合表达,纯化和酶活性[C].第四届中国酶工程学术交流讨论会论文集.2003

[4].郝淑凤,张惟材,李迎丽,袁红杰,黄留玉.节杆菌BT801N-氨甲酰氨基酸水解酶基因的克隆与表达[J].生物工程学报.2003

[5].袁静明,石亚伟,杨秀清,赵莉霞,范俊虎.N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶基因克隆及DNA全序列分析[C].中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集.2001

论文知识图

四种不同来源D-氨甲酰水解酶氨基酸序列...反应时间和温度对转化率的影响重组质粒pQE60-hyuC结构示意图氰酸钠的用量对产物收率的影响氰酸钠的用量对产物收率的影响海因酶法制备光学纯氨基酸的催化反应过...

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