导读:本文包含了肾小球内皮细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:内皮,肾小球,细胞,香椿,血管,提取物,通透。
肾小球内皮细胞论文文献综述
仲玉鑫,胡珊,王婷婷,张雨淼,李万忠[1]（2019）在《香椿子正丁醇提取物通过激活Nrf2改善高糖引起的肾小球内皮细胞氧化应激》一文中研究指出目的探讨香椿子正丁醇提取物(n-butyl alcohol extract of toona sinensis,NBAE)对高糖引起的肾小球内皮细胞氧化应激的影响及机制。方法分别以高糖(high glucose, HG)、HG+NBAE刺激人肾小球内皮细胞,采用DCFDA法检测细胞内活性氧(reactive oxygenspecies,ROS)生成情况,Nitrate/Nitrite Colorimetric法检测细胞内NO的含量,Western blot检测Nrf2、NQO1及HO-1的蛋白表达,免疫荧光方法检测Nrf2、P47phox在细胞内的定位及表达。结果高糖刺激肾小球内皮细胞后出现氧化应激损伤,ROS升高,NO减少,p47phox表达量增高,Nrf2及下游蛋白NQO1、HO-1表达减少;NBAE可明显提高Nrf2的表达,并增加下游蛋白NQO1和HO-1的表达,从而抑制高糖导致的ROS升高,抑制p47phox的表达,并稳定NO的含量。结论 NBAE通过激活Nrf2及其下游靶蛋白来改善高糖对肾小球内皮细胞造成的氧化应激损伤。(本文来源于《中国组织化学与细胞化学杂志》期刊2019年03期）
仲玉鑫,胡珊,王婷婷,张雨淼,李万忠[2]（2019）在《香椿子正丁醇提取物通过激活Nrf2改善高糖引起的肾小球内皮细胞氧化应激》一文中研究指出探讨香椿子正丁醇提取物(n-butyl alcohol extract of Toona sinensis,NBAE)对高糖引起的肾小球内皮细胞氧化应激作用及机制。本实验分别以高糖、高糖+NBAE刺激人肾小球内皮细胞,采用DCFDA法检测细胞内活性氧(reactive oxygenspecies,ROS)生成情况,Nitrate/Nitrite Colorimetric法检测细胞内NO的含量,Western blotting检测Nrf2、NQO1及HO-1的蛋白表达,免疫荧光方法检测Nrf2、(本文来源于《中国解剖学会2019年年会论文文摘汇编》期刊2019-08-18）
王苗[3]（2019）在《Ang1-7对AngⅡ诱导肾小球内皮细胞单层通透性变化的影响》一文中研究指出目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导肾小球内皮细胞(GENCs)损伤时细胞单层通透性的变化,以及血管紧张素1-7(Ang1-7)的干预对上述变化的影响,探讨血管紧张素1-7在肾小球内皮细胞损伤中的作用。方法体外培养大鼠GENCs,随机分组并给予相应处理:正常对照组、AngⅡ组、AngⅡ+Ang1-7组,流式细胞仪检测F-actin的变化,Transwell小室法检测GENCs单层通透性。结果与正常对照组相比,AngⅡ组F-actin显着降低(P <0.01)、单层通透性显着增加(P <0.01);与AngⅡ组相比,AngⅡ+Ang1-7组F-actin显着升高(P <0.01)、单层通透性显着降低(P <0.01)。结论 AngⅡ可导致细胞骨架肌动蛋白F-actin解聚,GENCs单层通透性增高,Ang1-7可抑制AngⅡ对GENCs的损伤,Ang1-7在AngⅡ诱导的GENCs损伤过程中起到一定的调节作用。(本文来源于《继续医学教育》期刊2019年07期）
李利群[4]（2019）在《镉与双氢青蒿素对肾小球血管内皮细胞通透性的调控机制研究》一文中研究指出研究背景随着经济和工业的不断发展,越来越多的环境毒素及食品安全问题日益危害着人类的健康。重金属元素镉,于上世纪90年代被国际癌症研究机构(IARC)确定为致癌物,是常见的环境毒物和食品污染物。镉的生物半衰期较长(10-30年)且排泄率低,经呼吸道和消化道进入机体后有选择的蓄积于肾脏、肝脏、肺脏、心血管系统和免疫系统,经过生物积累,对组织和器官造成损伤。肾脏是镉最重要的蓄积部位和靶器官,急性或慢性镉中毒均可影响肾脏的排泄机制。镉通过呼吸或饮食等途径进入人体循环系统后,与肾脏中的金属硫蛋白(metallothionein,MT)形成镉硫蛋白(Cd-MT),经血液循环到达肾脏,直接或间接产生肾脏毒性。研究表明,镉不仅可以造成肾小管重吸收功能障碍,还可以直接损伤肾小球滤过功能导致蛋白尿的发生。人肾小球血管内皮细胞(human renal glomerular endothelial cells,HRGECs)位于肾小球滤过屏障的最内层,直接与血液中镉硫蛋白接触,是首当其冲的受害细胞。镉离子不仅可以直接损伤内皮细胞,还可以通过改变内皮细胞间的连接蛋白组分,破坏内皮细胞间的细胞连接结构,增加其通透性,进而导致蛋白尿的发生发展。黏附连接参与血管内皮通透性的调节作用,VE-cadherin(血管内皮细胞钙黏素)作为黏附连接的重要成员,其结构或功能状态与血管内皮通透性的变化密切相关。VE-cadherin与β-catenin等多种蛋白形成复合体,与p38 MAPK等信号传递蛋白相互作用,维持正常的血管内皮细胞屏障结构和功能。因此,我们采用暂时性(1 h),低剂量(1 μM)氯化镉刺激体外培养的HRGECs,观察特定时间,剂量下镉离子对HRGECs通透性的影响及探究其相关分子机制。研究目标(1)确认低剂量,暂时性镉暴露对肾小球血管内皮细胞通透性的损害作用。(2)确认MAPK信号通路在调控低剂量,暂时性镉暴露诱导的肾小球血管内皮细胞高通透性中的作用。研究方法(1)细胞处理用终浓度为0,0.1,1,10μM的氯化镉刺激HRGECs,以选择药物浓度。后续实验中选择氯化镉终浓度为1μM 刺激时间为1小时。为确认氯化镉对MAPK信号通路的影响,加入终浓度为10 μM的MAPK信弓号通路抑制剂PD98059,SP600125,SB203850进行预刺激HRGECs1 小时,以阻断 MAPK信号通路。(2)细胞增殖及活力实验用浓度为0,0.1,1,10 μM的氯化镉刺激HRGECs 1小时后,采用MTT增殖实验及台盼蓝染色实验,检测细胞增殖能力与细胞活力。(3)流式细胞术检测细胞凋亡实验将细胞分为对照组(PBS)、氯化镉(细胞与1 μM CdCl2共同培养1小时)组,采用Annexin V/PI双染法测定细胞凋亡率。(4)Transwell FITC细胞通透性实验将各组细胞接种于上层小室中,用浓度为0,0.1,1,10μM的氯化镉刺激HRGECs,1小时后使用FITC-dextran,通过荧光酶标仪分析各组细胞的通透性变化。(5)电子细胞基质阻抗判断技术(Electric cell-substrate impedance sensing,ECIs)将各组细胞接种于ECIs电极板中,设对照组(PBS)、氯化镉(细胞与1 μM CdCI2共同培养1小时)组、氯化镉+PD98059组、氯化镉+SP600125组、氯化镉+ SB203850组。给予电流刺激后,当通过基底电极板到培养液的电流通过细胞层时,细胞的通透性变化均可导致可测量的电阻值发生变化。(6)实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,RT-qPCR)将细胞分为对照组(PBS)、氯化镉(细胞与1 μM CdC12共同培养1小时)组,提取细胞总RNA,并利用试剂盒反转录合成的cDNA为模板,进行RT-qPCR反应,检测CDH5,CTNNB1基因表达水平变化。(7)蛋白免疫印迹(Westen Blot,WB)将细胞分为对照组(PBS)、氯化镉(细胞与1 μM CdCl2共同培养1小时)组、氯化镉+ PD98059组、氯化镉+SP600125组、氯化镉+SB203850组,提取细胞总蛋白,Western Blot检测MAPK信号通路蛋白水平变化。(8)免疫荧光将细胞分为对照组(PBS)、氯化镉(细胞与1 μM CdCl2共同培养1小时)组和氯化镉+ SP600125组,通过免疫荧光实验检测氯化镉对肾小球血管内皮细胞黏附连接蛋白VE-cadherin和β-catenin表达的影响。研究结果(1)MTT、台盼蓝结果显示,当浓度低于10 μμM时,氯化镉对HRGECs的增殖能力和活力无明显影响。流式细胞术实验结果显示,低剂量(1 μM),暂时性(1小时)镉暴露对HRGECs的凋亡作用无显着影响。(2)免疫荧光结果显示,低剂量(1 μM),暂时性(1小时)镉暴露能诱导VE-cadherin和β-catenin蛋白在细胞膜上重新定位,导致VE-cadherin失去稳定性而发生内吞,使细胞膜连接处VE-cadherin蛋白减少。而p38 MAPK信号通路抑制剂SB203850可有效逆转氯化镉诱导VE-cadherin和β-catenin蛋白的重新分布,改善细胞通透性。(3)Traswell FITC-dextran通透性实验结果显示,1μM和10 μM浓度的氯化镉暴露均可导致HRGECs通透性增高。(4)WB实验结果显示,低剂量(1 μM),暂时性(1小时)镉暴露能激活MAPK信号通路。而抑制剂PD98059、SP600125、SB203850能有效抑制镉诱导的MAPK信号通路的激活。(5)ECIs实验结果显示,加入p38 MAPK信号通路抑制剂SB203850能阻断镉诱导的肾小球血管内皮细胞高通透性现象。研究结论低剂量(1 μM),暂时性(1小时)氯化镉刺激虽然对肾小球血管内皮细胞增殖、迁移和凋亡没有显着影响,但仍能通过诱导VE-cadherin和β-catenin排列紊乱影响到肾小球血管内皮细胞的通透性。而特异性阻断p38 MAPK信号通路能降低镉离子诱导肾小球血管内皮细胞高通透性现象,为临床治疗镉污染相关疾病提供了新的思路。研究背景血管内皮销黏蛋白(vascular endothelial cadherin,VE-cadherin)是细胞黏附连接的主要蛋白,并特异性表达在血管内皮细胞上。VE-cadherin结构功能的改变与血管内皮屏障的通透性密切相关。近年来,VE-cadherin在肾脏疾病领域受到广泛关注,越来越多的证据表明VE-cadherin广泛参与多种肾脏疾病的发生、发展过程,尤其在调节肾小球微血管内皮的通透性,降低蛋白尿等方面发挥着重要作用。青蒿素(Artemisinin,ART)是从黄花蒿茎叶中提取的一种含有过氧基团倍半蔽内酷类物质,广泛用于抗拒治疗且副作用小。双氧青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)是青蒿素的半合成衍生物,在体内具有吸收快,分布广,毒性小,排泄快等优点。研究表明,DHA具有抑制人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和管样结构形成等作用,但是DHA对内皮细胞通透性的影响尚不明确。本文通过探究DHA与VE-cadherin的相互作用关系及DHA调控VE-cadherin功能的相关机制,明确了DHA可以通过增加VE-cadherin的表达,降低肾小球血管内皮细胞的通透性,在一定程度上降低蛋白尿的发生。证实了双氢青蒿素在肾小球血管内皮细胞中抗通透性增高的具体作用机制,为DHA应用于临床治疗慢性肾脏疾病提供了基础理论依据。研究目标体外细胞学实验确认DHA对肾小球血管内皮细胞通透性的调控作用及其机制。研究方法(1)蛋白免疫印迹(WestemBlot,WB)将细胞分为对照组(PBS)、双氢青蒿素(25 pM)组,24小时后提取细胞总蛋白,Western Blot分析VE-cadherin,Snail、Slug,Smad2/3及怜酸化Smad2/3蛋白水平变化。(2)实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,TR-qPCR)将细胞分为对照组(PBS)、双氢青蒿素(25pM)组,24小时后提取细胞总RNA,并利用试剂盒反转录合成的cDNA为模板,进行RT-qPCR反应,检测VE-cadherin,Snail、Slug基因表达水平。(3)免疫荧光将细胞分为对照组(PBS)、双氢青蒿素(25 pM)组,通过免疫荧光实验检测DHA对VE-cadherin蛋白表达的影响。(4)染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)通过超声裂解DHA刺激后的HRGECs,得到最佳长度的DNA片段,加入Snail、Slug蛋白抗体获取目的片段DNA,经纯化后,用VE-cadherin启动子引物进行PCR扩増,检测转录因子Snail、Slug与VE-cadherin启动子结合的能力。研究结果(1)WB,RT-qPCR和免疫荧光实验结果表明,双氢青蒿素特异性上调HRGECs中VE-cadherin蛋白和mRNA的表达。(2)WB实验结果表明,双氢青蒿素刺激HRGECs后,TGF-β受体蛋白I及磷酸化Smad2/3蛋G明显降低,而Smad2/3总蛋G无变化。表明DHA可抑制TGF-β RI信号通路的激活。(3)WB和RT-qPCR实验结果表明,双氢青蒿素特异性下调HRGECs中Snail、Slug蛋白和mRNA的表达。(4)染色质免疫共沉淀实验结果证实,双氢青蒿素通过特异性减少Snail、Slug与VE-cadherin启动子的结合,来降低VE-cadherin启动子活性,导致VE-cadherin表达降低。研究结论双氢青蒿素通过抑制TGF-β RI-Smad2/3信号通路及其下游转录因子Snail、Slug蛋白表达,下调Snail、Slug和VE-cadherin启动子的结合从而调控VE-cadherin启动子的活性,增加VE-cadherin蛋白及基因的表达,从而降低肾小球血管内皮细胞的通透性。研究背景重金属污染物镉,可通过食物链进入人体而危害人体健康。镉在人体可作用于多个不同器官,产生不同的毒理作用,如肾损害、心血管损害、骨骼损害、免疫系统损害、肿瘤等。肾脏是镉慢性毒性作用的主要靶器官。镉在近曲小管和部分远曲小管中积聚,导致肾小管重吸收功能受损,引发肾小管退行性病变。镉以与低分子量金属硫蛋白结合形成复合物的形式存在于血液循环中,可直接接触肾小球血管内皮细胞,产生细胞毒性,影响肾小球滤过屏障功能。研究表明,镉可以诱导多种细胞的死亡,但镉对肾小球血管内皮细胞的作用还不甚明确。NF-κβ是普遍存在于真核细胞的一种核转录因子。静息状态下,其与抑制因子IkBoc结合而处于非活化状态,并滞留在细胞质中。当细胞受到胞内外刺激后,会启动相应的信号传导通路,激活IkB激酶,磷酸化IkBci蛋白并使其降解,释放出NF-κβ二聚体。NF-κβ二聚体通过各种翻译后的修饰作用而被进一步激活,并入核行使其转录因子功能,诱导靶基因表达。NF-κβ调节众多基因的表达,参与多种病理生理过程,在细胞增殖、分化、凋亡和自噬中也扮演着重要角色。在本文中,我们探究了低浓度镉对人肾小球血管内皮细胞影响,并选用NF-κβ抑制剂PDTC,来探讨NF-κβ信号通路的阻断对于镉介导的人肾小球血管内皮细胞生存的影响,并且探究在此过程中相关的分子机制。研究目标(1)确认氯化镉对人肾小球血管内皮细胞凋亡的作用。(2)确认NF-κβ信号通路在调控镉介导的人肾小球血管内皮细胞凋亡中的作用。研究方法(1)细胞处理细胞用4 pM氯化镉刺激细胞24小时后进行检测。加入终浓度为10的NF-κβ信号通路抑制剂PDTC进行预刺激HRGECs 1小时,以阻断NF-κβ信号通路。加入终浓度为10 pM的信号通路抑制剂SP600125进行预刺激HRGECs 1小时,以阻断JNK信号通路。(2)细胞活力实验将细胞分为对照组、氯化镉组、PDTC组、氯化镉+PDTC组。采用台盼蓝染色实验,检测细胞活力。(3)流式细胞术检测细胞凋亡实验将细胞分为对照组、氯化镉组、PDTC组、氯化镉+PDTC组、氯化镉+PDTC组+SP600125组,采用Annexin V/PI双染法测定细胞凋亡率。(4)蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)将细胞用4氯化镉刺激0,1,6,12,24小时后,提取细胞总蛋白,Western Blot检测IkBcx蛋白水平变化;将细胞分为对照组、氯化镉+PDTC组,分别提取0,1,6小时刺激后细胞总蛋白,Western Blot检测JNK和p-JNK蛋白水平变化。(5)免疫荧光将细胞分为对照组、氯化镉组,通过免疫荧光实验检测肾小球血管内皮细胞p65蛋白的表达水平。(6)数据分析同第一部分实验结果(1)WB实验结果显示,氯化镉可以显着降低HRGECs细胞质中的IkBcx蛋白表达水平。免疫荧光结果显示,经氯化镉处理后,HRGECs中NF-κβ p65蛋白核内转移增加,即表明氯化锚可以激活HRGECs中的NF-κβ信号通路。(2)流式细胞术及细胞活力实验结果显示,单独用4 pM氯化镉及PDTC处理HRGECs后,其凋亡能力及细胞活性无明显改变。而氯化镉与PDTC同时处理HRGECs后,其凋亡率显着增加而细胞活性显着降低。这表明通过抑制NF-κβ信号通路能引起HRGECs的死亡及活力下降,从而抑制细胞生存。(3)WB实验结果显示,氯化镉可以增加HRGECs细胞中磷酸化JNK蛋白的表达。而相对于单独使用氯化镉,氯化镉与PDTC同时处理HRGECs后,磷酸化JNK蛋白表达量会显着增加。这表明JNK信号可以被氯化镉激活的NF-κβ通路所抑制。(4)流式细胞术结果显示,在氯化镉与PDTC细胞处理组中加入JNK抑制剂SP600125后,其凋亡率下降。表明NF-κβ可以通过抑制JNK通路来部分逆转氯化镉引起的HRGECs的凋亡。研究结论氯化镉通过激活NF-κβ信号通路,并以JNK为作用靶点,维持镉暴露后HRGECs的存活。(本文来源于《山东大学》期刊2019-05-25）
郭亚楠,仲玉鑫,刘雨清,张红霞[5]（2019）在《慢性汞中毒对肾小球血管内皮细胞的影响及机制研究》一文中研究指出目的探讨慢性汞中毒对肾小球内皮细胞的影响及作用机制。方法采用SD大鼠建立慢性汞中毒模型,HE、PAS观察肾脏病理变化;氯化汞刺激人肾小球内皮细胞观察对内皮细胞的影响及相关蛋白表达。结果慢性汞中毒可致肾小管、肾小球广泛变性坏死,内皮细胞运动、迁移能力减弱,差异具有统计学意义(P<0.01),相关蛋白表达异常,并有剂量依赖性。结论根据汞致肾损伤的变化为法医诊断慢性汞中毒提供理论基础。(本文来源于《中国法医学杂志》期刊2019年02期）
段斌,高妍婷,杜鹏,张蓬杰,李振江[6]（2019）在《山奈酚对高糖条件下人肾小球内皮细胞氧化应激及凋亡的影响》一文中研究指出目的观察山奈酚对高糖条件下人肾小球内皮细胞氧化应激及凋亡的影响。方法 2016年4月—2018年8月于陕西省人民医院中心实验室进行实验。培养人肾小球内皮细胞后分为5.5 mmol/L葡萄糖处理的对照组、30.0 mmol/L葡萄糖处理的高糖组、30.0 mmol/L葡萄糖+山奈酚50μmol/L处理的山奈酚组,测定活性氧(ROS)、凋亡率、氧化应激及凋亡基因的表达水平。结果高糖组的ROS含量、凋亡率及NOX2、NOX4、Nrf2、HO-1、Bax、VDAC1的mRNA表达水平均明显高于对照组(t/P=6.321/0.000、7.141/0.000、5.324/0.001、6.103/0.000、4.203/0.003、4.748/0.001、5.325/0.001、5.884/0.000),HK-II、Bcl-2的mRNA表达水平均明显低于对照组(t/P=7.125/0.000、6.718/0.000);山奈酚组的ROS含量、凋亡率及NOX2、NOX4、Bax、VDAC1的mRNA表达水平均明显低于高糖组(t/P=3.518/0.008、5.349/0.001、2.643/0.030、2.647/0.029、2.492/0.037、2.440/0.041),Nrf2、HO-1、HK-II、Bcl-2的mRNA表达水平均明显高于高糖组(t/P=3.308/0.011、2.833/0.022、4.828/0.001、3.923/0.000)。结论山奈酚对高糖条件下人肾小球内皮细胞氧化应激及凋亡具有抑制作用。(本文来源于《疑难病杂志》期刊2019年04期）
张烨,郭晓蒙,叶樱琳,蒋荣珍[7]（2019）在《子痫前期患者血清可通过sFlt-1-CAV1途径增加肾小球内皮细胞通透性》一文中研究指出目的:探讨子痫前期(PE)血清中可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)对肾小球内皮细胞(HRGECs)通透性的影响机制。方法:收集20例PE与正常孕妇外周血清,ELISA法检测孕妇外周血中sFlt-1含量。利用PE血清及重组sFlt-1(rsFlt-1)蛋白处理HRGECs,细胞接种于transwell小室,体外细胞培养分组:正常孕妇血清处理组(NG组),PE血清处理组(PE组),正常孕妇血清+rsFlt-1处理组,PE+sFlt-1抑制剂处理组,PE血清+CAV1抑制剂处理组。Evens-blue检测HRGECs对大分子蛋白通透性改变;Western blot法检测caveolin-1(CAV1)蛋白表达。结果:PE血清sFlt-1含量明显高于正常对照组;PE血清、rsFlt-1可使HRGECs对大分子蛋白通透性及CAV1蛋白表达增加。sFlt-1抑制剂、CAV1抑制剂可抑制PE血清、rsFlt-1导致的HRGECs对大分子蛋白通透性增加。结论:PE患者血清可通过sFlt-1-CAV1信号通路增加肾小球内皮细胞对大分子蛋白的通透性,CAV1表达异常可能参与蛋白尿的产生。(本文来源于《现代妇产科进展》期刊2019年04期）
陈崭[8]（2019）在《microRNA-155在糖尿病肾病肾小球内皮细胞损伤中的作用机制研究》一文中研究指出研究背景糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病的常见和严重并发症,20%-40%的糖尿病患者会进展为DN。在西方国家中DN是终末期肾脏病(end stage renal disease,ESRD)的首要原因,也是糖尿病致命的重要原因。在我国,DN患者的发病率也逐年上升,已经成为ESRD的主要病因之一。2010年对中国近10万名成年人流行病学调查结果:中国成年人糖尿病患病率11.6%,患者约1.14亿。糖尿病前期患病率估计为50.1%,患者约4.93亿。以糖尿病肾病患者经过10~20年50%发展至ESRD计算,未来10~20年我国新增糖尿病肾病引发的尿毒症患者1500万,将给国民身心健康和社会经济发展带来沉重负担。而糖尿病肾病的发病是由多因素共同造成的,发病机制仍不清楚,治疗手段也相对局限,目前的临床治疗只能缓解病情进展而无法逆转或根治疾病。因此研究糖尿病肾病的发病机制,寻找新的治疗靶点对于疾病的早期预防和临床治疗具有重要意义,成为临床和科研工作者的重要任务和国家的重大需求。人肾小球内皮细胞(human renal glomerular endothelial cells,HRGEC)作为肾小球固有细胞之一,表面有特殊的窗孔结构和多糖蛋白复合物覆盖,它位于肾小球毛细血管最内侧与基底膜和足细胞共同构成了肾小球的选择滤过屏障,从而在蛋白质等大分子物质的选择滤过中起到重要作用。此外内皮细胞、足细胞和系膜细胞之间可以通过自分泌、旁分泌等途径相互作用。由于它位置的特殊性,极易受到血液中血糖血脂和炎症因子的影响而损伤,因此内皮细胞特殊的结构和功能在糖尿病肾病的发生发展中起到重要作用。microRNAs(miRNAs)是近年发现的长度20bp左右的内源性非编码小RNA,它主要通过与靶基因mRNA的3'非编码区(3'-UTR)相结合,引导沉默复合体从而降解靶基因mRNA或抑制它的翻译,进而调控下游效应因子的表达来影响机体的多种生理病理过程。然而一个miRNA可以调节多个靶基因产生不同的作用,其参与DN的发生发展机制并不明确,仍需更多的研究来探索miRNA与DN发病的关系。已有的研究表明,miR-155参与细胞的分化、增殖、凋亡以及多种生物组织的发育调节过程。本课题组前期开展了糖尿病患者血清miRNA谱检测,发现与健康对照组比较,糖尿病肾病组早期血清miR-150、miR-155-5p、miR-30e及miR-3196水平显着下降,其中miR-155的表达水平在微量蛋白尿组和大量蛋白尿组对比有显着差异(P<0.05),并与DN患者eGFR呈正性相关,与患者的尿蛋白排泄率呈负性相关。基于理论认识和我们的前期工作基础,我们认为miR-155可能与DN的肾小球内皮细胞功能障碍相关。研究目的对高糖培养的人肾小球内皮细胞转染miR-155,通过miR-155过表达、抑制剂抑制miR-155表达来检测miR-155对靶基因ETS-1和下游效应因子的调控作用,以及对肾小球内皮细胞凋亡和炎症反应的影响,研究高糖环境下miR-155在肾小球内皮细胞损伤中的作用机制。研究对象和方法本研究以原代人肾小球内皮细胞为研究对象,分别检测各组细胞在高糖、转染miR-155过表达和抑制剂时的细胞形态、靶基因ETS-1表达产物(ETS-1)、ETS-1下游效应因子VCAM-1和MCP-1的变化以及细胞凋亡的情况。1.检测高糖刺激对内皮细胞炎症因子和细胞凋亡的影响将对数生长期的人肾小球内皮细胞随机分为叁组:正常糖组(NG:5.6 mmol/L D-葡萄糖)、高渗组(HM:5.6 mmol/L D-葡萄糖+24.4 mmol/L甘露醇)和高糖组(HG:30 mmol/L D-葡萄糖)。采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)分别检测各组ETS-1、VCAM-1、MCP-1和Cleaved caspase-3的蛋白表达量;通过细胞免疫荧光法观察ETS-1、VCAM-1和MCP-1的定位和荧光强度,进而了解高糖刺激对内皮细胞炎症因子和细胞凋亡的影响。2.检测高糖刺激下转染miR-155对ETS-1及内皮细胞炎症因子和细胞凋亡的影响在高糖环境下,通过对人肾小球内皮细胞转染miR-155 mimic和miR-155inhibitor,以改变miR-155的基因表达水平;并设立转染对照组mimic control和inhibitor control。采用Western blot分别检测miR-155的过表达和被抑制时ETS-1以及VCAM-1、MCP-1和Cleaved caspase-3的蛋白表达,通过细胞免疫荧光法观察ETS-1、VCAM-1和MCP-1的定位和荧光强度,进而了解高糖刺激下转染miR-155对ETS-1及内皮细胞炎症因子和细胞凋亡的影响。3.检测高糖刺激下转染ETS-1 siRNA对VCAM-1、MCP-1的调控作用高糖环境下,在人肾小球内皮细胞转染ETS-1 siRNA以下调ETS-1的mRNA表达水平;并设立siRNA转染对照组Scramble RNA。采用Western blot分别检测ETS-1被干扰时VCAM-1、MCP-1的蛋白表达;通过细胞免疫荧光法观察ETS-1、VCAM-1、MCP-1的定位和荧光强度,进而探讨高糖刺激下转染ETS-1 siRNA对VCAM-1、MCP-1的调控作用。研究结果1.高糖刺激时人肾小球内皮细胞损伤明显,Western blot结果表明:炎症相关蛋白ETS-1、VCAM-1、MCP-1表达上调,凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3表达增多,差异显着,均具有统计学意义(P<0.05)。细胞免疫荧光表明:高糖刺激时ETS-1、VCAM-1、MCP-1荧光增强,细胞免疫荧光结果与Western blot结果一致,差异显着,有统计学意义(P<0.05)。2.在高糖培养的人肾小球内皮细胞中转染miR-155 mimic、miR-155 inhibitor及相应对照后,Western blot结果表明:miR-155过表达时ETS-1、VCAM-1、MCP-1、Cleaved caspase-3蛋白的表达减少;miR-155被抑制时ETS-1、VCAM-1、MCP-1、Cleaved caspase-3蛋白的表达增多,差异显着,具有统计学意义(P<0.05),转染对照组与高糖对照组之间无明显差异。细胞免疫荧光结果与Western blot结果一致,差异显着,有统计学意义(P<0.05)。3.在高糖培养的人肾小球内皮细胞中转染ETS-1 siRNA及其对照后,Western blot结果表明:ETS-1、VCAM-1、MCP-1蛋白的表达减少,差异显着,具有统计学意义(P<0.05),Scramble RNA组与高糖对照组之间无明显差异。细胞免疫荧光结果与Western blot结果一致,差异显着,有统计学意义(P<0.05)。结论1.高糖刺激下人肾小球内皮细胞炎症因子表达增多,内皮细胞凋亡增加。2.高糖培养的肾小球内皮细胞过表达miR-155时,ETS-1表达减少,miR-155被抑制时ETS-1表达增加。提示:miR-155可能通过负调控ETS-1的表达参与了内皮细胞的损伤。3.高糖刺激下对人肾小球内皮细胞分别转染miR-155 mimic与ETS-1 siRNA时,ETS-1表达与其下游效应因子VCAM-1、MCP-1表达一致,呈正相关。ETS-1可能通过调控VCAM-1、MCP-1从而介导内皮细胞的炎症反应。(本文来源于《兰州大学》期刊2019-03-01）
谢瑞燕,方雪玲,Hamze,I.RAGE,崔彤霞,朱伟平[9]（2019）在《红景天苷上调HIF-1α减轻高糖诱导的大鼠肾小球内皮细胞损伤》一文中研究指出目的:观察体外不同浓度葡萄糖对大鼠肾小球内皮细胞(rRGECs)表达低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子A(VEGFA)及血管内皮钙黏素(VE-cadherin)的影响,探讨红景天苷减轻高糖诱导rRGECs损伤的作用及可能相关机制。方法:体外培养rRGECs,分为正常糖组、高糖(20、30和50 mmol/L)组、高渗组及红景天苷+高糖组。采用MTT法检测rRGECs的活力;RT-qPCR法检测rRGECs内HIF-1α、VEGFA及VE-cadherin的mRNA表达;Western blot法检测rRGECs内HIF-1α蛋白的表达。结果:与正常糖组相比,培养24 h后,高糖(20mmol/L)组rRGECs HIF-1α的mRNA及蛋白表达均上调(P <0.05);培养120 h后,高糖组HIF-1αmRNA表达下调(P <0.05)。与正常糖组相比,培养24 h和120 h后,高糖组rRGECs内VE-cadherin的mRNA表达下调(P <0.05)。与正常糖组相比,培养24 h后,高糖组rRGECs内VEGFA的mRNA表达上调(P <0.05);培养120 h后,高糖组rRGECs内VEGFA的mRNA表达下调(P <0.05)。与正常糖组相比,培养24 h和120 h后,高渗组rRGECs内HIF-1α、VE-cadherin及VEGFA的mRNA表达无变化。与高糖组相比,培养24 h后,红景天苷(50μmol/L)组rRGECs的活力增加(P <0.01),且细胞内HIF-1α和VE-cadherin的mRNA及HIF-1α蛋白表达均上调(P <0.05)。结论:体外高糖培养能影响rRGECs表达HIF-1α,可能与细胞活力、葡萄糖的浓度、作用时间及HIF/VEGF通路有关。红景天苷能减轻高糖诱导的rRGECs损伤,其机制可能与增加rRGECs内HIF-1α的表达有关。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2019年02期）
张泉,周奕奕,樊星,韩鸿玲[10]（2018）在《高浓度尿酸对肾小球内皮细胞氧化应激及炎症反应的影响》一文中研究指出目的探讨高浓度尿酸对肾小球内皮细胞氧化应激及炎症反应的影响。方法取传5～15代、对数生长期、生长状态良好的人肾小球内皮细胞(HRGEC),接种于6孔板,随机分为阴性对照组、生理浓度尿酸组、中浓度尿酸组、高浓度尿酸组。各组分别给予0、4、8、16 mg/d L尿酸干预24 h,分别采用RT-PCR法、Western blotting法检测内皮型一氧化氮合酶(e NOS)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、核因子κB(NF-κB)p56 mRNA和蛋白表达,采用荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)含量。结果阴性对照组、生理浓度尿酸组e NOS mRNA和蛋白相对表达量均明显低于中浓度尿酸组、高浓度尿酸组,ICAM-1、MCP-1、NF-κB p65 mRNA和蛋白相对表达量及ROS含量均明显高于中浓度尿酸组、高浓度尿酸组(P均<0. 05),而阴性对照组与生理浓度尿酸组、中浓度尿酸组与高浓度尿酸组上述指标比较P均> 0. 05。结论高浓度尿酸可能通过增加氧化应激途径中ROS产生和抑制e NOS表达,以及激活NF-κB信号通路促进炎症因子分泌等,导致肾小球内皮细胞损伤。(本文来源于《山东医药》期刊2018年48期）
肾小球内皮细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
探讨香椿子正丁醇提取物(n-butyl alcohol extract of Toona sinensis,NBAE)对高糖引起的肾小球内皮细胞氧化应激作用及机制。本实验分别以高糖、高糖+NBAE刺激人肾小球内皮细胞,采用DCFDA法检测细胞内活性氧(reactive oxygenspecies,ROS)生成情况,Nitrate/Nitrite Colorimetric法检测细胞内NO的含量,Western blotting检测Nrf2、NQO1及HO-1的蛋白表达,免疫荧光方法检测Nrf2、
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肾小球内皮细胞论文参考文献
[1].仲玉鑫,胡珊,王婷婷,张雨淼,李万忠.香椿子正丁醇提取物通过激活Nrf2改善高糖引起的肾小球内皮细胞氧化应激[J].中国组织化学与细胞化学杂志.2019
[2].仲玉鑫,胡珊,王婷婷,张雨淼,李万忠.香椿子正丁醇提取物通过激活Nrf2改善高糖引起的肾小球内皮细胞氧化应激[C].中国解剖学会2019年年会论文文摘汇编.2019
[3].王苗.Ang1-7对AngⅡ诱导肾小球内皮细胞单层通透性变化的影响[J].继续医学教育.2019
[4].李利群.镉与双氢青蒿素对肾小球血管内皮细胞通透性的调控机制研究[D].山东大学.2019
[5].郭亚楠,仲玉鑫,刘雨清,张红霞.慢性汞中毒对肾小球血管内皮细胞的影响及机制研究[J].中国法医学杂志.2019
[6].段斌,高妍婷,杜鹏,张蓬杰,李振江.山奈酚对高糖条件下人肾小球内皮细胞氧化应激及凋亡的影响[J].疑难病杂志.2019
[7].张烨,郭晓蒙,叶樱琳,蒋荣珍.子痫前期患者血清可通过sFlt-1-CAV1途径增加肾小球内皮细胞通透性[J].现代妇产科进展.2019
[8].陈崭.microRNA-155在糖尿病肾病肾小球内皮细胞损伤中的作用机制研究[D].兰州大学.2019
[9].谢瑞燕,方雪玲,Hamze,I.RAGE,崔彤霞,朱伟平.红景天苷上调HIF-1α减轻高糖诱导的大鼠肾小球内皮细胞损伤[J].中国病理生理杂志.2019
[10].张泉,周奕奕,樊星,韩鸿玲.高浓度尿酸对肾小球内皮细胞氧化应激及炎症反应的影响[J].山东医药.2018
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