导读:本文包含了肝复康论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,信号,因子,肝纤维化,星状,中药,激酶。
肝复康论文文献综述
崔剑巍,张菁,成伟忠,屠红[1]（2018）在《中药复方“肝复康”对慢性乙型肝炎患者HBsAg水平观察》一文中研究指出目的:观察中药复方"肝复康"对乙肝表面抗原的临床疗效。方法:以"肝复康"对255例慢性乙型肝炎患者进行干预,观察乙肝病毒血清标志物、HBV-DNA、肝功能及细胞免疫功能的变化。结果:经96周干预,76.5%患者的HBsAg定量较基线明显降低(P<0.05),其中13.7%患者获得免疫控制,3.9%实现HBsAg清除;HBsAg浓度越低阴转速度越快。结论:中药复方"肝复康"能够通过免疫调节控制HBV复制,降低HBsAg水平,对HBsAg低水平者和获得免疫控制的人群可获得更高的清除率,是一条值得继续探索的中医治疗途径。(本文来源于《中华中医药杂志》期刊2018年02期）
郑林芳,廖学林[2]（2017）在《肝复康汤治疗慢性肝炎疗效观察》一文中研究指出急性肝炎失治或误治，转为慢性肝炎，缠绵难愈，严重危害人类健康，近叁年来，笔者和同事们应用自拟“肝复康汤”治疗慢性肝炎，获得较好疗效，现介绍于下：陈某，女，52岁，农民，1990年2月25日初诊。患者2个月前因肝功能异常，肝脾肿大，下肢浮肿被诊断(本文来源于《中国中医药报》期刊2017-04-17）
贾玉杰,赵芳,张彩华,姜妙娜,孔露[3]（2016）在《中药肝复康对TNF-α介导的炎症性肝损伤和大鼠肝纤维化的抑制作用》一文中研究指出目的探讨中药肝复康对肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)介导的核转录因子-κB(nuclear transcription factor-kappa B,NF-κB)通路引起的炎症性肝损伤和肝纤维化的抑制作用。方法将健康SD大鼠随机分为五组:正常对照组(C)、模型组(M)和肝复康治疗组(高、中和低剂量组)。HE染色观察肝组织形态结构变化,免疫组织化学和免疫蛋白印迹法(Western-blot)在蛋白水平检测各组肝组织TNF-α的表达,逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RTPCR)在基因水平检测各组肝组织TNF-α、IκB激酶IKK-α、NF-κB的抑制蛋白IκB-α、NF-κBp65的表达。结果免疫组织化学和Western-blot结果显示:TNF-α在正常大鼠肝组织几乎不表达,而模型组有显着阳性表达(P<0.01);与模型组相比,肝复康中剂量治疗组TNF-α阳性表达明显减少(P<0.05)。RT-PCR结果显示:与正常组相比,TNF-α、IKK-α、NF-κBp65的基因表达在模型组明显上调(P<0.01),与模型组相比,肝复康治疗组的各基因表达水平明显降低,中剂量治疗组最显着(P<0.01)。TNF-α与NF-κBp65的表达成正相关,而与IκB-α的表达成负相关。结论肝复康对炎症性肝损伤和肝纤维化有显著治疗作用,可能是通过抑制TNF-α介导的NF-κB信号转导通路来发挥抗纤维化的作用。(本文来源于《中国微生态学杂志》期刊2016年02期）
贾玉杰,赵芳,张彩华,姜妙娜,李骢[4]（2015）在《肝复康对乙醛刺激肝星状细胞NF-кB通路活化的抑制作用》一文中研究指出目的分析核因子-кB(nuclear transcription factor-kappa B,NF-кB适通路在乙醛刺激肝星状细胞活化和肝复康调节中的变化,探究肝复康对乙醛刺激肝星状细胞NF-кB通路活化的抑制作用。方法将大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)随机分为3组:正常对照组、乙醛刺激组及肝复康治疗组。免疫蛋白印迹法(Western-blot)在蛋白水平检测肝星状细胞中各组TNF-α的表达,逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)在基因水平检测肝星状细胞各组TNF-α、IкB激酶IкK-α、NF-кBP65及NF-кB的抑制蛋白IкB-α的表达。结果 Western-blot结果显示:TNF-α在正常大鼠肝星状细胞中几乎不表达,而乙醛刺激组有显着阳性表达(P<0.01);肝复康治疗组TNF-α阳性表达则明显减少(P<0.05)。RT-PCR结果显示:与正常组相比,乙醛刺激组TNF-α、IкK-α、NF-кBP65的基因表达明显上调(P<0.01,P<0.05),IкB-α的表达降低(P<0.01),肝复康治疗组的各基因表达水平显着恢复。TNF-α和NF-кBP65的表达成正相关,和IкB-α的表达成负相关。结论 TNF-α介导的NF-кB信号转导通路在酒精性肝纤维化的发生和进展中呈活化状态,肝复康对其有显着性抑制作用。(本文来源于《中国微生态学杂志》期刊2015年07期）
李丝冰[5]（2015）在《肝复康和丹参对肝纤维化wnt经典通路的影响》一文中研究指出目的:wnt/β-catenin是一种能维持组织器官稳态的高度保守的信号系统。近来研究显示异常wnt/β-catenin信号通路与肝脏纤维组织增生的发生发展有密切联系,表明它可能是中医药物作用于肝脏纤维化新的治疗靶点。肝复康是我校病理生理教研室经过反复实验总结出的中药防治肝纤维化经验方。它具有改善肝脏功能、延缓脂肪变性等效用。丹参是一种具有改善肝脏组织微循环,促进细胞代谢的单味中药。CCL4诱导的大鼠肝纤维化模型饲养一段时间后,取大鼠肝脏组织进行实验。模型组、肝复康治疗组和丹参治疗组的比较是为了观察肝复康和丹参是否能改善肝纤维化病理学形态结构,减少肝星状细胞活化标志α平滑肌肌动蛋白的含量,抑制促纤维化通路wnt/β-catenin靶基因的表达。正常对照组、肝复康对照组和丹参对照组的比较是研究肝复康和丹参能否对正常肝脏wnt经典通路产生活化影响而有促肝纤维化毒性。本次试验通过以上六个组别的设立来探讨肝复康和丹参对肝纤维化wnt/β-catenin的作用机制并对丹参和肝复康干预肝纤维化wnt/β-catenin通路的效果进行比较。大连医科大学动物实验中心提供60只健康SD大鼠,清洁级,体重200-250克(雌雄不限)。正常喂养一周后,随机分为丹参治疗组(D)、肝复康对照组(GC)、丹参对照组(DC)、正常对照组(C)、模型组(M)和肝复康治疗组(MG)各10只。除对照组外,其余大鼠每周两次皮下注射橄榄油稀释的10%的CCl4溶液(5ml/kg),共8周。肝复康对照组、丹参对照组和正常对照组以同样方法皮下注射生理盐水共8周。药物对照组、丹参治疗组和肝复康治疗组于造模第四周起开始分别用丹参2.5ml/kg/天和肝复康4.16ml/kg/天灌胃大鼠,持续到第8周。肝复康和丹参药物浓度分别为315mg/kg和250mg/kg。以上各剂量药物均溶于10ml/kg的生理盐水中。于8周末处死各组大鼠,即刻切取肝组织。一部分用10%的甲醛固定并制成石蜡切片,HE染色后光镜下观察其形态结构。另一部分于-80℃冰箱保存用于分子生物学检测。免疫组织化学法观察和定位α平滑肌肌动蛋白的分布、表达及含量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Tcf-4、β-连环蛋白(β-catenin)、wnt1、wnt3a的表达水平。β-连环蛋白用免疫蛋白印迹(Western blot)方法检测。SPSS17.0软件包应用多种统计学方法处理实验数据。P<0.05为差异有意义,P<0.01为差异有显着性意义。方法:结果:观察各组大鼠精神状态,进食及运动情况。处死后观察各组大鼠大体肝脏情况。HE染色结果显示模型组大鼠肝细胞水肿和脂肪变性,假小叶形成。丹参对照组、肝复康对照组和正常对照组肝小叶结构清晰完整。肝复康治疗组肝小叶结构明显改善,细胞脂肪变性减少。丹参治疗组效果不明显。免疫组化半定量显示肝复康治疗组大鼠肝组织α-SMA的累计光密度值明显低于模型组并具有统计学意义(P<0.01),丹参治疗组大鼠肝组织α-SMA的累计光密度值与模型组无显着性差异,丹参对照组、肝复康对照组和正常对照组叁者α-SMA的累计光密度值无显着性差异。模型组α-SMA较丹参对照组、正常对照组、肝复康对照组显着增加(P<0.01)。CCL4处理过的模型组进行RT-PCR结果显示,wnt1、wnt3a、Cyclin D1、Tcf-4、β-catenin的m RNA较丹参对照组、正常对照组、肝复康对照组显着增加(P<0.01),肝复康对照组、丹参对照组和正常对照组叁者比较无显着性差异,肝复康治疗组m RNA比模型组明显下降(P<0.05),丹参治疗组与模型组比较无显着性差异。Western blot结果显示β-catenin在肝复康对照组、丹参对照组和正常对照组表达最少,对照组表达明显低于丹参治疗组与模型组(P<0.01),肝复康治疗组与模型组相比表达明显下调(P<0.05)。结论:1.肝复康和丹参对正常大鼠肝脏组织wnt经典通路无影响。2.肝复康能抑制wnt经典通路靶基因的表达来达到延缓脂肪变性和抑制纤维细胞增殖的目的。3.中药肝复康抑制大鼠肝纤维化程度比丹参效果理想。(本文来源于《大连医科大学》期刊2015-03-01）
张坤,姜妙娜,张彩华,李骢,贾玉杰[6]（2014）在《Effects of Ganfukang(肝复康) on Expression of Connective Tissue Growth Factor and Focal Adhesion Kinase/Protein Kinase B Signal Pathway in Hepatic Fibrosis Rats》一文中研究指出Objeclive:To investigate the effect of Ganfukang(肝复康,GFK)on connective tissue growth factor(CTGF)and focal adhesion Kinase(FAK)/protein kinase B(PKB or Akt)signal pathway in a hepatic fibrosis rat model and to explore the underlying therapeutic molecular mechanisms of GFK.Methods:Fifty SD rats were randomly divided into five groups as follows:the control group,the model group(repeated subcutaneous injection of CCl_4),and the three GFK treatment groups(31.25,312.5,and 3125 mg/kg,intragastric administration).Reverse transcriptase-polymerase chain reaction(RT-PCR),Western blotting,and immunohistochemistry were used to examine the expression of CTGF,integrin α5,integrin β1,FAK/Akt signal pathway,cyclinD1,and collagen in the different-treated rats.Results:GFK attenuated the up-regulation of CTGF,integrin α5,and integrin β1 in hepatic fibrosis rats and suppressed both the phosphorylation of FAK and the phosphorylation of Akt simultaneously(P<0.01).At the same time,the expression of cyclinD1,collagen Ⅰ,and collagen Ⅲ was decreased by GFK significantly(P<0.01).Conclusions:CTGF and FAK/Akt signal pathway were activated in the CCl_4-induced hepatic fibrosis rats,which contribute to increased expression of cyclinD1 and collagen genes.The mechanisms of the anti-fibrosis activity of GFK may be due to its effects against CTGF and FAkIAkt signal pathway.(本文来源于《Chinese Journal of Integrative Medicine》期刊2014年06期）
王月[7]（2014）在《肝复康及XAV939对非经典Wnt/RhoA/ROCK信号通路的影响》一文中研究指出目的：肝纤维化被认为是大部分肝脏慢性病变发展过程中必经的过程，并可进一步发展到肝硬化以至于肝癌。肝癌是我国高发的癌症之一，所以我国医学临床一直大力致力于肝癌的控制与干预。现今医学界普遍认为肝纤维化发展到肝硬化直到肝癌这一系列发展过程中纤维化到肝硬化是作为病变是否可逆的关键节点，即纤维化可逆而肝硬化不可逆。所以肝纤维化的干预与治疗在控制与预防肝硬化方面又有着重要作用。肝纤维化发展的核心是肝星状细胞的活化，大量研究证实Wnt信号传导通路参与肝纤维化的发展，根据不同的Wnt蛋白是否产生内源性β-catenin积累信号参与分为经典与非经典通路。其中Wnt经典通路（Wnt/β-catenin信号通路）多年来已有大量研究，而非经典Wnt信号通路中包含叁条通路相对复杂且研究尚少。其中RhoA/ROCK信号通路参与多种疾病的发生，细胞的收缩、迁移、增殖、凋亡及基因的表达都有参与。小分子物质XAV939用于Wnt经典通路的干预已有研究证实其作用。但应用于肝细胞的研究还尚少。本此实验设计是把中药肝复康和小分子抑制剂XAV939干预肝星状细胞HSC-T6株，检测他们对致肝纤维化核心指标及非经典Wnt/RhoA/ROCK信号通路的影响与作用。来进一步研究探索经典Wnt信号通路与非经典Wnt信号通路间是否存在着相互联系。方法：用DMEM培养基培养HSC-T6细胞，其中含有胎牛血清10%，放于温度为37℃，CO2含量为5%孵箱中，进行传代培养。等到细胞成对数增长时，用不含胎牛血清的DMEM，进行进行饥饿培养一天。细胞于六孔板中随机分为：正常血清组（含10%正常大鼠血清的DMEM培养基）；XAV9391umol/L组（DMEM培养基中含10%正常大鼠血清并加入XAV9391umol/L）；XAV9392umol/L(DMEM培养基中含10%正常大鼠血清并加入XAV9392umol/L）；肝复康治疗组（含10%肝复康治疗组大鼠血清的DMEM培养基）。将六孔板放于孵箱中，温度为37℃，CO2含量为5%,培养两天。逆转录-聚合酶链反应（reverse transcriptase polymerase chain reaction，RT-PCR)法测定细胞中collagen I，collagenIII，a-SMA，FAK，vinculin,RhoA,ROCKI的mRNA的表达;免疫蛋白印迹法（western blot）检测测细胞中ROCK1蛋白的表达。结果：1．肝复康及XAV939药物血清对细胞外基质（ECM）指标的影响肝复康血清组相比正常血清组collagen I，collagenⅢ，a-SMA在基因水平表达均有明显的下降（P<0.05)，XAV9391umol/L,2umol/L组相比于正常血清组collagenI，collagenⅢa-SMA在基因水平均有明显下降（P<0.05)。并且XAV9392umol/L血清组作用效果强于1umol/L组。2．肝复康及XAV939药物血清对细胞骨架改变指标的影响肝复康血清组与正常血清组相比FAK,vinculin的mRNA水平表达均有明显的下降（P<0.05)，XAV9391umol/L,2umol/L组FAK，vinculin的mRNA水平均有明显下降（P<0.05)。并且XAV9392umol/L血清组作用效果强于1umol/L组。3.肝复康及XAV939药物血清对RhoA/ROCK信号通路的影响3.1RT-PCR结果显示XAV939血清组RhoA/ROCK信号通路的RhoA，ROCK1mRNA的表达相比于正常血清组均未出现显着变化，肝复康药物血清组RhoAmRNA的表达显着下调（P<0.05)。3.2Western-blot结果显示XAV939血清组RhoA/ROCK信号通路的ROCK1蛋白的表达相对于正常血清组均未出现显着变化，肝复康药物血清组中的ROCK1蛋白的表达显着下调（P<0.05)。这与RT-PCR结果一致。结论：1.肝复康和XAV939对活化的星状细胞均有明显抑制作用。2.肝复康对非经典Wnt RhoA/ROCK信号通路有抑制作用。3.XAV939对非经典Wnt RhoA/ROCK信号通路作用不明显。(本文来源于《大连医科大学》期刊2014-05-01）
税晓莉[8]（2014）在《SB216763和肝复康干预下的肝星状细胞中Wnt/β-catenin与Wnt/Ca~(2+)信号通路之间的相关研究》一文中研究指出目的：肝纤维化是多种慢性肝脏病变最终进展到肝硬化的一个重要中间过程，以肝星状细胞(hepatic stellate cell，HSC)的活化和细胞外基质（extracel lular matrix,ECM）的大量沉积为主要特征。研究证实，Wnt信号通路在肝纤维化的过程当中起到了重要的作用，其中以Wnt/β-catenin研究的最多。中药肝复康是我校病理生理教研室经多年实验总结出的抗肝纤维化的经验方，已证实对Wnt/β-catenin通路和非经典的Wnt/Ca2+信号通路均有抑制作用。目前，在对肿瘤一些的研究中发现，Wnt/Ca2+信号通路能够对Wnt/β-catenin通路起到抑制的作用，即说明了这两条通路在有些肿瘤中并不是单一的产生作用，而两条通路之间也是可能存在某种相互关系，能够相互影响，但在对肝纤维化的研究中则主要研究的是每条通路与肝纤维化的发生发展可能存在的某些机制，但对这两条通路之间的相互关系却还不十分明确。SB216763是GSK-3β的抑制剂，使胞浆中β-catenin大量累积并入核，从而激活Wnt/β-catenin通路。本实验通过使用中药肝复康药物血清和SB216763干预培养的HSC，然后分析在肝纤维化发生发展过程中Wnt/β-catenin通路与Wnt/Ca2+信号通路之间的相互关系。方法：用含10%胎牛血清的DMEM培养基在5%CO2混合气体、37℃的孵箱中培养，传代大鼠HSC-T6细胞株。待细胞条件成熟后，再用不含血清的DMEM培养基饥饿培养24h后分组加药。在六孔板中将细胞随机的分为以下五组：正常血清组（含10%正常大鼠血清的DMEM培养基）；SB21676320μM组(含10%正常大鼠血清，SB2167632umol/L的DMEM培养基）；SB21676310μM组（含10%正常大鼠血清，SB2167631umol/L的DMEM培养基）：肝复康治疗组（含10%肝复康治疗组大鼠血清的DMEM培养基）；SB21676320μM加肝复康治疗组（SB21676320μM基础上用10％肝复康药物血清干预），用孵箱在37℃，5%CO2混合气体的环境中培养48h。逆转录-聚合酶链反应（reverse transcriptase polymerase chain reaction，RT-PCR)法检测HSC细胞中collagen I，collagen Ⅲ，a-SMA的表达和Wnt/Ca2+信号通路中的相关指标Wnt5a， Frizzled2，CAMKII， MPP-7mRNA相对表达量,免疫蛋白印迹法（western blot）检测细胞中MPP-7的蛋白表达量。实验结果均采用SPSS13.0统计软件分析。结果：1、SB216763与肝复康对大鼠HSC-T6细胞活性及a-SMA、I型、III型胶原的影响1.1RT-PCR检测SB216763对大鼠HSC-T6细胞活性及a-SMA、I型、III型胶原的影响SB21676310μM与SB21676320μM组HSC明显活化, I型胶原、 Ⅲ型胶原、a-SMA表达量与正常血清组相比显着增加，其中又以SB21676320μM组增多的更为明显，说明使用SB216763后HSC-T6细胞株有明显的纤维化倾向。1.2RT-PCR检测肝复康对HSC-T6中I型胶原、 Ⅲ型胶原、a-SMA表达的影响肝复康药物血清组与SB21676310μM、SB21676320μM组相比，HSC细胞中I型胶原、 Ⅲ型胶原、a-SMA的表达量显着减少，同时SB21676320μM加肝复康血清组与SB21676320μM组相比，叁者的表达量均有所减少，说明肝复康能够有效的抑制I型胶原、 Ⅲ型胶原、a-SMA在HSC-T6细胞株中的表达。2、SB216763和肝复康对HSC-T6细胞株中Wnt/Ca2+信号通路相关指标表达的影响2.1RT-PCR检测Wnt/Ca2+信号通路中Wnt5a的mRNA表达Wnt5a是Wnt/Ca2+信号通路是一种重要的起始蛋白，在正常大鼠肝脏细胞中含量很少，几乎不表达。虽然Wnt与不同的受体结合后，能够激活不同的Wnt通路，包括经典Wnt通路，但在本实验中，Wnt经典通路激活后，通过RT-PCR显示，各组Wnt5a的mRNA相对表达量与对照组相比无明显差异，无统计学意义。2.2RT-PCR检测Wnt/Ca2+信号通路中Frizzed2的mRNA表达Frizzed2是Wnt信号通路的中一种跨膜受体蛋白， Wnt5a与其结合后激活Wnt/Ca2+信号通路，在正常大鼠肝脏细胞中表达很少，几乎不表达。通路RT-PCR测其在SB21676320μM、10μM、肝复康药物血清治疗组、肝复康加SB216763的mRNA相对表达量与正常血清对照组相比无明显变化。2.3RT-PCR检测Wnt/Ca2+信号通路中CAMKII的mRNA表达CAMKII是Wnt/Ca2+信号途径下游一种关键的蛋白激酶，在正常大鼠肝脏细胞表达微量，几乎不表达。通过RT-PCR检测CAMKII在各组的mRNA相对表达量，发现与正常血清对照组相比没有表达差异，无统计差异性，说明在使用SB216763后，Wnt/Ca2+信号途径可能没有受到Wnt/β-Catenin信号通路的影响而发生相应的改变。2.4RT-PCR检测Wnt/Ca2+信号通路MMP-7的mRNA表达MMP-7在正常大鼠肝脏细胞中表达很少，几乎不表达。在RT-PCR检测结果中，虽然与正常血清对照组相比，SB21676320μM组中的mRAN表达相对量增加，但是差异没有有显着性。在其它叁组SB21676310μM、肝复康药物血清组及肝复康加SB21676320μM中的mRNA相对表达量均无明显变化。3Western-blot检测实验结果MPP-7在正常肝脏组织细胞很少表达，几乎不表达。与正常血清组相比SB21676320μM增多较为明显，10μM及肝复康、肝复康加SB216763组表达则无明显差别，且表达均不明显，与RT-PCR的实验结果一致，这可能与其复杂的表达调控有关。结论：1、Wnt/β-catenin信号通路激活后，可上调大鼠HSC-T6细胞活性；肝复康对活化的大鼠HSC-T6细胞有一定的抑制作用。2、Wnt/β-catenin信号通路激活后，Wnt/Ca2+信号通路可能不受相关影响。(本文来源于《大连医科大学》期刊2014-05-01）
李骢,姜妙娜,张彩华,贾玉杰,周情[9]（2013）在《中药肝复康对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝组织PI3K/PKB信号通路和PDGFR-β表达的影响》一文中研究指出目的探讨中药肝复康对大鼠肝纤维化组织PI3K/PKB信号通路和血小板衍生生长因子受体-β(PDGFR-β)表达的影响。方法制备大鼠四氯化碳诱导的肝纤维化模型,给予肝复康干预。采用免疫组织化学法检测肝组织PDGFR-β蛋白的表达,采用半定量RT-PCR法测定肝组织PI3K和PKB1mRNA水平的变化。结果与对照组比,模型组肝组织PDGFR-β蛋白的表达上调,而肝复康治疗组其表达被显着抑制;模型组肝组织PI3K和PKB1 mRNA水平的相对光密度值分别为2.08±0.09和2.54±0.10,较对照组均显着上升(0.86±0.04和0.36±0.03,P<0.01),但肝复康治疗组其水平均被显着抑制(分别为0.88±0.05和0.41±0.03,与模型组比,P<0.01)。结论肝复康对肝纤维化的治疗作用可能与其作用于PI3K/PKB信号转导途径和抑制PDGFR-β表达有关。(本文来源于《实用肝脏病杂志》期刊2013年04期）
李娜[10]（2013）在《Wnt经典信号通路在肝星状细胞中的作用及肝复康的干预机制》一文中研究指出目的：肝纤维化的形成是机体对肝损伤的一种修复过程，其特征性改变是细胞外基质(extracellular matrix，ECM)在肝脏中过度沉积。肝纤维化的形成基础是肝星状细胞(hepatic stellate cell，HSC)的活化，活化的HSC细胞合成大量的ECM、平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA)等。越来越多的研究发现Wnt信号通路与肝纤维化的发生有着密切联系，尤其是Wnt经典信号通路，也称为Wnt/β-catenin信号通路。β-catenin（β-连环蛋白)是一种多功能的胞浆蛋白，也能介导Wnt信号传导，是Wnt经典信号通路的关键因子。糖原合成酶激酶(GSK-3β)在Wnt经典信号通路中可使β-catenin磷酸化并参与其随后的降解过程，从而保持经典Wnt通路的静止状态。而SB216763是GSK-3β的抑制剂，使胞浆中β-catenin大量累积并入核，从而激活Wnt经典信号通路。本实验应用GSK-3β抑制剂抑制其在体外培养的大鼠HSC细胞中的活性，通过测定β-catenin的水平以及Wnt靶基因mRNA的表达预探讨经典Wnt信号通路在大鼠HSC细胞中的作用机制。近年来中药复方制剂治疗肝纤维化的研究取得了很大进展，肝复康是本实验室经过多年实验总结的中药复方制剂。本实验通过培养肝星状细胞并使用SB216763及中药肝复康药物血清干预，预探讨肝复康通过Wnt经典信号通路抗肝纤维化的机制。方法：1.细胞培养：大鼠HSC-T6细胞株用含10%胎牛血清和DMEM培养基，于37℃，5%CO2混合气体的孵箱中培养，细胞达到良好状态后，所有细胞用无血清的DMEM培养基饥饿24小时后分组加药。细胞随机分五组加药，SB216763工作浓度依次为5,10,20,30,40umol/L(uM)，培养12小时后用比色微量滴定唑法(Microtitre tetrazolium，MTT)检测加药后细胞增殖情况，分析数据并选定SB216763最佳工作浓度为10uM、20uM。将细胞随机分为以下五组：对照组(DMEM中加10％正常血清)；SB21676310uM组；SB21676320uM组；肝复康组(10％肝复康药物血清)；SB21676320uM加肝复康组(SB21676320uM基础上用10％肝复康药物血清干预)。2.MTT:检测加药后大鼠HSC细胞增殖情况。3.Quant Reverse Transcriptase(RT)-polymerase chain reaction(PCR):检测大鼠HSC细胞中GSK-3β，β-catenin，CollagenI、Ⅲ，α-SMA，Wnt1， Wnt3a， Wnt10b mRNA的表达。4.免疫蛋白印迹(Western-blot):检测大鼠HSC细胞中β-catenin蛋白的表达。5.实验结果均采用SPSS13.0统计软件分析。结果：1.MTT实验结果SB21676310uM组与SB21676320uM组肝星状细胞均较对照组增殖明显，肝复康药物血清组较对照组增殖明显受到抑制，差异有统计学意义(P<0.05)；同时，肝复康药物血清加SB21676320uM组细胞增殖程度于SB216763组相比显着下降，差异有统计学意义(P<0.05)。2.RT-RCR实验结果SB21676310uM与SB21676320uM组肝星状细胞明显活化，CollagenI、a-SMA、β-catenin、Wnt1、Wnt3a、 Frizzled1、Frizzled2mRNA表达量明显增加，而肝复康药物血清组HSC细胞的表达量则明显下降，较对照组差异有统计学意义(P<0.05)。同时SB216763(20uM)加肝复康药物血清组与SB21676320uM组比较也能较好的抑制以上各指标的表达。SB21676320uM组Gsk-3β mRNA表达明显下降,与对照组差别具有统计学意义(P<0.05)。3.Western-blot检测实验结果对照组大鼠肝星状细胞中β-catenin低表达，SB21676310uM组和20uM组相对于对照组细胞β-catenin表达量明显增加，而肝复康药物血清组相对于对照组其表达量则明显下降(P<0.05)；SB21676320(uM)加肝复康药物血清组相对于SB21676320uM组β-catenin表达量同样下降，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：1.抑制GSK-3β的活性，可激活大鼠HSC-T6细胞中的Wnt经典信号通路,上调大鼠HSC-T6细胞活性。2.中药肝复康可阻断Wnt经典信号通路激活，抑制大鼠肝星状细胞活化，为治疗肝纤维化提供理论依据。(本文来源于《大连医科大学》期刊2013-05-01）
肝复康论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
急性肝炎失治或误治，转为慢性肝炎，缠绵难愈，严重危害人类健康，近叁年来，笔者和同事们应用自拟“肝复康汤”治疗慢性肝炎，获得较好疗效，现介绍于下：陈某，女，52岁，农民，1990年2月25日初诊。患者2个月前因肝功能异常，肝脾肿大，下肢浮肿被诊断
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肝复康论文参考文献
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