承德及周边地区野生菌采集鉴定及生物学活性分析

论文摘要

本论文是以野生食用菌为研究对象,对河北省承德市、围场满族蒙古族自治县、迁西县、三个区域采集的野生菌进行鉴定和生物学活性物质测定。主要研究结果如下:(1)野外采集并拍照记录12株野生菌,对12株野生菌进行传统的形态学鉴定,结果如下:chengde1为墨汁鬼伞(Coprinopsis atramentaria);chengde2为血红密孔菌(Trametes coccinea);chengde3和weichang2为云芝(Trametes versicolor);weichang1为强壮齿耳菌(Steccherinum robustius);weichang3为网纹马勃(Lycoperdon perlatum Pers);weichang4为珊瑚菌(Ramaria botrytoides);weichang5为木蹄层孔菌(Pyropolyporus fomentarius);weichang6为蒙古口蘑(Tricholoma mongolicum Imai);weichang7与qianxi1均为牛肝菌(Boletus);qianxi2为粉托鬼笔(Phallus hadriani)。(2)对采集的12株野生菌进行组织分离,分离得到了10株野生菌的菌丝体,菌丝生长速度测定结果表明,chengde1、chengde2、chengde3、weichang2、weichang1、qianxi2菌丝生长强壮且速度较快。(3)对菌丝长势好的6株野生菌的ITS序列进行PCR扩增,序列结果与NCBI数据库进行比对,通过贝叶斯建树方法利用MAFFT、Mrmodeltest2.3、Mrbayes v2.3等软件进行分子鉴定,得到结果如下:chengde1与Coprinopsis atramentaria序列一致性为99.82%,且与Coprinopsis atramentaria聚为一支,节点支持率为100%,从而判定chengde1为墨汁鬼伞(Coprinopsis atramentaria)。Chengde2与Pycnoporus coccineus序列一致性为100%,且与Pycnoporus coccineus聚为一支,节点支持率为100%,从而判定chengde2为血红密孔菌(Pycnoporus coccineus)。Chengde3与Trametes versicolor序列一致性为99.66%,且与Trametes versicolor聚为一支,节点支持率为100%,从而判定chengde3为云芝(Trametes versicolor)。Weichang2与Trametes versicolor序列一致性为94.86%,且与chengde3和Trametes versicolor聚为一支,节点支持率为100%,从而判定weichang2为云芝(Trametes versicolor)。weichang1与Steccherinum robustius序列一致性为95.17%,且与Steccherinum robustius聚为一支,节点支持率为100%,从而判定weichang1为齿耳菌(Steccherinum robustius)。qiaanxi2与Phallus hadriani序列一致性为99.37%,且与Phallus hadriani聚为一支,节点支持率为100%,从而判定qianxi2为粉托鬼笔(Phallus hadriani)。(4)对6株已经确定种属的野生菌进行生物学活性分析,用ABTS为底物方法测定漆酶含量,凯氏定氮法测定粗蛋白含量,考马斯亮蓝法测定可溶性蛋白含量,苯酚硫酸法测定粗多糖含量,琼脂扩散纸片法测定抗菌活性。结果如下:野生菌chengde1、chengde2、chengde3、weichang2、weichang1、qianxi2的漆酶含量分别是54.92 U/mL、45.61 U/mL、345 U/mL、187.03 U/mL、414.87 U/mL、36.91U/mL。粗蛋白含量分别为17.2%、18.52%、21.29%、24.79%、19.1%、7%。可溶性蛋白含量分别是0.49 mg/100g、5.58 mg/100g、4.73 mg/100g、3.53 mg/100g、4.1 mg/100g、11.25 mg/100g、粗多糖含量分别为1.9%、3.67%、2.4%、2.47%、2.78%、3.46%。抗菌活性结果显示,6株野生菌对大肠杆菌、金葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌四种指示菌均没有检测到抗菌作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 文献综述
•   1.1 食用菌的种类及价值
•     1.1.1 食用菌的种类
•     1.1.2 食用菌的食药用价值
•   1.2 野生食用菌开发及应用现状
•     1.2.1 野生食用菌的资源
•     1.2.2 野生食用菌的开发利用情况
•   1.3 野生食用菌的分类鉴定方法
•     1.3.1 形态鉴定在野生食用菌鉴定中的应用
•     1.3.2 rDNAITS序列在野生食用菌鉴定上的应用
•   1.4 生物学活性分析
•     1.4.1 多糖在食用菌中的应用及其研究进展
•     1.4.2 蛋白质在食用菌中的应用及其研究进展
•     1.4.3 漆酶在食用菌中的应用及其研究进展
•     1.4.4 抗菌活性在食用菌中的应用及其研究进展
•   1.5 本课题研究的目的及意义
•   1.6 技术路线
• 第2章 野生食用菌的采集与形态鉴定
•   2.1 材料和方法
•     2.1.1 采集工具
•     2.1.2 采集方法
•     2.1.3 形态鉴定方法
•   2.2 结果与分析
•     2.2.1 野生食用菌采集
•     2.2.2 野生食用菌形态鉴定
•   2.3 结论
• 第3章 野生食用菌的组织分离及菌丝生长速度测定
•   3.1 材料与方法
•     3.1.1 试验材料
•     3.1.2 试验方法
•   3.2 结果与分析
•     3.2.1 组织分离结果
•     3.2.2 菌丝生长速度测定结果
•   3.3 结论
• 第4章 野生菌种ITS鉴定及系统进化树的建立
•   4.1 材料与方法
•     4.1.1 试验材料
•     4.1.2 试验方法
•   4.2 结果与分析
•     4.2.1 DNA提取结果
•     4.2.2 PCR扩增结果
•     4.2.3 野生菌株系统发育树建立及结果分析
•   4.3 结论
• 第5章 野生食用菌生物学活性分析
•   5.1 材料与方法
•     5.1.1 试验材料
•     5.1.2 试验方法
•   5.2 结果与分析
•     5.2.1 野生菌株漆酶活力结果分析
•     5.2.2 野生菌株粗蛋白质含量结果分析
•     5.2.3 野生菌株可溶性蛋白含量结果分析
•     5.2.4 野生菌株粗多糖含量结果分析
•     5.2.5 野生菌株抗菌活性结果分析
•   5.3 结论
• 结论与展望
•   结论
•   展望
• 致谢
• 参考文献
• 作者简介

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 李超

导师: 郑素月,魏同科

关键词: 野生菌,组织分离,形态鉴定,分子鉴定,生物学活性

来源: 河北工程大学

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 河北工程大学

分类号: Q949.3

DOI: 10.27104/d.cnki.ghbjy.2019.000059

总页数: 69

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