论文摘要
细胞是构成器官形态的基本单位,植物器官的形成需要经过细胞增殖、组织分化等过程。拟南芥花瓣具有调节授粉和光反射等功能,在生殖器官中扮演着重要的角色,然而相对根、下胚轴和子叶来说,花瓣形态建成的机制研究极为少见。拟南芥ANGUSTIFOLIA（AN）是与哺乳动物中C-末端结合蛋白/蛋白转运抑制剂A-ADP核糖基化底物（CtBP/BARs）同源的蛋白,同时AN的工作机制目前尚不清晰。拟南芥中AN的突变体an-2,具有子叶变厚、变窄,毛状体分枝减少,根螺旋生长等性状。但至今,对于AN怎么去调控花瓣的形态建成尚不清楚。本研究利用甲基磺酸乙酯（EMS）对的种子进行诱变,筛选获得突变体ocean1/an-2（OCEAN1,Organ Control Enhancer of an-2）,并分离得到单突变体ocean1。相对野生型Col-0,ocean1子叶变窄且有卷曲,花瓣变得狭长。ocean1/an-2进一步增强了an-2的表型,子叶和花瓣都变得更加窄长、肥厚。细胞水平上,Col-0和ocean1子叶表皮铺板细胞之间具有明显的锯齿嵌合结构,an-2子叶表皮铺板细胞边缘锯齿状明显减少。相对单突变体ocean1和an-2,ocean1/an-2铺板细胞的锯齿结构消失,在花瓣中,ocean1/an-2底座细胞显得狭长,面积明显增大,锥形细胞顶端也变得更为膨大。Col-0和突变体ocean1锥形细胞中的微管呈螺旋状有序排列,而an-2和ocean1/an-2的微管排列变得紊乱。本研究发现,AN很有可能是通过影响微管的排列进而影响细胞的形态建成,最终调控器官的发育过程,OCEAN1作为an-2的增强子,与AN共同参与了拟南芥叶片和花器官的形态发育过程。
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摘要ABSTRACT一 前言 1.1 植物花器官发育的相关研究 1.1.1 拟南芥花瓣 1.1.2 拟南芥花瓣锥形细胞 1.2 ANGUATIFOLIA的研究进展 1.3 图位克隆技术（Map-based Cloning）研究进展及原理步骤 1.3.1 图位克隆技术研究进展 1.3.2 图位克隆技术原理和基本步骤 1.4 本课题的研究内容和拟解决的关键问题 1.4.1 研究内容 1.4.2 拟解决的关键问题二 实验材料与方法 2.1 实验材料 2.1.1 实验植株 2.1.2 实验所用菌株 2.1.3 实验所用质粒 2.2 主要仪器设备 2.3 实验方法 2.3.1 EMS诱变 2.3.2 种子消毒及春化处理 2.3.3 培养基配制及抗生素浓度 2.3.4 拟南芥基因组DNA的粗提取 2.3.5 拟南芥总RNA的提取 2.3.6 拟南芥mRNA的反转录 2.3.7 感受态细胞的制备 2.3.8 构建载体及植物转化三 实验结果与分析 3.1 ANGUSTIFOLIA突变体增强子的筛选 3.2 突变体表型观察 3.2.1 OCEAN1和AN共同调节拟南芥子叶形态 3.2.2 OCEAN1和AN共同调节拟南芥子叶表皮铺板细胞形态 3.2.3 OCEAN1和AN共同调节拟南芥生长 3.2.4 OCEAN1和AN共同调节拟南芥花瓣的各向异性生长 3.2.5 OCEAN1和AN共同调节拟南芥花瓣表皮细胞形态 3.2.6 OCEAN1和AN共同调节拟南芥花瓣皮质微管（CMT）排列 3.3 突变体OCEAN1 基因的定位 3.3.1 图位克隆群体的建立和OCEAN1 突变基因的遗传因子鉴定 3.3.2 OCEAN1 突变基因的初步定位 3.3.3 OCEAN1 突变基因的精细定位 3.4候选基因的遗传互补实验四 讨论 4.1 OCEAN1和AN在调控植物生长发育中的功能 4.1.1 OCEAN1和AN在叶片和营养器官中的功能 4.1.2 OCEAN1和AN在花瓣发育中的功能 4.2 OCEAN1 基因的遗传分析参考文献附录 A 1.1 ERECTA的研究进展 1.2 实验材料与方法 1.2.1 实验材料 1.2.2 实验方法 1.3 结果与分析 1.3.1 ERECTA/ERL1/ERL2 突变体的鉴定 1.3.2 ERECTA/ERL1/ERL2 突变体子叶表型的观察 1.3.3 ERECTA/ERL1/ERL2 突变体花器官表型的观察 1.3.4 ERECTA/ERL1/ERL2 突变体中差异表达基因的RNA-seq分析 1.3.5 表达载体构建 1.4 讨论附录 B致谢
文章来源
类型: 硕士论文
作者: 刘孟红
导师: 林德书
关键词: 拟南芥,器官发育,增强子
来源: 福建农林大学
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学,生物学
单位: 福建农林大学
分类号: Q943.2
总页数: 78
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标签：拟南芥论文; 器官发育论文; 增强子论文;
