导读:本文包含了鸡痘重组疫苗论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:基因组,蛋白质组,鸡痘病毒,载体
鸡痘重组疫苗论文文献综述
刘存霞[1]（2013）在《鸡痘病毒282E4株基因组和蛋白质组解析、载体构建与HIV重组疫苗研究》一文中研究指出鸡痘病毒(Fowlpox virus, FPV)是脊椎动物痘病毒科、禽痘病毒属的代表成员,该病毒仅感染禽类,可引起禽类动物的疾病。因禽痘病毒通常不感染人与其他哺乳动物,且能有效表达大量的外源DNA,并可在感染细胞的胞浆中复制等特点而成为活病毒载体研究的热点。然而,目前对FPV的基因组、结构、毒力、致病机制、宿主范围及其免疫逃逸等方面尚无系统深入的研究。为设计出更加安全、有效的FPV表达载体系统,本研究以FPV282E4株为研究对象,开展其基因组背景分析、蛋白质组成、新型表达载体构建及重组鸡痘病毒载体疫苗筛选和实验免疫研究。本研究首先采用高通量Illumina测序技术对中国弱毒疫苗株FPV282E4株进行全基因组测序,通过对测序数据组装后利用基因预测软件进行基因de novo预测及功能注释。结果测定FPV282E4全基因组为308829bp,GC含量约为28%,预测出313个编码序列(Coding sequence, CDS),并与FPVUS株、CNPV ATCC株进行核酸平等共线性分析,通过功能注释表明FPV282E4的基因具有核营酸代谢、运输、转录、复制、重组、修复及翻译后修饰、伴侣蛋白和信号转导功能。在此基础上,采用LC-ESI-MS/MS对鸡痘病毒282E4株进行蛋白质全谱分析,鉴定出76个蛋白,对其进行功能注释,结果与基因组序列相互印证,从而为重组鸡痘病毒载体构建及感染与致病机制研究奠定理论基础。基于FPV282E4全基因组序列测定数据,针对本实验室前期在鸡痘病毒载体构建中遇到的重组效率较低、筛选周期长等问题,本研究优化FPV282E4株5个非必需CDS区作为候选同源重组臂,通过插入含有PE/L早／晚期启动子和终止信号的叁基因表达盒,进行重组鸡痘病毒载体的构建,分别以红、绿、蓝叁种荧光蛋白基因作为报告基因,进行病毒重组及外源基因表达活性的验证。荧光蛋白表达检测结果表明,叁个表达盒均可独立表达外源基因；通过对rFPV进行形态学、生物特性检测,结果成功构建出3个rFPV,且基因缺失未影响重组鸡痘病毒的形态及其复制,3株重组鸡痘病毒无差异。在成功获得表达载体的基础上,以本实验室前期构建的包含HIV-1复合多表位(MEGNp24)、CpG基序和CTB基因(CCMp24)的免疫原为基础,构建表达HIV-1复合多表位的rFPV-CCMP24,通过荧光噬斑筛选纯化rFPV-CCMP24。采用PCR、RT-PCR、Western Blot方法进行重组病毒及外源基因表达的鉴定。成功获得rFPV-CCMp24,重组病毒复制效率及病毒滴度与野生株FPV一致,重组病毒能够在体外表达外源基因且具有反应原性。然后开展了rFPV-CCMp24的小鼠免疫试验,分析其免疫原性,同时结合前期构建的重组痘苗病毒rddVTT-CCMp24进行联合免疫研究,通过检测特异性HIV-1抗体、淋巴细胞刺激指数、淋巴细胞分泌IFNy以及流式细胞术检测CD3+CD4+、CD3+CD8+等指标,综合分析免疫效果,探寻有效的病毒载体为基础的免疫策略。结果显示,rFPV-CCMp24单独免疫及与rddVTT-CCMp24联合免疫,均能诱导细胞免疫及体液免疫。本研究为研制有效鸡痘病毒活载体疫苗及多载体疫苗联合免疫的临床前实验研究奠定了基础。(本文来源于《吉林大学》期刊2013-06-01）
陈素娟[2]（2005）在《用不同鸡痘病毒载体构建单表达或双表达抗H5和H9亚型禽流感的重组疫苗及其免疫效力》一文中研究指出禽流感(AI)和鸡痘是禽类感染疾病中比较严重的两种疾病,给养禽业造成了严重的经济损失。AI是由A型流感病毒(AIV)引起的一种禽类疾病,分为高致病性禽流感(HPAI)和低致病性禽流感(MPAI),近年来在我国部分地区广泛流行,对我国的养禽业危害严重。当前我国对禽流感的控制主要依赖常规疫苗的免疫接种,但常规疫苗的使用存在一些难以克服的缺陷,如影响疫情监测、生产成本高等。因此,我们构建了单表达H5N1亚型AIV血凝素(HA)基因的重组病毒、双表达H5N1亚型AIV的HA和神经氨酸酶(NA)基因的重组病毒及双表达H5N1和H9N2亚型AIV的血凝素基因(HA)的重组病毒。鸡痘病毒(FPV)基因组庞大,有严格的宿主范围,许多学者利用FPV不同的非必需区构建载体表达外源基因,在SPF鸡上都能得到较好的实验结果,但在很多种情况下在有母源抗体的商品鸡上实验效果不佳。为比较从两种不同非必需区的FPV载体得到的重组病毒在抵抗母源抗体干扰能力方面的差异,同时比较从不同毒力的鸡痘疫苗为亲本病毒得到的重组病毒在抵抗母源抗体干扰能力方面的差异,本研究分别利用含不同非必需区的两种FPV载体p11S和p12LS(复制非必需区分别为FPV7S和FPV1-2)以及282E4和大空斑两种亲本FPV构建重组病毒,在SPF鸡和商品鸡进行免疫保护试验,旨在筛选出在母源抗体阳性商品鸡群仍能提供有效保护的重组鸡痘病毒H5和H9亚型禽流感疫苗。 1.表达H5亚型AIV HA基因的重组FPV的获得及其遗传稳定性 以质粒pTH5A为模板,用PCR扩增出约为1.7kb的H5A基因。将其插入载体p11S和p12LS,获得转移载体p11SH5A和p12LSH5A。用GeneJammer~(TM)转染试剂将转移载体分别与wt-FPV_(LP)或wt-FPV_(282E4)共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),蓝斑筛选纯化得3个重组病毒rFPV_(Ly)-11 SH5A、rFPV_(Lp)-12LSH5A和rFPV_(282E4)-12LSH5A。以间接免疫荧光(IFA)证实,重组病毒能正确表达H5A蛋白。rFPVs在CEF上连续传10代,经蓝斑检测和PCR检测,表明所得的rFPVs均具有良好的遗传稳定性。(本文来源于《扬州大学》期刊2005-05-30）
王云峰,王玫,智海东,张绍杰,仇华吉[3]（2002）在《鸡传染性喉气管炎鸡痘重组疫苗免疫持续期研究》一文中研究指出将160只SPF试验鸡随机分为2个组。第一组80只,在60日龄时免疫鸡传染性喉气管炎重组鸡痘疫苗200003批,免疫剂量为105PFU;第二组80只鸡.作为试验对照。免疫后的7、14、21、30、60、90、120、150、180和225天分别采血,分离血清.采用ELISA方法检测血清抗FPV抗体.结果表明重组疫苗免疫后14天.免疫鸡血清抗体已经全部阳转.免疫后的21天血清抗FPV的抗体出现峰值.此后便开始下降.到免疫后的6个月抗体水平已经接近阴性对照的水平。用ILTV WG株和FPV 102株强毒进行的攻毒保护试验与血清检测的结果基本一致,在免疫后的5个月内可以使免疫鸡获得100%保护.免疫后的6个月对ILT和FP的免疫保护分别为1/7和2/10.此时需要对鸡群实施二次免疫。(本文来源于《中国畜牧兽医学会禽病学分会第十一次学术研讨会论文集》期刊2002-10-01）
史同瑞[4]（1998）在《禽痘重组疫苗防制禽流感效果好》一文中研究指出禽流感是严重危害养禽业的传染病,各国科学家对其免疫防制进行了大量研究。David等用插入H_5亚型禽流感病毒血凝素基因的禽痘重组疫苗免疫1日龄雏鸡,用未插入H_5亚型病毒基因的禽痘疫苗作对照,免疫后21天用高致病力的H_5N_2禽流感病毒墨西哥分离株攻击。结果,从3周龄到20周龄试验,接种禽痘重组疫苗鸡保护率在90％以上。接种禽痘重组疫苗与接种对照疫苗鸡相比,肠道排出攻毒毒株的鸡数明显减少(50—75％),从呼吸道、肠道排出的攻毒毒株数量也明显减少(本文来源于《畜牧兽医科技信息》期刊1998年07期）
鸡痘重组疫苗论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
禽流感(AI)和鸡痘是禽类感染疾病中比较严重的两种疾病,给养禽业造成了严重的经济损失。AI是由A型流感病毒(AIV)引起的一种禽类疾病,分为高致病性禽流感(HPAI)和低致病性禽流感(MPAI),近年来在我国部分地区广泛流行,对我国的养禽业危害严重。当前我国对禽流感的控制主要依赖常规疫苗的免疫接种,但常规疫苗的使用存在一些难以克服的缺陷,如影响疫情监测、生产成本高等。因此,我们构建了单表达H5N1亚型AIV血凝素(HA)基因的重组病毒、双表达H5N1亚型AIV的HA和神经氨酸酶(NA)基因的重组病毒及双表达H5N1和H9N2亚型AIV的血凝素基因(HA)的重组病毒。鸡痘病毒(FPV)基因组庞大,有严格的宿主范围,许多学者利用FPV不同的非必需区构建载体表达外源基因,在SPF鸡上都能得到较好的实验结果,但在很多种情况下在有母源抗体的商品鸡上实验效果不佳。为比较从两种不同非必需区的FPV载体得到的重组病毒在抵抗母源抗体干扰能力方面的差异,同时比较从不同毒力的鸡痘疫苗为亲本病毒得到的重组病毒在抵抗母源抗体干扰能力方面的差异,本研究分别利用含不同非必需区的两种FPV载体p11S和p12LS(复制非必需区分别为FPV7S和FPV1-2)以及282E4和大空斑两种亲本FPV构建重组病毒,在SPF鸡和商品鸡进行免疫保护试验,旨在筛选出在母源抗体阳性商品鸡群仍能提供有效保护的重组鸡痘病毒H5和H9亚型禽流感疫苗。 1.表达H5亚型AIV HA基因的重组FPV的获得及其遗传稳定性 以质粒pTH5A为模板,用PCR扩增出约为1.7kb的H5A基因。将其插入载体p11S和p12LS,获得转移载体p11SH5A和p12LSH5A。用GeneJammer~(TM)转染试剂将转移载体分别与wt-FPV_(LP)或wt-FPV_(282E4)共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),蓝斑筛选纯化得3个重组病毒rFPV_(Ly)-11 SH5A、rFPV_(Lp)-12LSH5A和rFPV_(282E4)-12LSH5A。以间接免疫荧光(IFA)证实,重组病毒能正确表达H5A蛋白。rFPVs在CEF上连续传10代,经蓝斑检测和PCR检测,表明所得的rFPVs均具有良好的遗传稳定性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
鸡痘重组疫苗论文参考文献
[1].刘存霞.鸡痘病毒282E4株基因组和蛋白质组解析、载体构建与HIV重组疫苗研究[D].吉林大学.2013
[2].陈素娟.用不同鸡痘病毒载体构建单表达或双表达抗H5和H9亚型禽流感的重组疫苗及其免疫效力[D].扬州大学.2005
[3].王云峰,王玫,智海东,张绍杰,仇华吉.鸡传染性喉气管炎鸡痘重组疫苗免疫持续期研究[C].中国畜牧兽医学会禽病学分会第十一次学术研讨会论文集.2002
[4].史同瑞.禽痘重组疫苗防制禽流感效果好[J].畜牧兽医科技信息.1998