导读:本文包含了酶活测定论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:菌株,大蓟,刺梨,鉴定,芽孢,激酶,木质素。
酶活测定论文文献综述
高翔,王昱茜,邢小勇,魏彦明,包世俊[1](2019)在《牛支原体武威分离株eno基因的克隆、表达及酶活测定》一文中研究指出牛支原体(Mycoplasma bovis, Mb)是引起肉牛(Bos taurus)和奶牛疾病的重要病原之一,给养牛业造成了重大的经济损失。烯醇化酶(enolase, eno)为糖酵解途径的关键限速酶,主要催化2-磷酸甘油酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸。为研究Mb eno酶促活性及其动力学参数,本研究参照GenBank中Mb PG45株eno基因(NC_014760.1)序列设计特异性引物,应用PCR扩增获得Mb武威分离株的eno基因。在序列分析及基因优化的基础上,构建其原核表达载体p ET-eno并转化大肠杆菌(Escherichia coli)表达菌Transetta(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)诱导表达,在十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl dulfate polyacrylamide gel electropheresis, SDS-PAGE)分析的基础上,纯化表达产物对其酶促活性进行分析。结果表明,优化后的Mb武威株eno基因在大肠杆菌中成功获得表达,重组蛋白His-eno大小约为53 kD,且主要以可溶性蛋白形式存在;酶活分析结果显示:纯化产物His-eno的催化活性略高于兔肌肉烯醇化酶,且其最适温度为42℃,最适pH为8.0。双倒数作图所得Hiseno米氏常数(K_m)和最大反应速率(V_(max))分别为4.1×10~(-3)mol/L和3.4μmol/(L·min)。本研究结果为进一步研究Mb eno的生物学功能提供基础资料。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年05期)
李雪艳,张涛,杨红梅,楚敏,高雁[2](2018)在《棉花黄萎病拮抗细菌胞外酶检测及其酶活测定》一文中研究指出【目的】研究Bacillus vanillea SMT-24、Bacillus velezensis BHZ-29、Bacillus subtilis SHT-15、Bacillus atrophaeus SHZ-24菌株产真菌细胞壁降解酶能力,为4株拮抗菌的机理研究及开发利用提供依据。【方法】通过平板透明圈法初步测定4株拮抗菌产胶体几丁质酶、蛋白酶、葡聚糖酶、纤维素酶种类;采用DNS法定量几丁质酶活、纤维素酶活、葡聚糖酶活,采用福林-酚法定量蛋白酶活。【结果】平板透明圈法显示:SMT-24菌株产蛋白酶、葡聚糖酶、纤维素酶,BHZ-29菌株产蛋白酶、纤维素酶、葡聚糖酶,SHT-15菌株产蛋白酶、葡聚糖酶、纤维素酶,SHZ-24菌株产几丁质酶、蛋白酶、葡聚糖酶; DNS法、福林酚法定量结果显示:在发酵期间酶活总体呈现先增加后减小的趋势,与细菌生长对数期增长趋势相同(酶活低于3. 00 IU除外); 4株拮抗菌酶活比较中,SHZ-24菌株产几丁质酶活最高,酶活最高为(12. 37±0. 15) IU; SHZ-24菌株产蛋白酶活最高,最高值达(24. 22±0. 45) IU,SMT-24、SHT-15菌株产葡聚糖酶活较高,最高酶活分别(12. 29±0. 23) IU、(12. 07±0. 59) IU,SMT-24菌株产纤维素酶活最高,酶活最高达(6. 43±0. 24) IU。【结论】4株拮抗菌均产几丁质酶、葡聚糖酶、纤维素酶、蛋白酶,酶活随发酵时间呈现先增大后减小的趋势,在细菌对数期,酶活与细菌数量呈正相关关系(酶活低于3. 00 IU除外)。(本文来源于《新疆农业科学》期刊2018年09期)
苏美凤,孙靖雨,胡坚,吴迪,庙浩[3](2017)在《普通大蓟马不同地理种群的分子鉴定及酶活测定》一文中研究指出普通大蓟马Megalurothrips usitatus(Bagnall)是影响海南豇豆品质的重要害虫之一。笔者在采集不同地理种群的基础上,用试剂盒法提取其总DNA,对mt DNA COⅠ基因序列进行测序分析,并构建系统发育树;用分光光度计法进行酶活比较分析。结果表明,普通大蓟马不同地理种群之间的遗传距离非常小,并没有随地理位置的变化产生较大的遗传分化;抗氧化酶系活力测定中,不同地理种群的普通大蓟马GST活力差异较大,SOD活力不存在显着性差异,个别地理种群CAT活力与其他地理种群存在显着性差异。(本文来源于《热带生物学报》期刊2017年03期)
白旭明[4](2017)在《艾比湖湿地土壤纤维素降解菌筛选及酶活测定》一文中研究指出筛选了采自新疆艾比湖湿地的土壤中的纤维素降解菌,并测定了其中具有较高降解效率的8株菌的纤维素酶活。结果表明:经过初筛分离纯化后,共得到纤维素降解菌74株菌,属26个种,筛到的厚壁菌门Firmicutes芽孢杆菌属Bacillus细菌最多,有14个种,菌株13C12(Bacillus aquimaris)的纤维素酶活最高,滤纸酶(FPase)活为21.4U/mL,内切葡聚糖酶酶活达37.4U/mL,外切葡聚糖酶(Avicelase)为19.2U/mL,β-葡萄糖苷酶酶活为24.6U/mL,Bacillus aquimaris可尝试作为工业产酶菌株进行后续试验。(本文来源于《绿色科技》期刊2017年10期)
冀勇良,刘丽英,朱传合[5](2017)在《角蛋白酶酶活测定条件的研究》一文中研究指出以提高羽毛粉做底物测定角蛋白酶酶活方法的准确性,试验研究了酶的制备方式、测定波长、试剂添加顺序、底物粒度大小、反应体系振荡频率、底物浓度、酶促反应温度、时间和pH值等因素对酶活的影响。结果表明:传统测定方法中使用的底物量并不符合酶促反应动力学中底物要饱和的要求,试剂添加顺序和底物粒度对酶活测定结果也有很大影响;羽毛粉测定角蛋白酶活性的最佳方法为:40 W超声波处理30 s的发酵液直接离心制取粗酶液,以45 mg过40目筛的羽毛粉做底物,按缓冲液(pH值8.8)、底物、酶的顺序加入试剂,于45℃水浴中反应,每隔15 min振荡一次,反应1 h后加入2 ml10%的终止剂TCA,于波长280 nm处进行测定。优化后条件下测得的角蛋白酶活性较优化前提高了约2.1倍。(本文来源于《饲料工业》期刊2017年06期)
任安静,吴林飞,李永春,谭振宇,姚泽秀[6](2016)在《基于竹屑降解的腐生真菌筛选、酶活测定与基因表达分析》一文中研究指出为筛选应用于毛竹(Phyllostachys edulis)伐桩微生物促腐的高效降解菌株,采用发酵纯培养方法并结合形态学观察和核糖体转录间隔区(nuclear ribosomal internal transcribed spacer,ITS)序列分析,发掘鉴定了3株能引起较高竹屑质量损失率的腐生真菌;并通过降解真实底物和Real-time PCR方法,测定了其降解竹屑过程中纤维素和木质素酶活性及其对应的功能基因表达变化。结果表明,3株真菌分别为绿木霉(Trichoderma virens)、棘孢木霉(Trichoderma asperellum)和总状毛霉(Mucor racemosus),降解竹屑20 d引起质量损失率分别为20.56%、17.66%和13.11%。上述菌株分泌的漆酶(laccase,Lac)活性与竹屑质量损失率呈显着正相关,分泌的内切葡聚糖酶(endoglucanase,EG)与外切葡聚糖酶(cellobiohydrolase,CBH)之间存在协同作用,且纤维素酶基因cbhⅠ表达量与对应的CBH酶活性呈显着正相关。酶活性测定和功能基因表达变化表明,3株真菌降解竹屑的能力从高到低依次为绿木霉,棘孢木霉和总状毛霉,漆酶在竹屑降解过程中发挥了重要作用。本实验从竹林土壤中筛选获得高效降解菌株并测定了其对竹屑的降解率,为应用于毛竹伐桩的微生物促腐以及竹纤维材料的生物降解提供了依据。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2016年11期)
付安妮,高明波,冯杰[7](2016)在《刺梨中SOD的提取和酶活测定》一文中研究指出刺梨原产于我国西南地区,以贵州省为主,是目前发现超氧化物歧化酶(SOD)含量最高的水果[1]。本实验采用邻苯叁酚自氧化法,分别测定刺梨鲜果、糖渍刺梨、刺梨干冲泡的饮品和刺梨酒中的SOD酶活。实验结果表明,刺梨鲜果和糖渍刺梨的SOD酶活分别为2140 U/g和3716.2 U/g;刺梨干冲泡的饮品、刺梨酒的SOD酶活分别是308.2 U/m L、368.1 U/m L。经比较发现,刺梨果实用糖腌制后SOD活性提高1.7倍左右,而制成饮品后SOD的酶活变化不大。(本文来源于《广州化工》期刊2016年16期)
李胜营,朱欣娜,毛小琴[8](2016)在《建立转酮酶酶活测定方法及应用》一文中研究指出目的转酮酶是非氧化磷酸化戊糖途径中的关键酶。5-磷酸木酮糖是分析测定转酮酶酶活性的底物,然而因该底物难以化学合成,生产成本高,从而导致厂家停止生产,目前市场上无法得到。因此有必要建立起新的转酮酶酶活测定方法。方法(1)将酿酒酵母的木酮糖激酶基因(XKS1)克隆于pET30a载体。(2)纯化木酮糖激酶。(3)建立酶偶联反应,以木酮糖为底物,将其转化为5-磷酸木酮糖,用于转酮酶酶活的测定。结果 (1)成功地将XKS1基因克隆于pET 30a得到质粒pXZ-X004。(2)质粒pXZ-X004诱导表达产生C端His-tag标签的XK,用Ni柱分离得到纯化的木酮糖激酶(XK)。(3)纯化的XK活性为21.0U/mg protein,当用12.5%的甘油保存于-80℃环境1个月,仍有74%的活性。(4)用纯化的XK建立了转酮酶(TK)酶活测定新方法,当TK酶活低至0.008 75U时仍能够利用新方法检测。结论本实验通过克隆和表达XKS1基因,成功地建立了TK酶活性测定的新方法,并应用于木糖代谢工程菌株TK酶活的测定,为医学和生态学领域中TK酶活的分析奠定了基础。(本文来源于《中国微生态学杂志》期刊2016年07期)
王全,王会,李红亚,李术娜[9](2016)在《一株高效木质素降解菌株LG-1的筛选、鉴定及酶活测定》一文中研究指出试验筛选得到了一株对木质素具有较高降解作用的芽孢杆菌菌株LG-1。利用苯胺蓝平板脱色法从牛粪中初步筛选得到了14株降解菌株,利用管碟法复筛得到了1株对木质素降解活性较高的菌株LG-1,并对这株菌进行了菌落特征、菌体形态的观察及一系列生理生化试验和16S rDNA的序列测定,并对其产酶活性进行了测定。结果表明,菌株LG-1为一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),菌株LG-1在发酵60 h时,木质素过氧化酶达到1 773.3 U/l,锰过氧化酶达到610.8 U/l。对玉米秸秆发酵16 d后木质素降解率达到23.6%。枯草芽孢杆菌菌株LG-1是一株优良的木质素降解菌株。(本文来源于《饲料工业》期刊2016年12期)
王鹏胤,高远,高浩峰,胡南[10](2016)在《M.hydrocarbonoclasticus NY4中N_2OR的酶活测定及环境因素对酶活力的影响》一文中研究指出氧化亚氮(N2O)是一种主要的温室气体,其生物学减量控制已经成为研究热点。在自然环境中,氧化亚氮还原酶(N2OR)是唯一能将N2O还原成N2的酶。以1株能在高盐条件下进行厌氧及好氧反硝化作用的海杆菌Marinobacter hydrocarbonoclasticus NY4为研究对象,建立了一种稳定的N2OR酶活检测方法,考察了p H、盐质量分数以及碳氮比(C/N)等环境因素对N2OR酶活力的影响。结果发现:当p H为7时、盐质量分数为6%~8%、C/N为8时,N2OR呈现出了最高的酶活。本实验结果丰富了对N2OR酶学特征的了解,为N2O生物减量控制提供了部分参考。(本文来源于《生物加工过程》期刊2016年02期)
酶活测定论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
【目的】研究Bacillus vanillea SMT-24、Bacillus velezensis BHZ-29、Bacillus subtilis SHT-15、Bacillus atrophaeus SHZ-24菌株产真菌细胞壁降解酶能力,为4株拮抗菌的机理研究及开发利用提供依据。【方法】通过平板透明圈法初步测定4株拮抗菌产胶体几丁质酶、蛋白酶、葡聚糖酶、纤维素酶种类;采用DNS法定量几丁质酶活、纤维素酶活、葡聚糖酶活,采用福林-酚法定量蛋白酶活。【结果】平板透明圈法显示:SMT-24菌株产蛋白酶、葡聚糖酶、纤维素酶,BHZ-29菌株产蛋白酶、纤维素酶、葡聚糖酶,SHT-15菌株产蛋白酶、葡聚糖酶、纤维素酶,SHZ-24菌株产几丁质酶、蛋白酶、葡聚糖酶; DNS法、福林酚法定量结果显示:在发酵期间酶活总体呈现先增加后减小的趋势,与细菌生长对数期增长趋势相同(酶活低于3. 00 IU除外); 4株拮抗菌酶活比较中,SHZ-24菌株产几丁质酶活最高,酶活最高为(12. 37±0. 15) IU; SHZ-24菌株产蛋白酶活最高,最高值达(24. 22±0. 45) IU,SMT-24、SHT-15菌株产葡聚糖酶活较高,最高酶活分别(12. 29±0. 23) IU、(12. 07±0. 59) IU,SMT-24菌株产纤维素酶活最高,酶活最高达(6. 43±0. 24) IU。【结论】4株拮抗菌均产几丁质酶、葡聚糖酶、纤维素酶、蛋白酶,酶活随发酵时间呈现先增大后减小的趋势,在细菌对数期,酶活与细菌数量呈正相关关系(酶活低于3. 00 IU除外)。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酶活测定论文参考文献
[1].高翔,王昱茜,邢小勇,魏彦明,包世俊.牛支原体武威分离株eno基因的克隆、表达及酶活测定[J].农业生物技术学报.2019
[2].李雪艳,张涛,杨红梅,楚敏,高雁.棉花黄萎病拮抗细菌胞外酶检测及其酶活测定[J].新疆农业科学.2018
[3].苏美凤,孙靖雨,胡坚,吴迪,庙浩.普通大蓟马不同地理种群的分子鉴定及酶活测定[J].热带生物学报.2017
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[5].冀勇良,刘丽英,朱传合.角蛋白酶酶活测定条件的研究[J].饲料工业.2017
[6].任安静,吴林飞,李永春,谭振宇,姚泽秀.基于竹屑降解的腐生真菌筛选、酶活测定与基因表达分析[J].农业生物技术学报.2016
[7].付安妮,高明波,冯杰.刺梨中SOD的提取和酶活测定[J].广州化工.2016
[8].李胜营,朱欣娜,毛小琴.建立转酮酶酶活测定方法及应用[J].中国微生态学杂志.2016
[9].王全,王会,李红亚,李术娜.一株高效木质素降解菌株LG-1的筛选、鉴定及酶活测定[J].饲料工业.2016
[10].王鹏胤,高远,高浩峰,胡南.M.hydrocarbonoclasticusNY4中N_2OR的酶活测定及环境因素对酶活力的影响[J].生物加工过程.2016