导读:本文包含了核酸印迹论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:印迹,核酸,蛋白,电泳,活性,部位,艾滋病病毒。
核酸印迹论文文献综述
张亚兰,卫晓丽,郑海潮,杨扬,于彤彤[1]（2018）在《使用四代HIV抗原抗体试剂筛查联合蛋白印迹或核酸补充实验的检测策略临床评价》一文中研究指出目的对使用四代艾滋病病毒(HIV)抗原抗体试剂筛查,联合蛋白印迹试验(WB)或核酸补充实验的检测策略进行临床效果评价。方法第四代HIV抗原抗体检测试剂筛查阳性样本282例,采用第叁代HIV抗体检测试剂复检,复检阳性样本进行WB确证,复检阴性样本同时进行WB检测及HIV核酸检测。结果 282例样本,经WB检测HIV抗体阳性195例,占69.1%,阴性71例,占25.2%,抗体不确定16例,占5.7%。71例WB阴性样本,HIV核酸检测阳性5例。16例WB不确定样本,经核酸检测阳性11例。四代阳性+叁代阳性样本206例中,WB确认为HIV抗体阳性195例,占94.7%;9例不确定样本的WB带型主要为p24gp160。四代阳性+叁代阴性样本76例,WB检测HIV抗体阴性69例,其中5例经核酸检测为阳性,核酸值均>1×106拷贝/mL。结论四代阳性+叁代阳性样本,WB确证阳性符合率高;四代阳性+叁代阴性样本,WB检测存在漏检的问题,需要补充核酸试验确证。WB不确定样本,核酸检测可以实现早期诊断的目的。(本文来源于《中国艾滋病性病》期刊2018年03期）
杜文静,徐婷,赵欣[2]（2017）在《61例HIV抗体筛查呈反应性蛋白印迹试验阴性样本核酸检测结果分析》一文中研究指出目前国内检测艾滋病病毒(HIV)抗体最常用的方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、快速检测(RT)、蛋白印迹试验(WB)等。ELISA试剂问世以来,性能不断改进,现有的第四代ELISA试剂在第叁代基础上增加了p24抗原检测,从而实现了HIV抗原/抗体的同步检测~([1])。虽然WB是我国HIV的确证实验,但WB在早期感染者的检测中存在漏检风险~([2]),这严(本文来源于《中国艾滋病性病》期刊2017年06期）
李慧,赵强,梁超,丁红梅,李洁[3]（2014）在《用于未纯化蛋白样品核酸适配体筛选的Western印迹-SELEX筛选技术的建立》一文中研究指出目的:建立一种基于Western印迹的指数式富集的配体系统进化(SELEX)技术,用于未纯化蛋白样品核酸适配体筛选。方法:将目的蛋白经SDS-PAGE分离后转移到PVDF膜上,用生物素标记的ss DNA与PVDF膜上的蛋白共同孵育,获得能与靶蛋白特异结合的适配体,最后通过生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶系统、基因克隆测序、MEME在线软件和RNAstructure软件分析适配体的一、二级结构,并对筛选得到的适配体进行鉴定。结果:经过4轮筛选,获得了能特异识别靶蛋白而不识别无关蛋白的适配体,原库Gp45则与上述蛋白均没有结合。结论:建立了Western印迹-SELEX技术,可用于未纯化蛋白样品核酸适配体筛选。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2014年06期）
吕蓉,王伦善,盛琪琪,赵阳,蒋菲菲[4]（2012）在《无偿献血者HIV-1抗体蛋白印迹确认与核酸检测结果分析》一文中研究指出目的对酶联免疫检测HIV抗体呈反应性标本进行蛋白印迹(WB法)确认和TMA-化学发光法对照检测,以探讨其应用特点。方法将本中心检验科ELISA法检测结果呈HIV抗体反应性的117份标本,重新进行ELISA法检测,结果为S/CO>0.8的标本做蛋白印迹(WB法)确认试验。同时,对117份标本采用TMA-化学发光法检测核酸作为对照试验。血清学检测参加国家CDC及澳大利亚(CITIC)室间质评;核酸检测参加卫生部临检中心和澳大利亚(CITIC)室间质评。结果 ELISA初筛试验:117份标本中,S/CO>1的为37份;0.8<S/CO<1的为11份,S/CO<0.8的为69份;抗体确认试验:HIV抗体确认阳性7份,不确定4份,HIV抗体确认阴性106份;核酸检测试验:117份标本中11份检出HIV RNA阳性,106份标本为HIV RNA阴性。结论 ELISA方法检测HIV抗体存在一定的假阳性;HIV蛋白印迹确认试验存在一些不确定结果,对于只有gp160/120、P17、P24的抗体不确定标本,可以采用核酸检测方法辅助确认。(本文来源于《临床输血与检验》期刊2012年04期）
何沙[5]（2012）在《基于微流控的蛋白质和核酸的多相印迹分析研究》一文中研究指出印迹分析技术是生物学的许多分支中的支柱技术，应用非常广泛，但这经过这么多年的发展之后，一些固有的问题依然没有解决。尤其是随着细胞生物学，分子生物学，蛋白组学的发展，越来越迫切地需要在有限的样品中获得有关更多有关细胞信号通路以及蛋白质相互作用的信息，这对传统的印迹分析技术是很大的挑战，因为传统的印迹分析技术的分析通量非常有限，而且操作繁琐，不能满足现代生物医学诊断分析的需求。微流控技术是近二十年来发展起来的一项新型分析技术，利用微小的管道和腔室对流体以及被分析物进行处理，具有通量高，成本低，操作简便等优点，这些优点刚好能够克服传统印迹分析技术的缺点，所以我们试图将微流控技术整合到印迹分析技术中来，以期解决传统印迹分析技术中存在的问题。具体的，我们做了以下几个方面的尝试：使用软刻蚀技术制备微流控芯片，并且调节一下参数使得芯片适用于不同的印迹操作条件；使用粘性芯片，维克罗以及夹具这叁种不同的方法，试图增强聚二甲基硅氧烷和聚偏氟乙烯这对非常规使用组合之间的粘合性能；将制备好的微流控芯片用于改进传统的印迹分析过程，包括在多种样品中进行多种参数的同时鉴定；在样品中引入分子量标尺；在一次实验中完成抗原以及抗体滴定；探索了微流控体系中孵育时间对结果的影响，以及利用管道鉴定相邻条带的功能；对于微流体系与开放体系的差异，提出了一些理论上的初步解释；将该分析体系应用于核酸，得到了类似的分析结果，证明了该体系的广泛适用性。通过这一系列的研究，我建立了一个简便的印迹分析系统，发现了一些独特的性质。此外，该系统中使用到的元件和方法都十分简单，易于推广，有望在不久的将来实现商业化，走进千百间生物学实验室，推动生物学的研究前行。(本文来源于《重庆大学》期刊2012-04-01）
綦廷娜,刘志广,王涛,李培京,叶长芸[6]（2011）在《琼脂糖凝胶电泳与核酸印迹杂交法检测细菌毒力基因PCR产物的灵敏度比较研究》一文中研究指出目的探讨核酸印迹杂交法在检测细菌毒力基因方面的应用价值。方法分别以10倍连续稀释的O157∶H7肠出血性大肠埃希菌和血清2型猪链球菌染色体提取物为模板,与志贺毒素2基因(stx2)和荚膜多糖2J基因(cps2J)特异性引物进行聚合酶链式反应(PCR)。用1%琼脂糖凝胶电泳及核酸印迹杂交法检测PCR产物,比较两种方法的最低检测限。结果 1%琼脂糖凝胶电泳对EDL933菌株stx2基因PCR产物的最低检测限为6.7×102cfu(56.87 pg)/PCR体系,对SC84菌株cps2J基因PCR产物的最低检测限为4.3×102 cfu(12.65 pg)/PCR体系;核酸印迹杂交法对EDL933菌株stx2基因PCR产物的最低检测限为6.7×10-1 cfu(56.87 fg)/PCR体系,对SC84菌株cps2J基因PCR产物的最低检测限为4.3×10-1 cfu(12.65 fg)/PCR体系。结论用核酸印迹杂交法检测肠出血性大肠埃希菌stx2基因和猪链球菌cps2J基因PCR产物的灵敏度均比普通琼脂糖凝胶电泳检测法高了1000倍。(本文来源于《疾病监测》期刊2011年08期）
崔莹,禇绮,姚林,黄积涛[7]（2008）在《蛋白质-核酸混合物的生物印迹及催化水解反应的研究》一文中研究指出作为分子印迹的发展,生物印迹已经成为以蛋白质为母体制备模拟酶的重要手段.本文以N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯为模板印迹来源于鲱鱼精子的蛋白质-核酸混合物,并用来催化N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯的水解反应.结果表明,生物印迹的蛋白质-核酸混合物在水介质中稳定,能够用作水解反应的酶模拟物.(本文来源于《天津理工大学学报》期刊2008年03期）
赵景云[8]（2007）在《蛋白质/核酸的生物印迹及酶的电驱动催化研究》一文中研究指出本论文是对酶蛋白质催化机制的研究。课题包括两部分内容:(1)对蛋白质和核酸进行生物印迹,通过构建新的活性部位来探索静态形状的契合对催化活性的贡献;(2)以交变电场刺激智能高分子材料所包埋的蛋白酶,研究电刺激频率对催化活性的影响。利用蛋白质在水溶液中的柔性,分别采用热变性法对蛋清蛋白质进行生物印迹和沉淀法对BSA进行生物印迹,并在BSA印迹的基础上又印迹了鲱鱼精脱氧核糖核酸。实验结果表明,热变性法制备的印迹酶在水溶液中依然保持其活性,且反应物印迹的蛋白质催化性能较高;沉淀法生物印迹的生物大分子表现了一定的酶活性,BAEE印迹的BSA,随所用BAEE的量的增大,BSA印迹酶的催化性能越高;但Ac-Phe-OH印迹的BSA,在催化Ac-Phe-OH酯化时,催化活性与所用的Ac-Phe-OH量并无明显关系。所用的鲱鱼精脱氧核糖核酸在260 nm处的吸光度与280 nm处的吸光度的比值小于1.9,所以其纯度不够,含有蛋白质等杂质,被印迹的主体分子可能仅是其中的蛋白质,致使BAEE印迹的核酸这种印迹酶的催化活性明显不高。为了研究胰蛋白酶在交变电场中活性的改变,采用了包埋法将其固定在聚合物内,通过反应体系电场频率的改变刺激电场敏感性聚合物的收缩,来控制胰蛋白酶的运动以改变其活性。本文分别以AMPS和MAA为单体,BIS为交联剂,过硫酸铵为引发剂,TEMED为加速剂及在最适用量比的情况下进行了聚合。实验分析表明PAMPS要比PMAA包埋酶性能好;在交变电场下胰蛋白酶催化BAPA时,各频率之间吸光度的变化基本上无规律;而PAMPS固定化酶在交变电场频率为100 Hz时有明显的改善,而在10 Hz和300 Hz时较小,还不如无电刺激时PAMPS固定化酶的催化效果,说明通过改变反应体系所在的交变电场的频率可以改变胰蛋白酶的活性。(本文来源于《天津理工大学》期刊2007-01-01）
杨成勇,刘翌[9]（2006）在《HIV-1抗体蛋白印迹确认与核酸检测复核对比研究》一文中研究指出应用病毒核酸载量法NASBA和HIV-1 RNA的巢式逆转录PCR(nested RT-PCR)法与HIV抗体蛋白印迹(WB)方法,对经过初筛的44例HIV-1抗体阳性标本进行了对照检测研究。发现了2例(gp160、p24)和1例(gp160g、p120p、66、p24)的特殊阳性样本,经NASBA法和该RT-PCR法核酸检测为阴性;WB确认的4例gp160阳性带、1例p24、p17阳性带和13例p24阳性带,经NASBA法和该RT-PCR法核酸检测也为阴性;而WB确认的其余全部带型的抗体阳性标本经过NASBA法和该RT-PCR法检测均为阳性。该研究表明对只有gp160p、24和gp160、gp120p、66、p24的特殊阳性标本和以p24为主的抗体不确定标本需要用RT-PCR或NASBA方法进行核酸检测,以进一步确认。(本文来源于《病毒学报》期刊2006年02期）
万谟彬,朱冠山,郑瑞英[10]（2003）在《用5′端核酸外切酶法检测基因印迹——编码区单核苷酸多态性》一文中研究指出目的 建立一种快速、高效确认人类基因印迹的新方法。方法 以一对荧光标记探针 ,用 5′端核酸外切酶法结合逆转录 - PCR,分别在人传代淋巴细胞系基因组 DNA和 c DNA水平对一已知印迹基因即核内小核糖核蛋白 N( small nuclear ribonucleotide protein N,SNRPN)中的一编码区单核苷酸多态性( coding single nucleotide polymorphism ,c SNP)位点 rs70 5 ( C/ T)进行 SNP分型。结果 等位基因分辨结果显示 SNRPN只表达一个等位基因。这一结果通过以逆转录 - PCR为基础的限制性片段长度多态性分析 ,得到了进一步证实。家系分析确认被表达的等位基因均来自父亲 ,这与以往的报道一致。结论 c SNP是用 5′端核酸外切酶法检测基因印迹的理想标记(本文来源于《中华医学遗传学杂志》期刊2003年03期）
核酸印迹论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目前国内检测艾滋病病毒(HIV)抗体最常用的方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、快速检测(RT)、蛋白印迹试验(WB)等。ELISA试剂问世以来,性能不断改进,现有的第四代ELISA试剂在第叁代基础上增加了p24抗原检测,从而实现了HIV抗原/抗体的同步检测~([1])。虽然WB是我国HIV的确证实验,但WB在早期感染者的检测中存在漏检风险~([2]),这严
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
核酸印迹论文参考文献
[1].张亚兰,卫晓丽,郑海潮,杨扬,于彤彤.使用四代HIV抗原抗体试剂筛查联合蛋白印迹或核酸补充实验的检测策略临床评价[J].中国艾滋病性病.2018
[2].杜文静,徐婷,赵欣.61例HIV抗体筛查呈反应性蛋白印迹试验阴性样本核酸检测结果分析[J].中国艾滋病性病.2017
[3].李慧,赵强,梁超,丁红梅,李洁.用于未纯化蛋白样品核酸适配体筛选的Western印迹-SELEX筛选技术的建立[J].生物技术通讯.2014
[4].吕蓉,王伦善,盛琪琪,赵阳,蒋菲菲.无偿献血者HIV-1抗体蛋白印迹确认与核酸检测结果分析[J].临床输血与检验.2012
[5].何沙.基于微流控的蛋白质和核酸的多相印迹分析研究[D].重庆大学.2012
[6].綦廷娜,刘志广,王涛,李培京,叶长芸.琼脂糖凝胶电泳与核酸印迹杂交法检测细菌毒力基因PCR产物的灵敏度比较研究[J].疾病监测.2011
[7].崔莹,禇绮,姚林,黄积涛.蛋白质-核酸混合物的生物印迹及催化水解反应的研究[J].天津理工大学学报.2008
[8].赵景云.蛋白质/核酸的生物印迹及酶的电驱动催化研究[D].天津理工大学.2007
[9].杨成勇,刘翌.HIV-1抗体蛋白印迹确认与核酸检测复核对比研究[J].病毒学报.2006
[10].万谟彬,朱冠山,郑瑞英.用5′端核酸外切酶法检测基因印迹——编码区单核苷酸多态性[J].中华医学遗传学杂志.2003
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