中国水仙DFR基因启动子的克隆及功能

论文摘要

为了解中国水仙花青素合成途径关键基因DFR（NtDFR）的表达调控以及中国水仙不能合成花青素的分子机制,采用染色体步移法从中国水仙中克隆NtDFR基因起始密码子上游962 bp的启动子序列.生物信息学分析结果表明启动子序列除包含TATA-box、CAAT-box等基本启动子元件外,还包含光调控元件、植物激素响应元件、胁迫响应元件等多个顺式作用元件.此外,该启动子序列还含有MYB转录因子结合位点.为验证启动子的表达特性,将NtDFR启动子取代植物表达载体pBI121上35S启动子,构建pBI121-pNtDFR::GUS载体,利用农杆菌转化烟草叶片瞬时表达,通过GUS组织染色法确定了克隆的启动子的活性.将中国水仙R2R3-MYB转录因子NtMYB2、NtMYB5分别和pBI121-p NtDFR::GUS共同注射烟草,定量PCR和GUS组织化学染色结果表明NtMYB2和NtMYB5都使NtDFR启动子诱导的烟草叶片GUS颜色变浅以及GUS基因表达量下降,表明NtMYB2和NtMYB5是NtDFR的抑制因子.本研究结果有助于了解中国水仙花青素合成途径的分子调控机制.（图5参34）

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 水仙NtDFR基因启动子的克隆
•     1.2.2 启动子序列分析
•     1.2.3 植物表达载体pBI121-pNtDFR::GUS的构建
•     1.2.4 烟草瞬时表达
•     1.2.5 GUS组织化学染色和Real-time qPCR检测瞬时表达烟草叶片中GUS基因的表达
• 2 结果与分析
•   2.1 NtDFR启动子的克隆
•   2.2 NtDFR启动子序列分析
•   2.3 植物表达载体p BI121-pNtDFR::GUS构建
•   2.4 烟草瞬时表达验证NtDFR启动子功能
• 3 讨论与结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 姚红,周平,范雨昕,孙瑞琦,Muhammad Anwar,曾黎辉

关键词: 中国水仙,二氢黄酮醇还原酶基因,启动子,功能鉴定

来源: 应用与环境生物学报 2019年04期

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑,农业科技

专业: 生物学,园艺

单位: 福建农林大学园艺学院

基金: 福建农林大学科技创新基金(KFA17352A,KFA17602A),福建农林大学国际科技合作与交流项目(Kxb16013A)资助~~

分类号: S682.21;Q943.2

DOI: 10.19675/j.cnki.1006-687x.2018.10009

页码: 993-998

总页数: 6

文件大小: 1549K

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