猪源DDX56对口蹄疫病毒的复制及其对病毒诱导的RLR通路调节的研究

猪源DDX56对口蹄疫病毒的复制及其对病毒诱导的RLR通路调节的研究

论文摘要

DEAD框解旋酶56(DDX56)是一种RNA解旋酶,能参与RNA代谢和核糖体的合成。为研究猪源DDX56对口蹄疫病毒(FMDV)复制和对病毒诱导的RLR通路的影响,首先通过免疫共沉淀试验筛选与猪源DDX56互作的FMDV蛋白;接着利用Q-PCR和Western blot检测过表达猪源DDX56对FMDV在PK-15细胞中复制的影响;然后利用双荧光素酶报告基因和Q-PCR检测猪源DDX56对病毒诱导的RLR通路的影响。结果显示,猪源DDX56能与FMDV蛋白VP0、VP1、VP2和3A发生相互作用;过表达猪源DDX56能够促进FMDV的复制;过表达猪源DDX56能抑制仙台病毒(SeV)诱导的RLR通路的激活;猪源DDX56可以协同FMDV蛋白VP0、VP1、VP2和3A抑制病毒诱导的Ⅰ型干扰素的产生。总之,猪源DDX56能与FMDV蛋白VP0、VP1、VP2和3A互作而协同抑制Ⅰ型干扰素的产生,从而促进FMDV的复制。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 免疫共沉淀与Western blot
  •   1.3 双荧光素酶报告试验
  •   1.4 RT-PCR
  •     1.4.1 绝对定量PCR(探针法)
  •     1.4.2 相对定量PCR(SYBR?Green法)
  •   1.5 数据分析
  • 2 结 果
  •   2.1 猪源DDX56与FMDV蛋白VP0、VP1、VP2和3A的相互作用
  •   2.2 猪源DDX56促进FMDV的复制
  •   2.3 猪源DDX56负调控SeV诱导的IFN-β的表达
  •   2.4 共表达猪源DDX56和FMDV蛋白对SeV诱导的IFN-β启动子和ISRE激活的影响
  • 3 讨 论
  • 4 结 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 付绍祖,李露露,张敬,李丹,郑海学

    关键词: 口蹄疫病毒,天然免疫,猪源框解旋酶,干扰素,复制

    来源: 畜牧兽医学报 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室OIE/国家口蹄疫参考实验室

    基金: 国家自然科学基金重点项目(31672585),甘肃省科技厅基金项目(17JR5RA323)

    分类号: S852.65

    页码: 1849-1856

    总页数: 8

    文件大小: 1341K

    下载量: 148

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