导读:本文包含了甲肝病毒论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:甲肝,病毒,基因,噬菌体,抗体,密码子,北京鸭。
甲肝病毒论文文献综述
于书云,朱俊峰[1]（2019）在《鸭甲肝病毒的综合诊断与防治》一文中研究指出鸭甲肝病毒是导致雏鸭发生鸭病毒性肝炎的主要致病原,主要感染3周龄内雏鸭,雏鸭感染后临床主要表现为角弓反张、共济失调、肝脏肿大和出血,雏鸭发病率和死亡率均极高,给我国养鸭业造成了严重的经济损失。鸭甲肝病毒属于小RNA病毒科成员,其病毒基因组很容易发生变异,为鸭病毒性肝炎的主要致病原,鸭甲肝病毒包括基因(本文来源于《畜牧兽医科技信息》期刊2019年09期）
万春和,陈翠腾,施少华,程龙飞,傅光华[2]（2019）在《鸭甲肝病毒2型TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立》一文中研究指出研究利用全基因合成技术合成DHAV-2全基因组序列,并以此为标准品建立检测DHAV-2的TaqMan实时荧光定量PCR方法。结果表明:建立的方法敏感性高,最低检测限仅为33.7拷贝/μL;特异性强,对鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)、鸭甲肝病毒3型(DHAV-3)、禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)、番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus,MDRV)、新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,N-DRV)、鸭源禽Ⅰ型副黏病毒(Duck-origin avian paramyxovirus type 1,APMV-1)和禽坦布苏病毒(Avian Tembusu virus,ATmV)均无交叉扩增;重复性佳,组内和组间变异系数最高分别为1.68%和2.19%。对2018年福建地区临床收集的128份鸭源病料进行检测,结果未检测DHAV-2感染阳性。研究结果为DHAV-2的快速检测试剂盒研究及储备DHAV-2检测技术奠定了基础。(本文来源于《中国家禽》期刊2019年15期）
卢荣辉,肖隆华,朱婷,祁保民[3]（2019）在《不同致病型鸭1型甲肝病毒感染鸭的病变及病毒分布比较》一文中研究指出目的鸭病毒性肝炎(Duck Viral Hepatitis,DVH)是由鸭甲肝病毒(Duck Hepatitis A virus,DHAV)引起的一种急性、高度致死性传染病。近几年发生的胰腺炎型鸭病毒性肝炎以胰腺颜色发黄为特征,与经典型鸭病毒性肝炎的病变特征不同。本研究以胰腺型鸭1型甲肝病毒、经典型鸭1型甲肝病毒分别人工感染樱桃谷雏鸭,比较两者感染鸭的病变和病毒分布,以明确其差异,为鸭病毒性肝炎的诊断及发病机理研究奠定基础。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27）
扈琴吉,杨宏禹,路晓,于可响,孙晓军[4]（2019）在《鸭甲肝病毒RT-LAMP检测方法的建立》一文中研究指出基于A型和C型鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)3D基因的6个保守区域设计了4条引物,利用Bst DNA聚合酶在60℃恒温保持45min即可完成反转录和扩增反应,由此建立了鸭甲肝病毒的一步反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)方法。该方法具有良好的特异性,除DHAV外,对其他4种常见鸭病的检测结果均为阴性。该方法对DHAV-A和DHAV-C病毒RNA的最低检出量均为0.1pg,是常规RT-PCR方法的10倍。临床应用结果表明,该方法与病毒分离鉴定方法的符合率为92.5%,而且对仪器要求低,适于基层实验室和现场检测。(本文来源于《家禽科学》期刊2019年06期）
薛文湘[5]（2019）在《1型鸭甲肝病毒纳米抗体的筛选与鉴定》一文中研究指出1型鸭甲肝病毒(Duck Hepatitis A Virus Type 1,DHAV-1)临床上主要引起雏鸭急性肝炎,并具有高度致死性。VP1蛋白是DHAV-1主要衣壳蛋白,并诱导机体产生中和抗体。现有最灵敏特异的DHAV-1诊断方法主要是基于单克隆抗体(monoclonal antibodies,mAbs),但mAbs制作成本高,很难大规模生产等因素,限制了其在相关领域的应用。为了寻找传统mAbs的替代抗体,本研究以商品化DHAV-1活疫苗为免疫原免疫双峰驼,成功构建了大小为6×10~6、插入率为96%的噬菌体展示免疫纳米抗体(Nanobody,Nb)库,以DHAV-1 VP1蛋白为抗原进行了叁轮特异性纳米抗体筛选,成功筛选鉴定了一株DHAV-1纳米抗体。在此基础上,本研究成功鉴定了该纳米抗体的线性表位为~(174)PAPTST~(179),其在DHAV-1毒株之间高度保守,为特异灵敏检测DHAV-1提供了强有力的工具。本研究内容分主要分为以下叁部分:1.全长DHAV-1 VP1蛋白的原核表达以DHAV-1传染性克隆为模板,利用PCR扩增VP1基因片段,通过EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点将其分别克隆入pET-32a(+)和pGEX-6P-1原核表达载体,转化到Rosetta(DE3)表达菌株,37℃1mM IPTG诱导3h后,经SDS-PAGE和Western blot鉴定VP1-His和VP1-GST蛋白得到成功表达。2.DHAV-1VP1蛋白纳米抗体的筛选与鉴定以商品化DHAV-1活疫苗为免疫原免疫双峰驼,6次免疫过后,通过ELISA鉴定血清中DHAV-1特异性抗体滴度为1:50000。提取外周血淋巴细胞总RNA,通过RT-PCR得到cDNA,以cDNA为模板,经巢式PCR得到目的VHH基因,通过酶切位点连接到pCANTAB 5E噬菌粒载体,转化雄性大肠杆菌TG1,成功构建了大小为6×10~6的噬菌体展示免疫纳米抗体库。以VP1-His为靶标,经过3轮富集筛选,成功筛选得到1株特异性针对DHAV-1 VP1的纳米抗体,命名为Nb25。3.Nb25抗原表位的鉴定首先将DHAV-1 VP1基因分五段,通过EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点分别克隆入pGEX-6P-1原核表达载体,转化到Rosetta(DE3)表达菌株,诱导表达后分段蛋白经Dot-blot鉴定,初步鉴定Nb25表位位于~(172)PLPAPTSTTS~(181)之间,然后将肽段~(172)PLPAPTSTTS~(181)分别从N端和C端缩进,将截短的6个肽段进行Dot-blot鉴定,经鉴定~(174)PAPTST~(179)为Nb25精确表位。经同源性对比,该表位在NCBI已发布DHAV-1毒株中高度保守,而在DHAV-2和DHAV-3存在变异。综上所述,本研究成功利用噬菌体展示技术筛选制备了针对DHAV-1的纳米抗体Nb25,并且Nb25具有高度特异性,只与DHAV-1病毒离子反应,与其他病毒不反应。(本文来源于《山东农业大学》期刊2019-03-27）
徐菲[6]（2019）在《1型鸭甲肝病毒胶体金试纸条的研制》一文中研究指出鸭病毒性肝炎(DVH)是由鸭肝炎病毒(DHV)引起雏鸭的一种急性、高度致死性、接触性传染病。以肝脏肿大并伴有出血点,脾脏肿大、角弓反张、走路不稳等为主要特点。当下我国流行的DHV主要是1型鸭甲肝病毒(DHAV-1),也是在世界范围内主要流行的血清型。该病毒引起的DVH给养殖户造成了巨大的经济损失,严重制约了养鸭业的健康发展。由于临床生产中该病发病急,死亡快,而普通实验室检测方法又比较麻烦,耗时长,不利于该病的快速确诊与治疗。为了方便该病在临床生产中的快速诊断,本研究研发了快速检测DHAV-1的胶体金试纸条。本研究共分为叁部分。试验一、重组DHAV-1 VP1蛋白的诱导表达及纯化将实验室保存的重组表达DHAV-1 VP1蛋白的质粒pET32a-VP1进行了重新酶切鉴定和测序,再将重组蛋白进行诱导表达和Western blotting鉴定分析。结果表明,DHAV-1的VP1蛋白成功得到了表达,表达蛋白经纯化后浓度为2mg/mL,Western blotting鉴定分析发现该重组蛋白能够与DHAV-1的单克隆抗体4E6反应,具有良好的反应原性。试验二、DHAV-1多克隆抗体及单克隆抗体的制备将试验一诱导表达后纯化的重组蛋白按照每只BALB/c小鼠注射100μg的剂量,每隔两周皮下免疫一次,一共免疫5次,最后一次腹腔注射,用ELISA方法检测多克隆抗体效价。ELISA检测结果表明,随着免疫次数的增加,多克隆抗体的效价前期时呈快速递增趋势,后期逐渐平稳,5免后多抗效价为1:25600。将实验室保存的分泌DHAV-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株4E6复苏,注射到提前7天腹腔注射石蜡的BALB/c小鼠,10天后采集注射小鼠的腹水,用ELISA方法检测单克隆抗体效价。ELISA检测结果表明,单克隆抗体4E6的效价为1:51200。试验叁、检测DHAV-1胶体金试纸条的研制采用柠檬酸叁钠还原法制备不同直径大小的胶体金颗粒,调节到最适pH值后,将胶体金颗粒与纯化的抗体发生物理结合,吸附到玻璃纤维素膜上;将纯化的单抗作为捕获抗体,固定于硝酸纤维素膜上,制备胶体金免疫层析检测试纸条,并对最佳工作条件进行了优化。对胶体金试纸条的条件摸索最终确定胶体金标记抗体的最佳浓度为15μg/mL,标记最佳值为18μg/mL,最终确定为包被于NC膜的T线浓度为700μg/mL,包被C线浓度为600μg/mL。对制备的检测DHAV-1的胶体金试纸条进行了特异性、敏感性、重复性和稳定性检测,结果表明制备的胶体金检测试纸条能够与DHAV-1和DHAV-3发生反应,但不与鸭细小病毒、鸭圆环病毒、新城疫病毒以及阴性对照PBS反应;敏感性试验结果表明,试纸条可以检测到的最低病毒蛋白含量为9.198 ng/μL,灵敏性稍低于双抗体夹心方法;不同批次试纸条对样品的检测结果一致;4℃和25℃条件下保存6个月不影响检测结果。这表明本研究制备的检测DHAV-1的胶体金试纸条具有良好的特异性、敏感性、重复性和稳定性,由于其可以在5 min内得出检验结果,为DHAV-1的临床诊断提供了一种快速、现场检测的手段。(本文来源于《山东农业大学》期刊2019-03-27）
殷茵,闫艳新,张灿,任慧英,刘文华[7]（2019）在《1株3型鸭甲肝病毒的VP1和VP3基因的密码子使用偏性分析》一文中研究指出为了解临床分离的1株3型鸭甲肝病毒的结构蛋白VP1和VP3基因的密码子使用特性,本文对该毒株的VP1和VP3基因与从NCBI下载的同源性较高的3型鸭甲肝病毒进行了密码子偏性分析。结果表明,该毒株的VP1和VP3与所比对的5株3型鸭甲肝病毒VP1和VP3基因密码子使用模式基本一致,分别确定了12种和13种高频密码子,且偏爱以A或U结尾。通过6株3型鸭甲肝病毒的VP1和VP3基因的密码子偏性比较和聚类分析发现,其中4株分类地位相近。(本文来源于《青岛农业大学学报(自然科学版)》期刊2019年01期）
梁素芸,王笑言,邢光楠,张云生,郭占宝[8]（2018）在《北京鸭不同家系对鸭甲肝病毒的抗性和易感性差异观察》一文中研究指出引言鸭病毒性肝炎的致病病原包括鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)和鸭星状病毒。DHAV基因3型(DHAV-3)和基因1型(DHAV-1)是导致我国鸭病毒性肝炎发生的主要病原,相对于DHAV-1而言,DHAV-3的流行范围更广~([1-2])。本试验旨在观察北京鸭对DHAV-3的抗性和易感性与家系之间是否存在相关性。材料与方法(本文来源于《中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会论文集》期刊2018-11-21）
王樱历,张连芝,路化梅,孙俊颖,崔言顺[9]（2018）在《1型鸭甲肝病毒和鸭坦布苏病毒液相芯片抗体检测方法的建立》一文中研究指出为建立1型鸭甲肝病毒(duck hepatitis A virus type 1,DHAV-1)和鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)抗体的液相芯片检测方法,应用RT-PCR从鸭尿囊液中扩增获得714bp的DHAV-1VP1序列和1 503bp的DTMUV-E序列,将其分别克隆至原核表达载体pCold-Ⅲ和pET-28a(+)并进行表达。通过SDS-PAGE验证DHAV-1-VP1和DTMUV-E蛋白能够有效表达,通过Western blot进一步验证表达的蛋白均可与其对应的阳性血清发生反应。根据xMAP液相芯片技术原理,以表达的重组蛋白为抗原分别与不同编号的微球偶联,获得偶联复合体作为捕获载体,建立DHAV-1和DTMUV抗体单一和双重液相蛋白芯片检测方法。结果表明,DHAV-1和DTMUV的临界值分别为190.30和223.29,灵敏性检测2种阳性血清的抗体水平分别为1∶51 200和1∶6 400,重复性验证批内和批间变异系数分别为1.44%和3.94%,为DHAV-1和DTMUV抗体监测提供了高通量、重复性好、特异性高的抗体检测体系。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2018年08期）
姚琳,逄凤娇,张奇,庞倩倩,李风铃[10]（2019）在《基于Qβ噬菌体的甲肝病毒装甲RNA标准参考样品的研制》一文中研究指出【背景】目前食品中甲肝病毒分子的检测缺乏安全、稳定的RNA标准参考样品,影响了检测结果的科学性与准确性。【目的】基于Qβ噬菌体装甲RNA技术构建内含甲肝病毒检测靶标的装甲RNA (Hepatitis A virus armored RNA,AR-HAV),并开展初步定值、均匀性、稳定性研究,为HAV分子检测提供标准参考样品。【方法】人工合成包含Qβ噬菌体成熟酶编码基因、衣壳蛋白编码基因、包装位点、HAV检测靶标cDNA序列的核酸片段QGBHAV,并亚克隆到pET-28a(+)中构建重组质粒pET-QGBHAV,转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行原核表达,利用超速离心、丙烯葡聚糖凝胶层析柱纯化AR-HAV后电镜观察。通过实时荧光RT-PCR对AR-HAV进行初步定值及均匀性和稳定性研究。【结果】SDS-PAGE结果表明重组质粒在大肠杆菌中有约14.1 kD的目的蛋白表达;纯化后的AR-HAV无杂蛋白和残留质粒;电镜下可见结构完整、大小约为25nm的病毒样颗粒;定值结果显示,AR-HAV中检测靶标RNA的含量为(2.57±0.12)×107 copies/μL;均匀性分析结果为F=1.23<F0.05 (9,20),证实AR-HAV的均匀性良好;稳定性结果表明,AR-HAV在可37°C保存9 d,25°C保存25 d,4°C保存40 d,-20°C保存180 d,-80°C至少保存360 d。【结论】基于Qβ噬菌体制备的AR-HAV拷贝数高,具有良好的均匀性和稳定性,可为HAV的分子检测提供安全、稳定的标准参考样品。(本文来源于《微生物学通报》期刊2019年01期）
甲肝病毒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究利用全基因合成技术合成DHAV-2全基因组序列,并以此为标准品建立检测DHAV-2的TaqMan实时荧光定量PCR方法。结果表明:建立的方法敏感性高,最低检测限仅为33.7拷贝/μL;特异性强,对鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)、鸭甲肝病毒3型(DHAV-3)、禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)、番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus,MDRV)、新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,N-DRV)、鸭源禽Ⅰ型副黏病毒(Duck-origin avian paramyxovirus type 1,APMV-1)和禽坦布苏病毒(Avian Tembusu virus,ATmV)均无交叉扩增;重复性佳,组内和组间变异系数最高分别为1.68%和2.19%。对2018年福建地区临床收集的128份鸭源病料进行检测,结果未检测DHAV-2感染阳性。研究结果为DHAV-2的快速检测试剂盒研究及储备DHAV-2检测技术奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
甲肝病毒论文参考文献
[1].于书云,朱俊峰.鸭甲肝病毒的综合诊断与防治[J].畜牧兽医科技信息.2019
[2].万春和,陈翠腾,施少华,程龙飞,傅光华.鸭甲肝病毒2型TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立[J].中国家禽.2019
[3].卢荣辉,肖隆华,朱婷,祁保民.不同致病型鸭1型甲肝病毒感染鸭的病变及病毒分布比较[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集.2019
[4].扈琴吉,杨宏禹,路晓,于可响,孙晓军.鸭甲肝病毒RT-LAMP检测方法的建立[J].家禽科学.2019
[5].薛文湘.1型鸭甲肝病毒纳米抗体的筛选与鉴定[D].山东农业大学.2019
[6].徐菲.1型鸭甲肝病毒胶体金试纸条的研制[D].山东农业大学.2019
[7].殷茵,闫艳新,张灿,任慧英,刘文华.1株3型鸭甲肝病毒的VP1和VP3基因的密码子使用偏性分析[J].青岛农业大学学报(自然科学版).2019
[8].梁素芸,王笑言,邢光楠,张云生,郭占宝.北京鸭不同家系对鸭甲肝病毒的抗性和易感性差异观察[C].中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会论文集.2018
[9].王樱历,张连芝,路化梅,孙俊颖,崔言顺.1型鸭甲肝病毒和鸭坦布苏病毒液相芯片抗体检测方法的建立[J].中国兽医学报.2018
[10].姚琳,逄凤娇,张奇,庞倩倩,李风铃.基于Qβ噬菌体的甲肝病毒装甲RNA标准参考样品的研制[J].微生物学通报.2019
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