导读:本文包含了肺微血管通透性论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:微血管,通透,内皮,细胞,损伤,曲霉,微管。
肺微血管通透性论文文献综述
穆盛田[1]（2019）在《普通肝素通过抑制微管解聚改善急性肺损伤时肺微血管内皮细胞的通透性》一文中研究指出脓毒症作为由感染引起的机体过度炎症反应导致的一组临床综合征,其最为主要的病理生理学改变就是微循环功能的障碍,引起组织细胞缺氧,最终导致器官功能的障碍。在这一过程中,血管内皮细胞的损伤是其中一个重要因素。同样,脓毒症导致的急性肺损伤的病理生理学特点就是肺毛细血管内皮细胞和肺泡上皮细胞通透性的增加,导致肺组织的水肿和炎症细胞的浸润。在这一过程中肺血管内皮细胞同样发挥着至关重要的作用。而肺血管内皮细胞屏障功能的完整性主要取决于内皮细胞本身的细胞骨架和细胞间连接,以及细胞与细胞基质间的相互作用。这其中细胞骨架(包括肌动蛋白微丝、微管和中间丝)发挥着重要作用,其除了能通过维持正常的细胞形态来影响内皮细胞屏障功能,还可以通过影响细胞间连接以及与细胞外基质的相互作用来影响内皮细胞间的通透性。大量研究证实细胞骨架,尤其是肌动蛋白微丝在调节内皮细胞通透性方面发挥着重要作用。同样有越来越多的研究发现微管在受到外界刺激以后反应更为迅速,早期即可出现聚合状态的改变,从而影响内皮细胞的通透性。普通肝素作为临床上一种常见的抗凝药具有多种生物学功能。除了抗凝,肝素在抗炎、抗黏附及抗细胞增殖的多方面均有作用。目前已有循证医学证据发现普通肝素可以改善脓毒症患者的预后。其一,普通肝素可以通过抗凝作用改善脓毒症早期的高凝状态,减少微血栓的形成,从而改善机体的微循环障碍;其二,普通肝素还可以通过抗炎作用减少脓毒症期间大量炎症因子的表达和释放,从而改善机体的应激状态和炎症反应;其叁,普通肝素还可以影响血管内皮细胞的功能,从而改善内皮细胞的屏障功能。然而,普通肝素究竟是通过何种途径来改善血管内皮细胞的屏障功能目前尚无确切研究机制。我科前期研究发现普通肝素可以通过改善内皮细胞微丝骨架的重构来提高内皮细胞的屏障功能,进一步研究还发现普通肝素可以通过抑制RhoA/ROCK通路影响肌球蛋白磷酸酶肌球蛋白结合亚基1(myosin phosphatase target subunit-1,MYPT1)的磷酸化水平,从而改善急性肺损伤肺血管的通透性。而鸟核苷酸转化因子H1(Guanine nucleotide exchange factor H1,GEF-H1)作为RhoA上游的信号分子已经被证实参与内皮细胞的屏障功能调节,其活性又与微管的聚合状态密切相关,而且微管本身也被证实参与内皮细胞的屏障功能调节,那么普通肝素是否是通过调节微管的聚合状态和GEF-H1的激活来改善内皮细胞的通透性是本研究的主要目的。P38 MAPK激酶通路参与机体多种生物学功能的调控,包括内皮细胞的屏障功能。我们前期已经发现普通肝素可以通过抑制p38 MAPK激酶的活化来发挥抗炎作用。因此,我们最后探讨p38 MAPK激酶通路是否也参与了普通肝素对微管聚合状态和内皮屏障功能的保护。研究目的:本研究的目的就是探讨普通肝素是否能够通过抑制脓毒症急性肺损伤时肺血管内皮细胞微管的解聚和GEF-H1的激活来改善肺微血管内皮细胞的通透性,以及其可能的作用机制。实验方法:方法1:在体实验:首先通过腹腔注射LPS的方法制造脓毒症小鼠急性肺损伤模型,LPS腹腔注射3小时、6小时和12小时后取小鼠肺组织进行病理HE染色来观察和评价小鼠急性肺损伤的程度,然后根据肺损伤程度选择之后LPS腹腔注射研究的干预时间,然后将实验分为4组:正常对照组、UFH对照组、LPS组和LPS+UFH组,之后通过小鼠肺组织病理HE染色、肺的湿/干重比以及小鼠尾静脉注射Evans Blue的方法来观察和评价普通肝素对脓毒症急性肺损伤小鼠肺血管通透性的保护性作用,最后留取小鼠肺组织-80℃保存,之后制备组织匀浆,通过Western Blot的方法来观察普通肝素对脓毒症急性肺损伤小鼠肺组织GEF-H1的表达情况、MYPT1的磷酸化水平以及乙酰化微管表达情况的影响。方法2:体外实验:首先通过MTT比色法选择LPS刺激人肺微血管内皮细胞(Human pulmonary microvascular endothelial cell,HPMEC)的合适刺激剂量,然后通过transwell小室种植HPMECs,应用Millicell?ERS-2电阻仪测量transwell小室内单层HPMECs的跨单层内皮细胞电阻(transendothelial electrical resistance,TEER)来选择干预时间及普通肝素的给药剂量,根据选定药物剂量和干预时间进行细胞刺激,实验分为4组,分别为正常对照组、UFH对照组、LPS组和LPS+UFH组,之后应用电阻抗方法测TEER和应用荧光分光光度仪测量透过Transwell小室的FITC-dextran的方法检测和评价普通肝素对LPS刺激HPMECs引起通透性增加的保护性作用。通过应用TRITC-phalloidin对F-actin进行免疫荧光染色的方法来观察普通肝素对LPS刺激HPMECs引起微丝F-actin重构和应力纤维的形成的保护性作用。通过Western blot的方法检测普通肝素对LPS刺激HPMECs后GEF-H1表达量和MYPY1磷酸化水平的影响。通过免疫荧光和Western blot的方法定性观察和定量分析普通肝素对LPS刺激HPMECs引起微管结构和聚合状态变化的改善作用。最后应用微管解聚剂Nocodazole刺激HPMECs,观察普通肝素对Nocodazole引起的微管解聚,GEF-H1的表达和MYPY1的磷酸化,以及微丝F-actin的重构和内皮细胞的通透性的影响。方法3:体外实验:首先通过Western Blot方法评价普通肝素对LPS刺激HPMECs后引起p38 MAPK磷酸化水平增加的影响。然后根据不同浓度p38 MAPK抑制剂SB203580对p38 MAPK磷酸化的抑制程度选择合适的剂量做后续实验。实验分为4组,分别为正常对照组、LPS组、LPS+UFH组和LPS+SB203580组,接着继续通过Millicell?ERS-2电阻仪测量transwell小室内单层HPMECs的TEER和荧光分光光度仪测量透过Transwell小室的FITC-dextran的方法检测和评价普通肝素和SB203580对LPS刺激HPMECs引起通透性增加的保护性作用。通过对F-actin进行免疫荧光染色的方法来观察普通肝素和SB203580对LPS刺激HPMECs引起微丝F-actin重构和应力纤维的形成的保护性作用。通过Western blot的方法检测普通肝素和SB203580对LPS刺激HPMECs后GEF-H1表达量和MYPY1磷酸化水平的影响。通过免疫荧光和Western blot的方法定性观察和定量分析普通肝素和SB203580对LPS刺激HPMECs引起微管结构和聚合状态变化的改善作用。实验结果:结果1:腹腔注射LPS制造的小鼠脓毒症急性肺损伤模型可见小鼠肺血管的通透性明显增加,应用普通肝素可以改善脓毒症急性肺损伤小鼠肺血管的通透性增加。普通肝素可以改善脓毒症急性肺损伤小鼠肺组织中微管乙酰化的程度,减少肺损伤小鼠GEF-H1的表达量和MYPT1的磷酸化程度。结果2:选择10μg/ml的LPS刺激HPMECs 6小时后可见Tranwell中单层HPMECs的TEER明显降低,透过Transwell的FITC-dextran明显增加,应用普通肝素(10U/ml)可以升高LPS刺激引起的TEER降低,减少FITC-dextran的渗出。LPS刺激HPMECs后还可见F-actin的重构和应力纤维的形成,导致细胞间隙增加,应用普通肝素可以改善F-actin的重构和应力纤维的形成,减少细胞间间隙。普通肝素还可以减少LPS刺激HPMECs引起的GEF-H1表达量的增加和MYPT1磷酸化水平的增加。普通肝素还可以改善LPS刺激HPMECs引起的微管解聚,即细胞单体微管的增加和聚合态微管的减少,以及乙酰化微管的减少。普通肝素还可以改善Nocodazole引起的微管解聚,GEF-H1表达的增加和MYPT1磷酸化水平的增加,抑制F-actin的重构和内皮细胞通透性的增加。结果3:LPS刺激HPMECs可引起其p38 MAPK磷酸化水平的增加,应用普通肝素可以抑制p38 MAPK的磷酸化水平。选择10μM的p38 MAPK抑制剂SB203580和普通肝素均可以提高LPS刺激引起的内皮细胞TEER降低,减少FITC-dextran的渗出。同样,两者均可以改善LPS刺激HPMECs引起的F-actin的重构和应力纤维的形成,减少细胞间间隙。两者还可以减少LPS刺激HPMECs引起的GEF-H1表达量的增加和MYPT1磷酸化水平的增加。最后,两者还能改善LPS刺激HPMECs引起的微管解聚,即细胞单体微管的增加和聚合态微管的减少,以及乙酰化微管的减少。实验结论:1.普通肝素可以改善脓毒症急性肺损伤小鼠肺血管的通透性。2.LPS可以通过引起微管解聚和GEF-H1的激活来引起肺微血管内皮细胞骨架的重构和通透性的改变。3.普通肝素可以通过抑制微管解聚和GEF-H1的激活,从而改善LPS引起的肺微血管内皮细胞骨架重构和通透性的改变。4.普通肝素可能通过p38 MAPK信号通路来抑制微管解聚和GEF-H1的激活,从而改善LPS引起的肺微血管内皮细胞骨架重构和通透性的改变。(本文来源于《中国医科大学》期刊2019-02-01）
刘清祥,韩剑剑,张钦[2]（2018）在《DCE-MRI定量分析对宫颈鳞癌微血管通透性的评估价值》一文中研究指出目的:探究动态增强磁共振成像(DCE-MRI)定量分析宫颈鳞癌微血管通透性的价值。方法:选取我院2016年4月至2017年9月收治的宫颈鳞癌患者36例(Ⅱ期18例、Ⅲ期18例),并选择同时期收治的宫颈正常患者(18例)为研究对象。分别采用DCE-MRI扫描进行检查及定量分析。观察肿瘤组织的TIC曲线特性并对比宫颈鳞癌组与正常宫颈组的微血管参数值和宫颈鳞癌Ⅱ期组和宫颈鳞癌Ⅲ期组的微血管参数值。结果:宫颈癌组织的TIC曲线为"Ⅲ"型。对照组宫颈正常的患者Ktrans、Ve及Kep明显低于宫颈鳞癌组;宫颈鳞癌Ⅱ期组Kep值显着低于宫颈鳞癌Ⅲ期组,Ve值显着高于宫颈鳞癌Ⅲ期组(P<0.05),2组Ktrans值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DCE-MRI定量分析宫颈鳞癌微血管通透性具有较高的价值。(本文来源于《沈阳医学院学报》期刊2018年06期）
徐凯,张俊峰,刘恒,周波,薛巍[3]（2018）在《脑胶质瘤微血管通透性灌注MRI研究进展》一文中研究指出肿瘤微血管高通透性是脑胶质瘤的典型病理特征,与肿瘤恶性程度、分子分型及病人预后密切相关。常规MRI无法真实准确反映肿瘤微血管通透性变化,临床准确诊疗胶质瘤有一定困难。灌注MRI能够无创、动态、定量地评价肿瘤微血管血流动力学特征,现已广泛应用于科研及临床工作中。以非对比剂灌注MRI作为重点,综述近年对比剂及非对比剂灌注MRI评价脑胶质瘤微血管通透性的临床应用及研究进展。(本文来源于《国际医学放射学杂志》期刊2018年06期）
肖仲祥,郑海珍,赵乐萍[4]（2018）在《痰热清对内毒素诱导致急性肺损伤肺微血管通透性的保护作用》一文中研究指出目的探讨痰热清注射液对内毒素诱导的大鼠急性肺损伤肺微血管通透性的保护作用。方法大鼠尾静脉注射内毒素建立急性肺损伤的模型,96只SD大鼠随机分为正常对照组、内毒素组、痰热清组和甲基泼尼松龙组,每组24只。观察各组给药后2、6、12 h肺微血管通透性和肺含水量的变化。结果内毒素组、痰热清组、甲基泼尼松龙组各时间点的肺微血管通透性和肺含水量均高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);痰热清组和甲基泼尼松龙组各时间点的肺微血管通透性和肺含水量均低于内毒素组,差异有统计学意义(P<0.05);2 h时,痰热清组与甲基泼尼松龙组比较,肺微血管通透性和肺含水量差异有统计学意义(P<0.05)。结论痰热清注射液可降低内毒素诱导的大鼠急性肺损伤肺微血管通透性和肺含水量,对内毒素所致的急性肺损伤有保护作用。(本文来源于《健康研究》期刊2018年03期）
宋珺,韩菁,孙越,施伟民[5]（2018）在《烟曲霉对肺微血管内皮细胞通透性的影响及可能机制》一文中研究指出目的探讨烟曲霉对肺微血管内皮细胞通透性的影响及其机制。方法利用激光共聚焦扫描显微镜检测人肺微血管内皮细胞肌动蛋白(F-actin)和细胞跨膜电阻仪测定细胞跨膜电位,以观察细胞通透性的改变,并利用p38 MAPK抑制剂、ROCK抑制剂和蛋白激酶C抑制剂探讨其机制。结果烟曲霉处理后肺微血管内皮细胞Factin染色的荧光强度显着下降(P<0.01),烟曲霉处理组也出现细胞跨膜电阻值的显着下降(P<0.01)。与单独烟曲霉处理组比较,SB203580(20μmol/L,p38 MAPK抑制剂)干预组、Y27632(20μmol/L,ROCK抑制剂)干预组以及LY317615(10μmol/L,蛋白激酶C抑制剂)干预组的跨膜电阻值均显着上升(P<0.05)。结论烟曲霉处理致肺微血管内皮细胞通透性增加,其机制可能涉及p38 MAPK、ROCK激酶以及蛋白激酶C通路。(本文来源于《同济大学学报(医学版)》期刊2018年03期）
袁胜霞[6]（2018）在《慢性低氧肺高压大鼠肺微血管内皮细胞中TRPV4对血管通透性的影响》一文中研究指出目的:探究慢性低氧肺高压大鼠肺微血管内皮细胞(Pulmonary Microvascular Endothelial Cells,PMVECs)上TRPV4通道及内皮通透性变化,明确TRPV4通道功能变化与内皮细胞通透性改变的相关性。方法:(1)清洁级雄性SD大鼠随机分为2组:正常对照组(CON)和慢性低氧组(CH):大鼠饲养于氧分压为9.5%~10.5%的密封有机玻璃箱内3W,3W后右心导管检查肺动脉平均压(RVSP)、右心重量指数(RVMI),并用石蜡包埋切片HE染色法鉴定低氧模型是否成功;(2)组织块贴壁法培养原代CON组和CH组大鼠PMVECs,并用免疫荧光法及FITC-BSI结合试验鉴定PMVECs;(3)透射电镜检测CH组大鼠PMVECs间紧密连接变化;(4)用Millicell ERS-2测transwell小室电阻变化,确定单层的PMVECs汇合长满,再用异硫氰酸荧光素(FITC)标记葡聚糖法(Pd法)检测CON组与CH组大鼠PMVECs通透性,明确CH组大鼠肺微血管内膜通透性改变;另外再检测TRPV4的激动剂和抑制剂对单层PMVECs通透性的干预,明确TRPV4与PMVECs通透性改变间的相关性;(5)使用实时定量RT-PCR法检测TRPV4、TJ相关蛋白Occludin、ZO-1等在CON组和CH组大鼠肺微血管内膜中mRNA表达量的差异;(6)Western-blot检测PMVECs膜上主要钙离子通道TRPV4和主要的TJ相关蛋白Occludin蛋白表达水平,明确CH组PMVECs中TRPV4及TJ相关蛋白表达变化;(7)用Fluo-3荧光测Ca~(2+)方法,测定CON及CH组大鼠PMVECs中[Ca~(2+)]_i的水平,明确CH-PH大鼠PMVECs基础该钙的改变;并检测TRPV4的特异性激动剂和抑制剂对PMVECs[Ca~(2+)]_i的影响,明确CH组基础钙的变化与TRPV4通道的相关性。结果:与正常组相比,(1)CH-PH模型大鼠的RVSP/mmHg(CON:27±2.61,CH:49±3.67,P<0.01)及对应的RVMI(CON:27.8±1.9,CH:47.3±2.3)均显着增高,肺小动脉血管壁平滑肌层明显增厚,管腔狭窄,提示CH-PH模型制备成功;(2)肺边缘组织块贴壁培养24 h有内皮细胞迁出,48 h后布满组织块周围,62 h后去组织,1 w左右长满培养瓶底70%以上,细胞形态从刚开始迁出的多边形变为铺路石样生长。免疫荧光技术显示vWF和CD31表达阳性,且FITC-BSI结合实验显示胞浆呈黄绿色荧光,提示成功培养出高纯度PMVECs;(3)透射电镜结果显示CH组大鼠PMVECs间紧密连接被破坏,且较CON组明显增大,提示CH组大鼠肺微血管内膜通透性升高;(4)TER法(transmembrane electrical resistance,TER)确定PMVECs汇合成单层后,用FITC-葡聚糖法检测通透性显示CH组Pd值(μl/cm2/h)显着增高(CON:12.5±1.87,CH:26.2±3.6,P<0.01),GSK101预处理再测Pd值,显示Pd值显着增高,而HC-067则显着拮抗了GSK101引起效应,提示CH组PMVECs的通透性显着增高,且与PMVECs胞膜上的TRPV4密切相关。(5)CH-PH模型大鼠PMVECs中TRPV4、TJ相关蛋白Occludin、ZO-1等的mRNA表达和蛋白表达水平变化显着,其中mRNA表达水平:Occludin显着降低(CON:1.12±0.60,CH:0.19±0.13,P<0.01)、ZO-1 mRNA的表达也降低(CON:1.10±0.15,CH:0.35±0.10,n>6,P<0.01)、TRPV4显着增高(CON:1.02±0.25,CH:1.67±0.53,P<0.05),另外蛋白表达水平:与mRNA表达水平一致,Occludin蛋白表达水平也显着降低,TRPV4蛋白表达水平显着增高,以上结果提示CH大鼠PMVECs胞膜上TRPV4 mRNA及蛋白表达水平显着上调,而TJ相关蛋白表达则下降;(6)CH组大鼠PMVECs中胞内钙(CON:107±6 nM,n>16;CH:137±30 nM,p﹤0.05)显着升高,提示CH-PH模型组大鼠PMVECs中基础钙明显增高;(8)此外,为了进一步了解PMVECs中TRPV4与血管通透性增加的内在联系,我们用TRPV4特异性激动剂GSK101测量[Ca~(2+)]_i同时检测它对血管通透性的影响,结果显示CH组的钙内流显着高于CON组,且PMVECs的通透性均显着增加;TRPV4特异性抑制剂HC-067对GSK101诱导引起的钙内流和通透性有显着拮抗作用。结论:(1)慢性低氧诱导PH大鼠肺微血管内皮细胞通透性增高,其主要的TJ相关蛋白Occludin、ZO-1等表达下调。(2)慢性低氧诱导PH大鼠肺微血管内皮细胞TRPV4通道mRNA/及蛋白表达水平及功能水平均上调。(3)TRPV4活化可显着增加单层肺微血管内皮细胞的通透性。本研究为肺高压发病机制的研究及治疗提供了全新的研究思路。(本文来源于《福建医科大学》期刊2018-03-01）
张祝辉[7]（2018）在《T_1加权像动态对比增强MRI在脑胶质瘤微血管通透性及病理分级评价中的应用价值》一文中研究指出目的了解脑胶质瘤微血管通透性及病理分级评价中应用T_1加权像动态对比增强MRI的价值。方法对30例脑胶质瘤患者于术前进行T_1加权像动态对比增强MRI,分析定量参数容积转运参数(Ktrans)、血管外细胞外间隙容积比(Ve)及其与疾病程度的相关性。以受试者工作特征曲线(ROC)分析不同病理分级Ktrans、Ve最佳阈值,及敏感度、特异度与准确度。结果 LGG(低级别胶质瘤)Ktrans与Ve值较HCG(高级别胶质瘤)低(P<0.05),但Ⅲ级与Ⅳ级Ktrans与Ve差异无统计学意义(P>0.05)。当Ktrans为0.055/min,Ve为0.297时区分Ⅱ级与Ⅲ级较好,为0.083/min,0.343时区分Ⅱ级与Ⅳ级较好。Ktrans与Ve两者间及其与病理程度均为正相关性。结论 T_1加权像动态对比增强MRI评价脑胶质瘤微血管通透性及病理分级是一种较为有效的临床辅助诊断方式。(本文来源于《医疗装备》期刊2018年01期）
冯馨乐[8]（2017）在《CTP对不同海拔地区急性期脑梗死微血管通透性的对比研究》一文中研究指出目的:利用CTP技术,探讨不同海拔地区脑梗死患者急性期微血管通透性的变化,分析在高海拔低氧环境下脑梗死患者发生出血转换的特征,以利于对AIS患者早期进行干预治疗,预防HT的发生。方法:收集高海拔地区脑梗死急性期患者32例、中海拔地区脑梗死急性期患者32例,入院后立即行常规头颅CT平扫及CTP扫描检查。图像经后处理得到MTT、PS等值及其灌注图像信息。结果:1、高海拔组PS值增高区域占MTT延长区域的比值(0.54±0.13)比中海拔组(0.42±0.27)高,差异具有统计学意义(P<0.05);2、高海拔组PS值(4.53±1.99 ml/100g/min)较中海拔组(3.00±1.54ml/100g/min)高,差异具有统计学意义(P<0.05)。3、高海拔组AIS患者头颅CT平扫复查后有14例发生了HT,当SPS/SMTT为0.56时,预测HT发生的敏感度为71.4%、特异度为83.3%;当PS值为4.67ml/100g/min时,预测HT发生的敏感度为85.7%、特异度为77.8%;中海拔组AIS患者头颅CT平扫复查后有9例发生了HT,当SPS/SMTT为0.43时,预测HT的发生敏感度为88.9%、特异度为65.2%;PS值为3.08 ml/100g/min时,预测HT发生的敏感度为88.9%、特异度为73.9%。结论:不同海拔地区脑梗死急性期患者PS值不同,且PS增高区域所占脑梗死面积有所不同,反映脑梗死后微血管通透性以及BBB坏程度不同,且PS值对HT发生的预测诊断价值较SPS/SMTT高。高海拔地区急性脑梗死患者可能更容易发生出血转换。(本文来源于《青海大学》期刊2017-05-01）
胡淑玲[9]（2016）在《MSC旁分泌VEGF/HGF对ALI大鼠肺微血管内皮通透性和肺损伤修复的作用及机制研究》一文中研究指出第一部分VEGF/HGF稳定低表达的MSC构建及鉴定目的:构建血管内皮生长因子(VEGF)/肝细胞生长因子(HGF)稳定低表达的骨髓来源的间充质干细胞(MSC)。方法:(1)采用直接贴壁法从SD大鼠骨髓分离、纯化获得MSC,并通过流式细胞学检测表面标志物和诱导成脂、成骨、成软骨分化以对其进行鉴定;(2)构建携带VEGF或HGF基因干扰序列的慢病毒质粒,设立只表达绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)的无意义序列作为空白对照质粒,然后分别通过Polybrene与质粒LV3(携带 GFP&Puro)-NC,LV3(携带 GFP&Puro)-VEGFA-Rat-1536 和 LV3(携带GFP&Puro)-HGF-Rat-591分别感染293T细胞进行质粒的包装,然后用所获得的携带目的基因干扰序列的慢病毒转染MSC,用嘌呤霉素(Puromycin)进行药物筛选,挑取克隆纯化传代培养10代后,荧光显微镜下观察报告基因GFP阳性细胞,并拍照计数分析GFP阳性细胞比率评估转染效率;(3)qRT-PCR(Quantitative real-time polymerase chain reaction)法、Western blot 法以及 ELISA 法分别检测 MSC 内 VEGF或HGF mRNA水平、目的蛋白表达水平以及细胞外目的蛋白分泌水平以评估基因干扰效果;(4)体外划痕实验及Transwell小室迁移实验评估基因干扰对MSC水平和垂直迁移能力的影响。结果:(1)分离纯化后的MSC为成纤维细胞样,SD大鼠骨髓来源的MSC表面表达CD90、CD44、CD34,阳性率≥70%,而不表达 CD29、CD45、CD11b/c,阳性率≤5%,且可体外诱导分化为成脂肪细胞、成骨细胞和成软骨细胞;(2)慢病毒介导VEGF或HGF基因干扰的MSC,传代培养10代后,荧光蛋白GFP的携带率仍高达90%以上;(3)VEGF基因干扰后,MSC内VEGFmRNA水平明显下降(P<0.05),VEGF蛋白表达水平明显减低(P<0.05),MSC对VEGF的分泌亦明显减少(P<0.05);HGF基因干扰后,MSC内HGFmRNA水平明显下降(P<0.05),HGF蛋白表达水平明显减低(P<0.05),MSC对HGF的分泌明显减少(P<0.05);(4)与野生型MSC相比,VEGF/HGF基因干扰后MSC的水平和垂直迁移能力无明显变化(P>0.05),提示从理论上来说,MSC-ShVEGF/MSC-ShVEGF具有与MSC同等的向损伤部位归巢的能力。结论:借助慢病毒载体介导的VEGF或HGF基因干扰技术,成功构建了对VEGF/HGF稳定低表达且仍具备向损伤组织归巢能力的MSC细胞株,从而为进一步在体实验明确旁分泌VEGF/HGF在MSC改善ALI肺微血管通透性和促进肺损伤修复中的作用和机制奠定了可靠的基础。第二部分MSC旁分泌VEGF对ALI大鼠肺微血管内皮通透性和肺损伤修复的影响目的:研究MSC旁分泌VEGF对ALI大鼠肺微血管内皮通透性和肺损伤修复的影响。方法:SD大鼠随机分为NS+PBS组(正常对照组),LPS+PBS组(ALI组),LPS+MSC组(MSC 治疗组),LPS+MSC-GFP 组(MSC-GFP 治疗组),LPS+MSC-ShVEGF 组(VEGF基因干扰的MSC治疗组),气道内滴入LPS复制大鼠ALI动物模型,按分组经不同处理后,1h、6h和24h处死大鼠并留取肺组织标本,①计算肺湿重与体重比(LWW/BW)以及伊文思兰实验评估肺水肿和肺血管通透性情况;②免疫荧光染色评估MSC移植后24小时肺组织中黏附连接蛋白VE-Cadherin的表达水平;③TUNEL染色检测MSC移植后24小时肺血管内皮细胞凋亡情况;④HE染色行组织病理学检查和肺损伤评分评价肺损伤程度;⑤ELISA检测肺部炎症因子IL-1β和IL-10水平评价肺部炎症程度;⑥ELISA检测肺组织VEGF蛋白水平。结果:①MSC-ShVEGF移植对ALI肺微血管通透性的影响:与MSC或MSC-GFP组相比,MSC-ShVEGF组LWW/BW在MSC移植治疗后24小时明显升高(P<0.05),MSC-ShVEGF组对伊文思兰的通透性在MSC移植治疗后6小时和24小时均明显升高(P<0.05);②MSC-ShVEGF移植对ALI肺组织细胞间黏附连接蛋白VE-cadherin表达水平的影响:与MSC或MSC-GFP组相比,MSC-ShVEGF组肺组织细胞间黏附连接蛋白VE-cadherin表达水平在MSC移植治疗后24小时明显下降(P<0.05);③MSC-ShVEGF移植对ALI肺血管内皮细胞凋亡的影响:与MSC或MSC-GFP组相比,MSC-ShVEGF组肺血管内皮细胞凋亡在MSC移植治疗后24小时明显增加(P<0.05);④MSC-ShVEGF移植对ALI肺组织病理的影响:与MSC或MSC-GFP组相比,MSC-ShVEGF组肺组织病理损伤和肺损伤评分在MSC移植治疗后24小时明显升高(P<0.05);⑤MSC-ShVEGF移植对ALI肺部炎症的影响:与MSC或MSC-GFP组相比,MSC-ShVEGF组肺部促炎因子IL-1β的表达水平明显增高,而抑炎因子IL-10的水平明显降低(P<0.05);⑥MSC-ShVEGF移植对ALI肺组织VEGF表达水平的影响:与MSC或MSC-GFP组相比,MSC-ShVEGF组肺组织中VEGF的表达水平在MSC移植治疗后24小时明显降低(P<0.05)。结论:①MSC通过旁分泌VEGF有利于稳定LPS诱导的ALI大鼠肺组织细胞间连接结构、减少肺血管内皮细胞凋亡从而降低肺组织肺血管通透性,调节肺部炎症反应失衡,减轻肺组织病理损伤;②这些肺保护效应可能是MSC通过旁分泌VEGF纠正ALI肺部VEGF水平而实现的。第叁部分MSC旁分泌HGF对ALI大鼠肺微血管内皮通透性和肺损伤修复的影响目的:研究MSC旁分泌HGF对ALI大鼠肺微血管内皮通透性和肺损伤修复的影响。方法:SD大鼠随机分为NS+PBS组(正常对照组),LPS+PBS组(ALI组),LPS+MSC组(MSC 治疗组),LPS+MSC-GFP 组(MSC-GFP 治疗组),LPS+MSC-ShHGF 组(HGF基因干扰的MSC治疗组),气道内滴入LPS复制ALI大鼠动物模型,按分组经不同处理后,1h、6h、24h和48h处死大鼠并留取肺组织标本,①计算肺湿重与体重比以及伊文思兰实验评估肺水肿程度和肺血管通透性情况;②HE染色行肺组织病理学检查和肺损伤评分评价肺损伤程度;③免疫荧光染色定位评估MSC移植后24小时肺组织中黏附连接蛋白VE-Cadherin的表达情况;④TUNEL染色检测MSC移植后24小时肺血管内皮细胞凋亡情况;⑤ELISA检测肺部炎症因子IL-1β和IL-10水平评价肺部炎症程度;⑥免疫组化检测MSC移植后24小时肺组织MSC的存留情况;⑦ELISA检测肺组织HGF蛋白水平。结果:①MSC-ShHGF移植对ALI肺微血管通透性的影响:与MSC或MSC-GFP组相比,MSC-ShHGF组LWW/BW在MSC移植治疗后24小时明显升高(P<0.05),MSC-ShHGF组肺血管对伊文思兰的通透性在MSC移植治疗后6小时和24小时均明显升高(P<0.05);②MSC-ShHGF移植对ALI肺组织细胞间黏附连接蛋白VE-cadherin表达水平的影响:与MSC或MSC-GFP组相比,MSC-ShHGF组肺组织细胞间黏附连接蛋白VE-cadherin表达在MSC移植治疗后24小时明显减少(P<0.05);③MSC-ShHGF移植对ALI肺血管内皮细胞凋亡的影响:与MSC或MSC-GFP组相比,MSC-ShHGF组肺血管内皮细胞凋亡在MSC移植治疗后24小时明显增加(P<0.05);④MSC-ShHGF移植对ALI肺组织病理的影响:与MSC或MSC-GFP组相比,MSC-ShHGF组肺组织病理和肺损伤评分在MSC移植治疗后24小时明显升高(P<0.05);⑤MSC-ShHGF移植对ALI肺部炎症的影响:与MSC或MSC-GFP组相比,MSC-ShHGF组肺组织促炎因子IL-1β的表达水平明显增高,而抑炎因子IL-10的水平明显降低(P<0.05);⑥MSC-ShHGF移植后24小时MSC在损伤肺组织的存留情况:与MSC或MSC-GFP组相比,MSC-ShHGF组肺部MSC的存留在MSC移植治疗后24小时无明显改变(P>0.05);⑦MSC-ShHGF移植对ALI肺组织HGF表达水平的影响:与MSC或MSC-GFP组相比,MSC-ShHGF组肺部HGF的表达水平在MSC移植治疗后24小时和48小时明显降低(P<0.05)。结论:①MSC旁分泌HGF能稳定LPS诱导的ALI大鼠肺组织细胞间连接结构、减少肺血管内皮细胞凋亡而降低肺组织肺血管通透性,调节肺部炎症反应失衡,减轻肺组织病理损伤;②MSC通过旁分泌HGF可以上调ALI时肺部HGF水平,从而发挥对ALI肺组织的保护作用。(本文来源于《东南大学》期刊2016-12-01）
孙熠,陈泊霖,金学隆[10]（2016）在《放射性脑损伤大鼠脑皮层组织中胶质原纤维酸性蛋白表达及微血管通透性观察》一文中研究指出目的观察放射性脑损伤(RIBI)大鼠脑皮层胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)及微血管通透性。方法SPF清洁级成年健康雄性SD大鼠48只分为A、B、C组和对照组各12只。A、B、C组采用CT大脑局部照射造成RIBI,2 Gy/次,共照射3次,总照射剂量6 Gy。对照组仅腹腔注射麻醉大鼠,不行大脑局部照射。分别于照射7、14、28 d时取各组部分大鼠,断头处死后取脑组织,采用免疫组化法检测各组脑皮层GFAP。于照射7、14、28 d时取各组部分大鼠,断头处死后取脑组织,采用微循环显微仪观察各组损伤脑皮层微血管通透性。结果 A、B、C组和对照组的血管通透性分别为0.70±0.082、0.58±0.019、0.54±0.058、0.39±0.073,组间比较,P均<0.05。A、B、C组和对照组脑皮层GFAP的IOD值分别为145 006±5 266.8、101 250±9 034.8、68 313±7 633.4、17 617±5 870.7,组间比较,P均<0.05。结论 RIBI大鼠损伤脑皮层存在GFAP高表达,GFAP的表达水平与微血管通透性的变化趋势相一致,GFAP可能参与了RIBI的发生发展。(本文来源于《山东医药》期刊2016年39期）
肺微血管通透性论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探究动态增强磁共振成像(DCE-MRI)定量分析宫颈鳞癌微血管通透性的价值。方法:选取我院2016年4月至2017年9月收治的宫颈鳞癌患者36例(Ⅱ期18例、Ⅲ期18例),并选择同时期收治的宫颈正常患者(18例)为研究对象。分别采用DCE-MRI扫描进行检查及定量分析。观察肿瘤组织的TIC曲线特性并对比宫颈鳞癌组与正常宫颈组的微血管参数值和宫颈鳞癌Ⅱ期组和宫颈鳞癌Ⅲ期组的微血管参数值。结果:宫颈癌组织的TIC曲线为"Ⅲ"型。对照组宫颈正常的患者Ktrans、Ve及Kep明显低于宫颈鳞癌组;宫颈鳞癌Ⅱ期组Kep值显着低于宫颈鳞癌Ⅲ期组,Ve值显着高于宫颈鳞癌Ⅲ期组(P<0.05),2组Ktrans值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DCE-MRI定量分析宫颈鳞癌微血管通透性具有较高的价值。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肺微血管通透性论文参考文献
[1].穆盛田.普通肝素通过抑制微管解聚改善急性肺损伤时肺微血管内皮细胞的通透性[D].中国医科大学.2019
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[3].徐凯,张俊峰,刘恒,周波,薛巍.脑胶质瘤微血管通透性灌注MRI研究进展[J].国际医学放射学杂志.2018
[4].肖仲祥,郑海珍,赵乐萍.痰热清对内毒素诱导致急性肺损伤肺微血管通透性的保护作用[J].健康研究.2018
[5].宋珺,韩菁,孙越,施伟民.烟曲霉对肺微血管内皮细胞通透性的影响及可能机制[J].同济大学学报(医学版).2018
[6].袁胜霞.慢性低氧肺高压大鼠肺微血管内皮细胞中TRPV4对血管通透性的影响[D].福建医科大学.2018
[7].张祝辉.T_1加权像动态对比增强MRI在脑胶质瘤微血管通透性及病理分级评价中的应用价值[J].医疗装备.2018
[8].冯馨乐.CTP对不同海拔地区急性期脑梗死微血管通透性的对比研究[D].青海大学.2017
[9].胡淑玲.MSC旁分泌VEGF/HGF对ALI大鼠肺微血管内皮通透性和肺损伤修复的作用及机制研究[D].东南大学.2016
[10].孙熠,陈泊霖,金学隆.放射性脑损伤大鼠脑皮层组织中胶质原纤维酸性蛋白表达及微血管通透性观察[J].山东医药.2016
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